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不同诱导策略下毕赤酵母生产猪α干扰素的发酵性能和代谢酶学分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 绪论第8-14页
   ·研究背景第8-10页
     ·代谢控制和分析方法第8页
     ·巴斯德毕赤酵母表达系统第8-10页
   ·研究意义和思路第10-14页
     ·猪α干扰素应用前景第10-11页
     ·研究内容和研究思路第11-14页
第二章 材料与方法第14-20页
   ·材料第14-15页
     ·主要仪器和设备第14页
     ·实验菌株第14页
     ·毕赤酵母各级培养基第14-15页
   ·培养方法第15-16页
     ·发酵罐种子的摇瓶培养第15页
     ·摇瓶培养探索最优山梨醇流加速率第15页
     ·10L 发酵罐培养方法第15-16页
   ·分析方法第16-20页
     ·细胞浓度、甲醇浓度测定第16页
     ·发酵液中山梨醇浓度和胞内物质含量测定第16-17页
     ·醇氧化酶、甲醛脱氢酶和甲酸脱氢酶活性测定第17页
     ·丙酮酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶活性测定第17-18页
     ·pIFN-α抗病毒活性的测定第18页
     ·发酵液总蛋白的测定与目的蛋白分析第18-19页
     ·发酵二级状态参数计算方法第19-20页
第三章 结果与讨论第20-31页
   ·不同诱导策略对毕赤酵母发酵性能和酶活的影响第20-23页
     ·不同诱导条件下的发酵生产性能第20页
     ·不同诱导条件对甲醇代谢关键酶活性的影响第20-22页
     ·不同诱导条件对IDE 和α-KGDHC 活性的影响第22-23页
   ·甲醇/山梨醇共混流加诱导改变pIFN-α生产的代谢供能途径和发酵性能第23-28页
     ·毕赤酵母的代谢途径和碳/能量代谢参数和模型分析第23-26页
     ·不同诱导策略下中间代谢毒副产物甲醛等的胞内积累第26-27页
     ·不同诱导条件下的、有关碳和能量代谢的结论第27-28页
   ·不同山梨醇流加速率对pIFN-α发酵生产性能和代谢供能的影响第28-29页
   ·不同诱导策略下主供能途径的关键物质浓度检测第29-31页
主要结论与展望第31-34页
致谢第34-36页
参考文献第36-40页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第40页

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