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产酸克雷伯氏菌(Klebsiella oxytoca)HP1高效产氢工程菌的构建

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
1 前言第11-27页
   ·概述第11-12页
     ·氢能第11页
     ·氢的制备第11-12页
   ·生物制氢第12-25页
     ·光合法生物制氢技术第12-16页
     ·发酵法生物制氢技术第16-22页
       ·发酵产氢细菌第16-17页
       ·微生物发酵产氢的代谢途径第17-21页
       ·微生物产氢发酵的催化体系第21-22页
     ·高产氢基因工程菌研究第22-25页
       ·改造产氢过程关键酶——氢酶第23-24页
       ·引入新的代谢途径第24页
       ·阻断消耗还原力的代谢旁路第24-25页
   ·本论文的研究内容与目的第25-27页
2 材料与方法第27-41页
   ·材料第27-29页
     ·菌种与质粒第27页
     ·引物第27-28页
     ·主要试剂第28页
     ·主要仪器第28-29页
     ·常用培养基第29页
     ·常用溶液的配制第29页
   ·实验方法第29-41页
     ·常规实验操作第29-31页
     ·K.oxytoca HP1多效基因adhE~-突变株的构建第31-36页
       ·12816p adhE 基因部分序列的扩增第31-32页
       ·K.oxytoca HP1 对链霉素的抗性第32-33页
       ·adhE 同源整合质粒pTA-Str 的构建第33-34页
       ·adhE~-突变株的构建第34-35页
       ·adhE~-突变株的生长特性和产氢、产乙醇特性变化第35-36页
     ·K.oxytoca HP1 乳酸脱氢酶基因LDHa突变株的构建第36-41页
       ·8826p LDHa 基因部分序列的扩增第36-37页
       ·K.oxytoca HP1 对四环素的抗性第37页
       ·LDHa~- 同源整合质粒pLDH-Tr 的构建第37-39页
       ·LDHa~-突变株的构建第39-40页
       ·LDHa~-突变株的生长特性和产氢特性变化第40-41页
3 结果与分析第41-60页
   ·K.oxytoca HP1 多效基因adhE突变株的构建第41-50页
     ·12816p adhE 基因部分序列的扩增第41-43页
     ·K.oxytoca HP1 对链霉素的抗性第43-44页
     ·adhE 同源整合质粒pTA-Str 的构建第44-45页
     ·adhE~-突变株的构建第45-48页
     ·adhE~-突变株的生长特性和产氢、产乙醇特性变化第48-50页
   ·K.oxytoca HP1 乳酸脱氢酶基因LDHa~-突变株的构建第50-60页
     ·882bp LDHa 基因部分序列的扩增第50-51页
     ·K.oxytoca HP1 对四环素的抗性第51-54页
     ·LDHa 同源整合质粒pLDH-Tr 的构建第54-57页
     ·LDHa~-突变株的构建第57-58页
     ·LDHa~-突变株的生长特性和产氢特性变化第58-60页
4 结论与讨论第60-62页
   ·实验小结第60-61页
   ·后续工作展望第61-62页
参考文献第62-67页
致谢第67页

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