钝齿棒杆菌L-天冬氨酸α-脱羧酶基因的克隆与表达
| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 符号与缩略语 | 第11-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-29页 |
| ·天门冬氨酸-α-脱羧酸基因的结构功能和研究进展 | 第12-18页 |
| ·panD基因与蛋白质结构 | 第12-15页 |
| ·panBCD操纵子 | 第15-16页 |
| ·panD基因的应用 | 第16-18页 |
| ·泛酸生产及检测 | 第18-22页 |
| ·泛酸的化学法制备 | 第18-19页 |
| ·泛酸的生物法制备 | 第19-20页 |
| ·泛酸的检测 | 第20-22页 |
| ·外源基因在原核生物中的表达 | 第22-25页 |
| ·影响外源基因表达水平的因素 | 第22-23页 |
| ·表达载体的选择 | 第23-25页 |
| ·选题背景、目的及主要内容 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-29页 |
| 第二章 分析方法的建立 | 第29-44页 |
| ·前言 | 第29-30页 |
| ·材料与方法 | 第30-31页 |
| ·药品与试剂 | 第30页 |
| ·仪器设备 | 第30页 |
| ·流动相的配置 | 第30-31页 |
| ·色谱条件 | 第31页 |
| ·泛酸的定性与定量方法 | 第31页 |
| ·结果与讨论 | 第31-42页 |
| ·HPLC法流动相的选择 | 第31-39页 |
| ·仪器稳定性研究 | 第39页 |
| ·方法线性范围测定 | 第39-40页 |
| ·方法回收率测定 | 第40-41页 |
| ·泛酸的定性 | 第41-42页 |
| ·本章小结 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-44页 |
| 第三章 L-天冬氨酸α-脱羧酸基因的克隆与鉴定 | 第44-65页 |
| ·前言 | 第44页 |
| ·材料与方法 | 第44-53页 |
| ·菌种与质粒 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·主要药品与试剂 | 第46-47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·实验方法 | 第47-53页 |
| ·结果与讨论 | 第53-63页 |
| ·引物设计 | 第53-55页 |
| ·C.crenatum生长曲线测定 | 第55-56页 |
| ·细菌基因组提取结果 | 第56-57页 |
| ·PCR方法扩增panD基因 | 第57页 |
| ·pEKEx2质粒的提取 | 第57-58页 |
| ·重组质粒的获得与酶切鉴定 | 第58-59页 |
| ·重组质粒电击转化 C.crenatum | 第59-62页 |
| ·重组菌株的获得与基因鉴定 | 第62-63页 |
| ·本章小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
| 第四章 工程菌生产能力研究 | 第65-80页 |
| ·材料与方法 | 第65-69页 |
| ·菌种来源 | 第65页 |
| ·药品与试剂 | 第65-66页 |
| ·主要仪器设备 | 第66页 |
| ·培养基 | 第66页 |
| ·转化液 | 第66-67页 |
| ·方法 | 第67-69页 |
| ·结果与讨论 | 第69-78页 |
| ·工程菌蛋白表达的鉴定 | 第70-72页 |
| ·高产菌的筛选及稳定性研究 | 第72-74页 |
| ·诱导物对产酶的影响 | 第74-76页 |
| ·生物素对产酶的影响 | 第76-77页 |
| ·工程菌泛酸生产能力及其对β-Ala产量的影响 | 第77-78页 |
| ·小结 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-80页 |
| 第五章 总结与展望 | 第80-82页 |
| 附录 | 第82-83页 |
| 致谢 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第84页 |
