中文摘要 | 第1-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
本研究中的缩略语 | 第11-13页 |
引言 | 第13-34页 |
1 面临生物威胁的形势 | 第13-16页 |
2. 生物恐怖因子的种类 | 第16-18页 |
3. 生物恐怖因子的检测技术 | 第18-22页 |
4. 悬浮芯片及其应用概况 | 第22-26页 |
5. 本研究的目的、意义 | 第26-27页 |
参考文献 | 第27-34页 |
第一部分 悬浮芯片定量检测方法的建立 | 第34-62页 |
引言 | 第34-36页 |
1. 材料与方法 | 第36-46页 |
·材料 | 第36-40页 |
·抗原、抗体 | 第36页 |
·主要试剂 | 第36-37页 |
·缓冲液 | 第37-38页 |
·菌株与培养基 | 第38页 |
·主要耗材 | 第38页 |
·主要仪器 | 第38-39页 |
·悬浮芯片检测仪的结构及用途 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-46页 |
·鼠疫菌F1抗原抗体的制备 | 第40页 |
·BCA法测定蛋白的浓度 | 第40页 |
·抗体包被编码微球 | 第40-42页 |
·生物素标记抗体 | 第42-43页 |
·待测样品制备 | 第43-44页 |
·样品的悬浮芯片检测 | 第44-45页 |
·双抗体夹心ELISA检测 | 第45-46页 |
·方法的特异性检测 | 第46页 |
·定量检测 | 第46页 |
2. 结果 | 第46-57页 |
·悬浮芯片检测方法的优化 | 第46-52页 |
·微球包被不同抗体及包被量的优化 | 第46-48页 |
·生物素化抗体的优化 | 第48-49页 |
·双抗夹心法检测鼠疫菌F1抗原抗体配对组合 | 第49-51页 |
·悬浮芯片检测过程的优化 | 第51-52页 |
·ELISA方法的优化 | 第52页 |
·悬浮芯片定量检测模型的建立 | 第52-54页 |
·鼠疫菌F1抗原标准曲线 | 第52-53页 |
·确定悬浮芯片检测鼠疫菌F1抗原检测灵敏度和动态范围 | 第53-54页 |
·悬浮芯片定量检测鼠疫菌F1抗原的回收率 | 第54页 |
·悬浮芯片检测鼠疫菌方法的特异性 | 第54-55页 |
·悬浮芯片与ELISA方法检测鼠疫菌F1抗原的比较 | 第55-57页 |
·检测方法相关性、灵敏度与动态范围的比较 | 第55-57页 |
·检测30份鼠疫菌F1抗原样品的结果比较 | 第57页 |
·模拟样品检测 | 第57页 |
3. 讨论 | 第57-60页 |
4. 小结 | 第60页 |
参考文献 | 第60-62页 |
第二部分 病原体多重悬浮芯片检测方法建立与初步评价 | 第62-126页 |
引言 | 第62-66页 |
1 材料与方法 | 第66-77页 |
·材料 | 第66-68页 |
·抗原抗体 | 第67页 |
·菌株 | 第67页 |
·培养基 | 第67-68页 |
·主要耗材 | 第68页 |
·方法 | 第68-77页 |
·细菌培养及菌液制备 | 第68-69页 |
·待测样品制备 | 第69-70页 |
·抗体包被编码微球 | 第70-71页 |
·生物素化抗体 | 第71页 |
·悬浮芯片单因子分析物检测 | 第71页 |
·悬浮芯片五种病原体多重检测 | 第71-74页 |
·悬浮芯片多重检测方法检测单因子分析物的敏感性实验 | 第74-75页 |
·ELISA检测 | 第75页 |
·干扰背景下悬浮芯片多重检测方法检测能力 | 第75-76页 |
·悬浮芯片定量检测 | 第76-77页 |
·悬浮芯片多重检测方法特异性实验 | 第77页 |
·生物安全防护 | 第77页 |
2 结果 | 第77-112页 |
·悬浮芯片检测方法的优化 | 第77-80页 |
·鼠疫菌悬浮芯片检测方法的优化 | 第77-78页 |
·炭疽菌芽孢悬浮芯片检测方法的优化 | 第78页 |
·SEB悬浮芯片检测方法的优化 | 第78-79页 |
·ricin悬浮芯片检测方法的优化 | 第79页 |
·SARS-CoV悬浮芯片检测方法的优化 | 第79-80页 |
·悬浮芯片五种病原体多重检测模式的建立 | 第80-85页 |
·五种病原体多重检测的悬浮芯片方法优化 | 第80-84页 |
·悬浮芯片内部质控方法的建立 | 第84-85页 |
·悬浮芯片方法检测病原体的标准曲线 | 第85-89页 |
·悬浮芯片方法检测鼠疫菌的标准曲线与方程式 | 第86页 |
·悬浮芯片方法检测炭疽芽孢的标准曲线与方程式 | 第86-87页 |
·悬浮芯片方法检测SEB的标准曲线与方程式 | 第87页 |
·悬浮芯片方法检测ricin的标准曲线与方程式 | 第87-88页 |
·悬浮芯片方法检测SARS-CoV N蛋白的标准曲线与方程式 | 第88-89页 |
·X-MAP与ELISA方法检测敏感度和检测范围比较 | 第89-94页 |
·鼠疫菌检测 | 第89-90页 |
·炭疽芽孢检测 | 第90-91页 |
·SEB检测 | 第91-92页 |
·蓖麻毒素A检测 | 第92页 |
·SARS-CoV N蛋白检测 | 第92-94页 |
·X-MAP方法与ELISA方法检测样品结果的吻合性比较 | 第94页 |
·X-MAP方法检测目的分析物在有其他对象干扰情况下的灵敏度 | 第94-96页 |
·检测鼠疫菌 | 第94-95页 |
·检测SARS-CoV N蛋白 | 第95-96页 |
·X-MAP方法的特异性 | 第96-98页 |
·X-MAP定量检测五种病原体 | 第98-101页 |
·X-MAP依次定量检测单种病原体 | 第98-100页 |
·背景干扰条件下目标物定量检测 | 第100-101页 |
·“白色粉末”污染样品检测结果 | 第101-108页 |
·不同粉末样品中炭疽芽孢的检测 | 第101-102页 |
·奶粉人工污染样品中鼠疫菌定量检测 | 第102-103页 |
·奶粉人工污染样品中炭疽芽孢定量检测 | 第103-104页 |
·奶粉人工污染样品中SEB定量检测 | 第104-105页 |
·奶粉人工污染样品中ricin定量检测 | 第105-106页 |
·奶粉人工污染样品中SARS-CoV N蛋白定量检测 | 第106-107页 |
·不同粉末污染样品中多病原体检测 | 第107-108页 |
·样品测试 | 第108-110页 |
·盲样检测 | 第110-112页 |
3 讨论 | 第112-117页 |
4 小结 | 第117-118页 |
参考文献 | 第118-126页 |
第三部分 结论 | 第126-127页 |
1、建立了编码微球蛋白质悬浮芯片的标准实验方法 | 第126页 |
2、建立了多种类病原体悬浮芯片检测技术 | 第126页 |
3、评价了方法的敏感性、特异性、重复性、准确性 | 第126页 |
4、实现了定量检测 | 第126页 |
5、考核对粉末样品的定性、定量检测能力 | 第126-127页 |
综述 | 第127-144页 |
发表论文 | 第144-145页 |
申请或获得专利 | 第145-146页 |
致谢 | 第146页 |