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用悬浮芯片技术定量检测多种病原体的研究

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-11页
本研究中的缩略语第11-13页
引言第13-34页
 1 面临生物威胁的形势第13-16页
 2. 生物恐怖因子的种类第16-18页
 3. 生物恐怖因子的检测技术第18-22页
 4. 悬浮芯片及其应用概况第22-26页
 5. 本研究的目的、意义第26-27页
 参考文献第27-34页
第一部分 悬浮芯片定量检测方法的建立第34-62页
 引言第34-36页
 1. 材料与方法第36-46页
   ·材料第36-40页
     ·抗原、抗体第36页
     ·主要试剂第36-37页
     ·缓冲液第37-38页
     ·菌株与培养基第38页
     ·主要耗材第38页
     ·主要仪器第38-39页
     ·悬浮芯片检测仪的结构及用途第39-40页
   ·方法第40-46页
     ·鼠疫菌F1抗原抗体的制备第40页
     ·BCA法测定蛋白的浓度第40页
     ·抗体包被编码微球第40-42页
     ·生物素标记抗体第42-43页
     ·待测样品制备第43-44页
     ·样品的悬浮芯片检测第44-45页
     ·双抗体夹心ELISA检测第45-46页
     ·方法的特异性检测第46页
     ·定量检测第46页
 2. 结果第46-57页
   ·悬浮芯片检测方法的优化第46-52页
     ·微球包被不同抗体及包被量的优化第46-48页
     ·生物素化抗体的优化第48-49页
     ·双抗夹心法检测鼠疫菌F1抗原抗体配对组合第49-51页
     ·悬浮芯片检测过程的优化第51-52页
   ·ELISA方法的优化第52页
   ·悬浮芯片定量检测模型的建立第52-54页
     ·鼠疫菌F1抗原标准曲线第52-53页
     ·确定悬浮芯片检测鼠疫菌F1抗原检测灵敏度和动态范围第53-54页
     ·悬浮芯片定量检测鼠疫菌F1抗原的回收率第54页
   ·悬浮芯片检测鼠疫菌方法的特异性第54-55页
   ·悬浮芯片与ELISA方法检测鼠疫菌F1抗原的比较第55-57页
     ·检测方法相关性、灵敏度与动态范围的比较第55-57页
     ·检测30份鼠疫菌F1抗原样品的结果比较第57页
     ·模拟样品检测第57页
 3. 讨论第57-60页
 4. 小结第60页
 参考文献第60-62页
第二部分 病原体多重悬浮芯片检测方法建立与初步评价第62-126页
 引言第62-66页
 1 材料与方法第66-77页
   ·材料第66-68页
     ·抗原抗体第67页
     ·菌株第67页
     ·培养基第67-68页
     ·主要耗材第68页
   ·方法第68-77页
     ·细菌培养及菌液制备第68-69页
     ·待测样品制备第69-70页
     ·抗体包被编码微球第70-71页
     ·生物素化抗体第71页
     ·悬浮芯片单因子分析物检测第71页
     ·悬浮芯片五种病原体多重检测第71-74页
     ·悬浮芯片多重检测方法检测单因子分析物的敏感性实验第74-75页
     ·ELISA检测第75页
     ·干扰背景下悬浮芯片多重检测方法检测能力第75-76页
     ·悬浮芯片定量检测第76-77页
     ·悬浮芯片多重检测方法特异性实验第77页
     ·生物安全防护第77页
 2 结果第77-112页
   ·悬浮芯片检测方法的优化第77-80页
     ·鼠疫菌悬浮芯片检测方法的优化第77-78页
     ·炭疽菌芽孢悬浮芯片检测方法的优化第78页
     ·SEB悬浮芯片检测方法的优化第78-79页
     ·ricin悬浮芯片检测方法的优化第79页
     ·SARS-CoV悬浮芯片检测方法的优化第79-80页
   ·悬浮芯片五种病原体多重检测模式的建立第80-85页
     ·五种病原体多重检测的悬浮芯片方法优化第80-84页
     ·悬浮芯片内部质控方法的建立第84-85页
   ·悬浮芯片方法检测病原体的标准曲线第85-89页
     ·悬浮芯片方法检测鼠疫菌的标准曲线与方程式第86页
     ·悬浮芯片方法检测炭疽芽孢的标准曲线与方程式第86-87页
     ·悬浮芯片方法检测SEB的标准曲线与方程式第87页
     ·悬浮芯片方法检测ricin的标准曲线与方程式第87-88页
     ·悬浮芯片方法检测SARS-CoV N蛋白的标准曲线与方程式第88-89页
   ·X-MAP与ELISA方法检测敏感度和检测范围比较第89-94页
     ·鼠疫菌检测第89-90页
     ·炭疽芽孢检测第90-91页
     ·SEB检测第91-92页
     ·蓖麻毒素A检测第92页
     ·SARS-CoV N蛋白检测第92-94页
     ·X-MAP方法与ELISA方法检测样品结果的吻合性比较第94页
   ·X-MAP方法检测目的分析物在有其他对象干扰情况下的灵敏度第94-96页
     ·检测鼠疫菌第94-95页
     ·检测SARS-CoV N蛋白第95-96页
   ·X-MAP方法的特异性第96-98页
   ·X-MAP定量检测五种病原体第98-101页
     ·X-MAP依次定量检测单种病原体第98-100页
     ·背景干扰条件下目标物定量检测第100-101页
   ·“白色粉末”污染样品检测结果第101-108页
     ·不同粉末样品中炭疽芽孢的检测第101-102页
     ·奶粉人工污染样品中鼠疫菌定量检测第102-103页
     ·奶粉人工污染样品中炭疽芽孢定量检测第103-104页
     ·奶粉人工污染样品中SEB定量检测第104-105页
     ·奶粉人工污染样品中ricin定量检测第105-106页
     ·奶粉人工污染样品中SARS-CoV N蛋白定量检测第106-107页
     ·不同粉末污染样品中多病原体检测第107-108页
   ·样品测试第108-110页
   ·盲样检测第110-112页
 3 讨论第112-117页
 4 小结第117-118页
 参考文献第118-126页
第三部分 结论第126-127页
 1、建立了编码微球蛋白质悬浮芯片的标准实验方法第126页
 2、建立了多种类病原体悬浮芯片检测技术第126页
 3、评价了方法的敏感性、特异性、重复性、准确性第126页
 4、实现了定量检测第126页
 5、考核对粉末样品的定性、定量检测能力第126-127页
综述第127-144页
发表论文第144-145页
申请或获得专利第145-146页
致谢第146页

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