橙色红曲菌AS3.4384产孢及原生质体制备和再生条件的优化
| 缩略语表 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 目录 | 第7-11页 |
| 前言 | 第11-28页 |
| 1 红曲菌及其发展现状 | 第11-14页 |
| ·红曲菌简介 | 第11页 |
| ·红曲菌初级代谢产物 | 第11-12页 |
| ·红曲菌初级代谢产物 | 第12-14页 |
| ·橙色红曲菌简介 | 第14页 |
| 2 真菌的生殖 | 第14-19页 |
| ·真菌的孢子 | 第14-15页 |
| ·影响产孢的因素 | 第15-19页 |
| ·营养条件 | 第16-17页 |
| ·物理因素 | 第17-19页 |
| 3 原生质体制备及再生 | 第19-27页 |
| ·原生质体制备的影响因素 | 第19-22页 |
| ·菌龄 | 第19-20页 |
| ·培养基成分 | 第20页 |
| ·酶种类 | 第20页 |
| ·酶浓度 | 第20页 |
| ·酶解时间 | 第20-21页 |
| ·酶解温度 | 第21页 |
| ·酶解液pH值 | 第21页 |
| ·渗透压稳定剂的性质及浓度 | 第21页 |
| ·预处理方式 | 第21-22页 |
| ·其他影响因素 | 第22页 |
| ·原生质体再生的影响因素 | 第22-24页 |
| ·培养方式 | 第22-23页 |
| ·培养基 | 第23页 |
| ·菌龄 | 第23页 |
| ·渗透压稳定剂 | 第23页 |
| ·Ca~(2+)离子 | 第23-24页 |
| ·酶解参数 | 第24页 |
| ·原生质体的贮存条件 | 第24页 |
| ·其他影响因素 | 第24页 |
| ·原生质体的转化 | 第24-26页 |
| ·原生质体技术的应用 | 第26-27页 |
| 4 主要研究内容、目的及意义 | 第27-28页 |
| 材料与方法 | 第28-38页 |
| 1 实验材料 | 第28-33页 |
| ·供试菌株和质粒 | 第28-29页 |
| ·仪器与设备 | 第29-30页 |
| ·试剂和溶液 | 第30-33页 |
| ·试剂 | 第30页 |
| ·溶液配制 | 第30-33页 |
| 2 实验方法 | 第33-38页 |
| ·孢子的收集 | 第33-34页 |
| ·茵丝体的获得 | 第34页 |
| ·固体培养法 | 第34页 |
| ·液体培养法 | 第34页 |
| ·渗透压稳定剂和混合酶液 | 第34页 |
| ·原生质体的制备 | 第34-35页 |
| ·原生质体的再生 | 第35页 |
| ·从原生质体直接提取基因组DNA | 第35-36页 |
| ·质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·原生质体的转化 | 第37-38页 |
| 结果与分析 | 第38-59页 |
| 1 孢子形态的观察 | 第38-39页 |
| 2 产孢条件的优化 | 第39-44页 |
| ·培养时间对固态培养产孢量的影响 | 第39页 |
| ·培养基种类对固态培养产孢量的影响 | 第39-40页 |
| ·液体种子接种量对固态培养产孢量的影响 | 第40页 |
| ·培养温度对固态培养产孢量的影响 | 第40-42页 |
| ·初始培养基pH值对固态培养产孢量的影响 | 第42页 |
| ·光照对固态培养产孢量的影响 | 第42页 |
| ·培养基浓度对固态培养产孢量的影响 | 第42-44页 |
| 3 原生质体的制备条件的优化 | 第44-54页 |
| ·原生质体的观察 | 第44-45页 |
| ·培养方式对原生质体制备的影响 | 第45-46页 |
| ·培养基种类对原生质体制备的影响 | 第46页 |
| ·酶种类对原生质体形成的影响 | 第46-47页 |
| ·酶浓度对原生质体形成的影响 | 第47-49页 |
| ·蜗牛酶浓度梯度 | 第47页 |
| ·裂解酶浓度梯度 | 第47-49页 |
| ·纤维素酶浓度梯度 | 第49页 |
| ·菌龄对原生质体形成的影响 | 第49-50页 |
| ·冻存孢子对原生质体形成的影响 | 第49-50页 |
| ·新鲜孢子对原生质体形成的影响 | 第50页 |
| ·酶解时间对原生质体形成的影响 | 第50-52页 |
| ·渗透压稳定剂对原生质体形成的影响 | 第52页 |
| ·渗透压稳定剂pH对原生质体形成的影响 | 第52-53页 |
| ·从原生质体中提取基因组DNA | 第53-54页 |
| 4 原生质体再生条件的优化 | 第54-57页 |
| ·再生培养基成分对原生质体再生的影响 | 第54页 |
| ·菌龄对原生质体再生的影响 | 第54-55页 |
| ·原生质体铺平板的条件和方法对再生率的影响 | 第55页 |
| ·酶解时间对原生质体再生的影响 | 第55-57页 |
| ·渗透压稳定剂对原生质体再生的影响 | 第57页 |
| 5 原生质体转化 | 第57-59页 |
| ·潮霉素B对AS3.4384的最小抑止浓度 | 第57-58页 |
| ·提取含有潮霉素B抗性的质粒h4 | 第58页 |
| ·原生质体的转化 | 第58-59页 |
| 讨论 | 第59-64页 |
| 1 橙色红曲菌产孢条件的优化 | 第59-61页 |
| 2 橙色红曲菌原生质体制备及再生条件的优化 | 第61-64页 |
| 小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简历 | 第74页 |
