摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-30页 |
1 草坪草温度胁迫的生理生化适应性研究 | 第13-18页 |
·草坪草细胞膜体系与抗寒耐热性的关系 | 第13-14页 |
·温度胁迫下草坪草体内渗透调节物质的变化 | 第14-15页 |
·温度胁迫下草坪草膜脂过氧化和抗氧化酶活性的变化 | 第15-16页 |
·温度胁迫下草坪草叶片叶绿素和类胡萝卜素的变化 | 第16-17页 |
·温度胁迫下草坪草内源激素的变化 | 第17-18页 |
2 提高草坪草抗温度胁迫的措施研究 | 第18-20页 |
·草坪草抗寒锻炼 | 第18页 |
·生产管理措施 | 第18-19页 |
·合理施肥 | 第18-19页 |
·植物生长调节剂的使用 | 第19页 |
·覆盖与遮荫 | 第19页 |
·培育选用优良草坪草新品种 | 第19-20页 |
3 草坪草抗温度胁迫的分子机理研究 | 第20-21页 |
·对低温应答的分子机制 | 第20页 |
·对高温应答的分子机制 | 第20-21页 |
·抗热性基因的定位、分离克隆以及转基因研究 | 第20-21页 |
·热击蛋白及其编码基因方面的研究 | 第21页 |
4 植物抗逆性分子生物学研究的主要方法 | 第21-29页 |
·差异蛋白质组学简介 | 第21-27页 |
·差异蛋白质组学产生的背景 | 第21-22页 |
·差异蛋白质组学研究技术 | 第22-24页 |
·差异蛋白质组学在植物抗逆性研究中的应用 | 第24-27页 |
·基因差异表达研究方法 | 第27-29页 |
·mRNA差异显示PCR(mRNA differential display reverse transcription PCR) | 第27页 |
·cDNA代表性差异显示分析技术(cDNA representational difference analysis,cDNA-RDA) | 第27-28页 |
·cDNA-AFLP技术(cDNA-AFLP differential display) | 第28页 |
·抑制消减杂交技术(suppression subtractive hybridzation,SSH) | 第28-29页 |
5 本研究的总体思路、内容 | 第29-30页 |
·总体思路和意义 | 第29页 |
·研究内容 | 第29-30页 |
第二章 暖季型结缕草对温度胁迫响应的生理生态特性 | 第30-40页 |
1 材料和方法 | 第30-33页 |
·试验材料与处理 | 第30页 |
·测定项目与方法 | 第30-33页 |
·可溶性糖含量的测定 | 第30-31页 |
·可溶性蛋白质含量的测定 | 第31页 |
·脯氨酸含量测定 | 第31页 |
·叶绿素(chlorophyll)和类胡萝卜素(carotenoid)含量的测定 | 第31页 |
·细胞保护酶活性的测定 | 第31-32页 |
·植物内源激素含量测定 | 第32-33页 |
2 结果与分析 | 第33-38页 |
·温度胁迫下结缕草渗透调节物质含量的变化 | 第33-34页 |
·可溶性糖含量 | 第33页 |
·可溶性蛋白质含量 | 第33页 |
·脯氨酸含量 | 第33-34页 |
·温度胁迫对结缕草保护酶活性及MDA含量的影响 | 第34-35页 |
·温度胁迫对结缕草叶片叶绿素、类胡萝卜素含量的影响 | 第35-36页 |
·温度胁迫对两种结缕草叶片内源激素含量的影响 | 第36-38页 |
·温度胁迫下两种结缕草叶片内源激素含量的变化 | 第36-38页 |
·温度胁迫对两种结缕草叶片内源激素含量平衡的影响 | 第38页 |
3 小结 | 第38-40页 |
第三章 沟叶结缕草(Zoysiagrass matrella(L.)merr.)应答温度胁迫的差异蛋白质组学研究 | 第40-55页 |
1 材料与方法 | 第40-44页 |
·化学试剂及仪器 | 第40页 |
·化学试剂 | 第40页 |
·仪器 | 第40页 |
·材料与处理 | 第40-41页 |
·试验材料 | 第40-41页 |
·试验处理 | 第41页 |
·蛋白质提取 | 第41页 |
·双向电泳 | 第41-42页 |
·蛋白质样品的裂解及定量 | 第41-42页 |
·第一向—等电聚焦(IEF)电泳 | 第42页 |
·平衡 | 第42页 |
·第二向SDS-PAGE电泳 | 第42页 |
·染色 | 第42-43页 |
·胶的扫描和图像分析 | 第43页 |
·胶内酶解及肽段提取 | 第43页 |
·Q-TOFMS(电喷雾-四级-飞行时间质谱)分析 | 第43页 |
·数据库查询及蛋白质鉴定 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-53页 |
·沟叶结缕草温度胁迫下叶片蛋白质差异表达 | 第44-49页 |
·低温胁迫条件下沟叶结缕草蛋白质的双向电泳图谱分析 | 第45-47页 |
·高温胁迫条件下沟叶结缕草蛋白质的双向电泳图谱分析 | 第47-49页 |
·沟叶结缕草温度胁迫下叶片差异表达蛋白质的质谱分析与鉴定 | 第49-50页 |
·沟叶结缕草温度胁迫下差异表达的蛋白质的功能分类 | 第50-53页 |
3 小结 | 第53-55页 |
第四章 沟叶结缕草(Zoysiagrass matrella(L.)merr.)高温胁迫的基因表达分析 | 第55-79页 |
1 材料和方法 | 第55-70页 |
·试验材料与处理 | 第55页 |
·主要试剂及试剂盒 | 第55-56页 |
·主要仪器 | 第56页 |
·主要试剂溶液及配制方法 | 第56-58页 |
·实验方法 | 第58-70页 |
·总RNA提取 | 第58页 |
·痕量基因组DNA的DNaseI处理 | 第58-59页 |
·抑制差减文库构建 | 第59-70页 |
·统计方法 | 第70页 |
2 结果与分析 | 第70-78页 |
·RNA的含量和质量 | 第70-71页 |
·双链cDNA的合成 | 第71页 |
·双链cDNA的Rsa Ⅰ酶切分析 | 第71页 |
·接头连接效率检测 | 第71-72页 |
·消减产物二次PCR的结果 | 第72页 |
·抑制消减cDNA文库的构建 | 第72-73页 |
·插入片段的检测 | 第73页 |
·差异表达基因的进一步筛选 | 第73-74页 |
·部分差异基因的测序与序列分析 | 第74-78页 |
·信号转导相关基因 | 第75页 |
·代谢反应相关基因 | 第75-76页 |
·基因表达转录调节和蛋白质合成相关基因 | 第76-77页 |
·抗逆蛋白相关基因 | 第77-78页 |
3 小结 | 第78-79页 |
第五章 讨论与展望 | 第79-94页 |
1 结论与讨论 | 第79-89页 |
·温度胁迫下结缕草生理生化适应机制 | 第79-81页 |
·温度胁迫对结缕草渗透调节的影响 | 第79页 |
·温度胁迫对结缕草保护酶系统的影响 | 第79-80页 |
·温度胁迫与结缕草膜系统损伤的关系 | 第80页 |
·温度胁迫对结缕草光合色素的影响 | 第80页 |
·温度胁迫与结缕草内源激素的关系 | 第80-81页 |
·沟叶结缕草应答温度胁迫的差异蛋白质组学分析 | 第81-87页 |
·应答温度胁迫的信号转导 | 第81-82页 |
·温度胁迫下的代谢响应 | 第82-84页 |
·防卫相关蛋白对温度胁迫的响应 | 第84-86页 |
·蛋白质合成与降解相关蛋白对温度胁迫的响应 | 第86-87页 |
·细胞转运及胚胎发育相关蛋白对温度胁迫的响应 | 第87页 |
·沟叶结缕草高温胁迫的基因差异表达及其作用机制 | 第87-89页 |
2 总结与展望 | 第89-94页 |
参考文献 | 第94-103页 |
致谢 | 第103页 |