| 中文摘要 | 第1-17页 |
| 英文摘要 | 第17-19页 |
| 第一章 绪论 | 第19-49页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶 | 第19-35页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶的种类与分布 | 第19-20页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶基因的克隆和表达调控 | 第20-25页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶的催化机理和活性中心 | 第25-26页 |
| ·脂肪酸脱饱和的生物学作用 | 第26-29页 |
| ·脂肪酸脱饱和遗传操作策略 | 第29页 |
| ·脂肪酸脱饱和的应用进展 | 第29-34页 |
| ·脂肪酸脱饱和遗传操作的新思路和存在的问题 | 第34-35页 |
| ·状真菌基因工程 | 第35-41页 |
| ·转化的丝状真菌种类 | 第36页 |
| ·丝状真菌的启动子 | 第36页 |
| ·选择标记 | 第36-38页 |
| ·丝状真菌转化载体的构建 | 第38页 |
| ·丝状真菌转化的方法 | 第38-39页 |
| ·丝状真菌的复制型转化和整合型转化 | 第39页 |
| ·丝状真菌转化的遗传稳定性 | 第39-40页 |
| ·丝状真菌基因工程的现状 | 第40-41页 |
| ·微生物发酵生产UFAs的现状 | 第41-46页 |
| ·UFAs的代谢途径 | 第41-43页 |
| ·微生物发酵生产UFAs的新进展 | 第43-46页 |
| ·立题背景及本文研究内容 | 第46-48页 |
| ·本课题的创新之处 | 第48-49页 |
| 第二章 被孢霉Δ~9脂肪酸脱饱和酶基因保守区的cDNA克隆及结构分析 | 第49-63页 |
| ·材料 | 第49-57页 |
| ·材料 | 第49页 |
| ·方法 | 第49-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-62页 |
| ·被孢霉RNA的提取 | 第57-58页 |
| ·简并引物的设计与合成 | 第58-60页 |
| ·PCR扩增反应的优化 | 第60-61页 |
| ·被孢霉Δ~9脂肪酸脱饱和酶基因保守区的克隆 | 第61页 |
| ·克隆片段的分析 | 第61-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 第三章 被孢霉cDNA文库的构建 | 第63-77页 |
| ·材料和方法 | 第64-72页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-72页 |
| ·结果与讨论 | 第72-76页 |
| ·被孢霉mRNA的制备与鉴定 | 第72-73页 |
| ·cDNA双链的合成 | 第73-74页 |
| ·cDNA两条链质量的检测 | 第74页 |
| ·T4连接酶连接缓冲液质量的验证 | 第74-75页 |
| ·对照反应 | 第75页 |
| ·预连接-包装反应 | 第75页 |
| ·cDNA插入片段大小的检测 | 第75-76页 |
| ·被孢霉cDNA文库的构建 | 第76页 |
| ·cDNA文库的扩增 | 第76页 |
| ·本章小结 | 第76-77页 |
| 第四章 Δ~9脂肪酸脱饱和酶cDNA序列的筛选 | 第77-88页 |
| ·材料和方法 | 第77-82页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·2 方法 | 第77-82页 |
| ·结果与讨论 | 第82-87页 |
| ·PCR标记探针法的初步探讨 | 第82-84页 |
| ·PCR探针产量的估计 | 第84页 |
| ·探针的灵敏度检测 | 第84页 |
| ·文库筛选 | 第84-85页 |
| ·插入片段的亚克隆 | 第85-86页 |
| ·测序结果的分析 | 第86-87页 |
| ·本章小结 | 第87-88页 |
| 第五章 全长cDNA序列的获得 | 第88-101页 |
| ·材料和方法 | 第88-92页 |
| ·材料 | 第88-89页 |
| ·方法 | 第89-92页 |
| ·结果与分析 | 第92-100页 |
| ·5'RACE引物的设计与合成 | 第92页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第92页 |
| ·被孢霉Δ~9脂肪酸脱饱和酶cDNA全序列的分析 | 第92-96页 |
| ·新类型的细胞色素b_5融合蛋白 | 第96-100页 |
| ·本章小结 | 第100-101页 |
| 第六章 被孢霉Δ~9脂肪酸脱饱和酶蛋白质序列的结构与功能分析 | 第101-118页 |
| ·实验原理 | 第101-105页 |
| ·序列相似性的检索 | 第101-102页 |
| ·ProtoParam | 第102-103页 |
| ·ProtScale | 第103页 |
| ·二级结构的预测—PHD-蛋白质结构预测 | 第103-104页 |
| ·蛋白质功能位点数据库(PROSITE) | 第104-105页 |
| ·蛋白质结构域数据库ProDom | 第105页 |
| ·pSORT | 第105页 |
| ·TMpred | 第105页 |
| ·结果 | 第105-116页 |
| ·FASTA结果 | 第105-108页 |
| ·ProtoParam运行结果 | 第108页 |
| ·ProScale运行结果 | 第108-109页 |
| ·PHD预测(PredictProtein) | 第109-112页 |
| ·Prosite扫描结果 | 第112-113页 |
| ·ProDom查询结果 | 第113-114页 |
| ·pSort运行结果 | 第114页 |
| ·TMpred运行结果 | 第114-116页 |
| ·本章小结 | 第116-118页 |
| 第七章 多基因家族的研究 | 第118-125页 |
| ·材料和方法 | 第118-121页 |
| ·材料 | 第118页 |
| ·方法 | 第118-121页 |
| ·结果与讨论 | 第121-123页 |
| ·被孢霉DNA提取方法的比较 | 第121-122页 |
| ·Southern杂交结果 | 第122-123页 |
| ·本章小结 | 第123-125页 |
| 第八章 Δ~9脂肪酸脱饱和酶体内表达的研究 | 第125-132页 |
| ·材料和方法 | 第125-128页 |
| ·材料 | 第125-126页 |
| ·方法 | 第126-128页 |
| ·结果与讨论 | 第128-130页 |
| ·Northern杂交探针的制备 | 第128页 |
| ·杂交探针浓度的标定 | 第128页 |
| ·被孢霉发酵进程的Δ~9脂肪酸脱饱和酶mRNA变化 | 第128-130页 |
| ·本章小结 | 第130-132页 |
| 第九章 被孢霉遗传背景的研究 | 第132-143页 |
| ·材料和方法 | 第132-136页 |
| ·材料 | 第132页 |
| ·方法 | 第132-136页 |
| ·结果与讨论 | 第136-142页 |
| ·被孢霉内源性内切酶的检测 | 第136-137页 |
| ·被孢霉基因组限制性内切酶分析 | 第137-138页 |
| ·被孢霉质粒的提取 | 第138-139页 |
| ·被孢霉抗生素特性的研究 | 第139-142页 |
| ·本章小结 | 第142-143页 |
| 结论 | 第143-145页 |
| 参考文献 | 第145-162页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第162-163页 |
| 附录1 | 第163-171页 |
| 附录2 | 第171-175页 |
| 附录3 | 第175-176页 |
| 附录4 | 第176-177页 |
| 附录5 | 第177-179页 |
| 附录6 | 第179-180页 |
| 致谢 | 第180页 |
