摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 绪论 | 第8-14页 |
·研究背景 | 第8-10页 |
·代谢控制和分析方法 | 第8页 |
·巴斯德毕赤酵母表达系统 | 第8-10页 |
·研究意义和思路 | 第10-14页 |
·猪α干扰素应用前景 | 第10-11页 |
·研究内容和研究思路 | 第11-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-20页 |
·材料 | 第14-15页 |
·主要仪器和设备 | 第14页 |
·实验菌株 | 第14页 |
·毕赤酵母各级培养基 | 第14-15页 |
·培养方法 | 第15-16页 |
·发酵罐种子的摇瓶培养 | 第15页 |
·摇瓶培养探索最优山梨醇流加速率 | 第15页 |
·10L 发酵罐培养方法 | 第15-16页 |
·分析方法 | 第16-20页 |
·细胞浓度、甲醇浓度测定 | 第16页 |
·发酵液中山梨醇浓度和胞内物质含量测定 | 第16-17页 |
·醇氧化酶、甲醛脱氢酶和甲酸脱氢酶活性测定 | 第17页 |
·丙酮酸脱氢酶、异柠檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶活性测定 | 第17-18页 |
·pIFN-α抗病毒活性的测定 | 第18页 |
·发酵液总蛋白的测定与目的蛋白分析 | 第18-19页 |
·发酵二级状态参数计算方法 | 第19-20页 |
第三章 结果与讨论 | 第20-31页 |
·不同诱导策略对毕赤酵母发酵性能和酶活的影响 | 第20-23页 |
·不同诱导条件下的发酵生产性能 | 第20页 |
·不同诱导条件对甲醇代谢关键酶活性的影响 | 第20-22页 |
·不同诱导条件对IDE 和α-KGDHC 活性的影响 | 第22-23页 |
·甲醇/山梨醇共混流加诱导改变pIFN-α生产的代谢供能途径和发酵性能 | 第23-28页 |
·毕赤酵母的代谢途径和碳/能量代谢参数和模型分析 | 第23-26页 |
·不同诱导策略下中间代谢毒副产物甲醛等的胞内积累 | 第26-27页 |
·不同诱导条件下的、有关碳和能量代谢的结论 | 第27-28页 |
·不同山梨醇流加速率对pIFN-α发酵生产性能和代谢供能的影响 | 第28-29页 |
·不同诱导策略下主供能途径的关键物质浓度检测 | 第29-31页 |
主要结论与展望 | 第31-34页 |
致谢 | 第34-36页 |
参考文献 | 第36-40页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第40页 |