转基因油菜衰老特异性表达病程相关基因CH5B和HvOxOh的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 文献综述 | 第8-17页 |
| ·油菜菌核病研究 | 第8页 |
| ·转基因技术研究进展 | 第8-10页 |
| ·转基因技术在生产中的应用 | 第8-9页 |
| ·In planta转化 | 第9-10页 |
| ·抗病基因资源 | 第10-14页 |
| ·抗病基因 | 第11页 |
| ·植物防卫基因 | 第11-14页 |
| ·几丁质酶 | 第11-12页 |
| ·草酸氧化酶 | 第12-13页 |
| ·抗病协同作用 | 第13-14页 |
| ·拟南芥衰老特异性启动子SAG12 | 第14页 |
| ·油菜转基因技术 | 第14-15页 |
| ·菌核病接种方法 | 第15-17页 |
| ·牙签活体接种法 | 第15页 |
| ·子囊孢子喷雾法 | 第15-16页 |
| ·菌丝体块接种 | 第16页 |
| ·菌丝体悬浮液法 | 第16页 |
| ·草酸毒素法 | 第16页 |
| ·离体叶片接种法 | 第16-17页 |
| 2 研究目的和意义 | 第17-18页 |
| ·研究目的 | 第17页 |
| ·研究意义 | 第17-18页 |
| 3 材料和方法 | 第18-27页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·转化载体 | 第18页 |
| ·实验试剂 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-27页 |
| ·载体构建 | 第18-19页 |
| ·载体35S:CH5B的构建 | 第18-19页 |
| ·载体SAG12:CH5B的构建 | 第19页 |
| ·载体SAG12:HvOxOh的构建 | 第19页 |
| ·农杆菌介导的油菜遗传转化 | 第19-22页 |
| ·农杆菌的培养 | 第19-21页 |
| ·外植体的获得 | 第21页 |
| ·预培养 | 第21页 |
| ·共培养 | 第21-22页 |
| ·分化筛选培养 | 第22页 |
| ·生根培养与移栽 | 第22页 |
| ·转基因植株的分子鉴定 | 第22-26页 |
| ·PCR鉴定 | 第22-23页 |
| ·Southern杂交 | 第23-24页 |
| ·RT-PCR检测 | 第24-26页 |
| ·几丁质酶活性测定 | 第26-27页 |
| ·胶体几丁质的制备 | 第26页 |
| ·活性测定 | 第26-27页 |
| ·蛋白质浓度的测定 | 第27页 |
| ·草酸氧化酶活性的测定 | 第27页 |
| ·菌核病抗性试验 | 第27页 |
| 4 结果和分析 | 第27-41页 |
| ·苗龄对愈伤诱导的影响 | 第27-28页 |
| ·共培养时间的确立 | 第28-29页 |
| ·6-BAP对外植体的影响 | 第29页 |
| ·CB浓度对芽伸长和生根的影响 | 第29-30页 |
| ·分子鉴定结果 | 第30-37页 |
| ·PCR扩增 | 第30-32页 |
| ·Southern杂交 | 第32-33页 |
| ·RT-PCR检测 | 第33-35页 |
| ·Northern杂交 | 第35-37页 |
| ·几丁质酶活性 | 第37-39页 |
| ·草酸氧化酶活性 | 第39页 |
| ·核盘菌接种 | 第39-41页 |
| 5 讨论 | 第41-46页 |
| ·油菜转基因技术 | 第41-44页 |
| ·共培养时间 | 第41-42页 |
| ·激素浓度 | 第42页 |
| ·抗生素浓度 | 第42-43页 |
| ·转化效率 | 第43-44页 |
| ·SAG12启动子 | 第44页 |
| ·外源基因与抗病性 | 第44-46页 |
| 6 展望 | 第46-48页 |
| 图版 | 第48-49页 |
| 图版说明 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
