| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-24页 |
| ·生物膜的结构 | 第10-11页 |
| ·生物膜的形成对微生物的作用 | 第11-13页 |
| ·保护内部菌体抵抗不良外界环境 | 第11-12页 |
| ·获取营养物质并协同进行代谢 | 第12页 |
| ·获取新遗传物质 | 第12-13页 |
| ·生物膜的形成过程及其调节 | 第13-16页 |
| ·生物膜的形成过程 | 第13-14页 |
| ·生物膜形成的影响因素 | 第14页 |
| ·生物膜形成过程中基因差异表达 | 第14-15页 |
| ·密度感应系统(Quorum sensing) | 第15-16页 |
| ·生物膜研究的应用前景 | 第16-18页 |
| ·生物膜与抗药性 | 第16-17页 |
| ·生物膜在污染物降解中的应用 | 第17-18页 |
| ·谷氨酰胺合成酶 | 第18-23页 |
| ·谷氨酰胺的生物合成 | 第18-20页 |
| ·谷氨酰胺合成酶的性质、作用 | 第20页 |
| ·谷氨酰胺合成酶的分类 | 第20-21页 |
| ·谷氨酰胺合成酶的调控 | 第21-22页 |
| ·谷氨酰胺合成酶的酶活测定方法 | 第22-23页 |
| ·本课题立题依据及主要内容 | 第23-24页 |
| 第二章 Pseudomonas putida与Escherichia coli生物膜的形成 | 第24-31页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·菌株 | 第24页 |
| ·培养基与试剂 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-27页 |
| ·菌株活化 | 第26页 |
| ·恒流器培养P.putida形成生物膜 | 第26-27页 |
| ·P.putida生物膜形态观察 | 第27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-29页 |
| ·P.putida生物膜的形成过程 | 第27-29页 |
| ·E.coli生物膜的形成过程 | 第29页 |
| ·本章小结 | 第29-31页 |
| 第三章 E.coli中谷氨酰胺合成酶基因的过量表达及其对生物膜形成的影响 | 第31-47页 |
| ·实验材料 | 第34-36页 |
| ·菌株质粒及遗传特性 | 第34页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第34-36页 |
| ·实验方法 | 第36-41页 |
| ·CTAB法提取E.coli基因组DNA | 第36页 |
| ·PCR扩增E.coli谷氨酰胺合成酶基因 | 第36-38页 |
| ·载体pBC KS-glnhb的构建 | 第38页 |
| ·载体pBC KS-glnhb的转化及重组子的验证 | 第38-39页 |
| ·载体pBC KS-glnhb在E.coli DH5α中的表达 | 第39-41页 |
| ·E.coli-pBC KS-glnhb生物膜形成过程观察 | 第41页 |
| ·结果与讨论 | 第41-46页 |
| ·谷氨酰胺合成酶基因的PCR扩增及载体pBC KS-glnhb的构建 | 第41-42页 |
| ·载体pBC KS-glnhb转化E.coli DH5α | 第42-43页 |
| ·载体pBC KS-glnhb在E.coli DH5α中的表达 | 第43-44页 |
| ·E.coli-pBC KS-glnhb生物膜形成状况 | 第44-46页 |
| ·本章小结 | 第46-47页 |
| 第四章 E.coli中谷氨酰胺合成酶基因反义载体的构建 | 第47-53页 |
| ·实验材料 | 第49-50页 |
| ·菌株质粒及遗传特性 | 第49页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-51页 |
| ·PCR扩增E.coli谷氨酰胺合成酶基因 | 第50页 |
| ·载体pBC KS-glnbh的构建 | 第50-51页 |
| ·载体pBC KS-glnbh的转化及重组子的验证 | 第51页 |
| ·结果与讨论 | 第51-52页 |
| ·谷氨酰胺合成酶基因的PCR扩增(gln-bh)及载体pBC KS-glnbh的构建 | 第51页 |
| ·载体pBC KS-glnbh转化E.coli DH5α | 第51-52页 |
| ·本章小结 | 第52-53页 |
| 第五章 P.putida中谷氨酰胺合成酶表达载体、反义核酸载体和基因敲除所用同源片段的构建 | 第53-68页 |
| ·实验材料 | 第57页 |
| ·菌株质粒及遗传特性 | 第57页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第57页 |
| ·实验方法 | 第57-62页 |
| ·P.putida基因组DNA的提取及谷氨酰胺合成酶基因的PCR扩增 | 第57-58页 |
| ·载体pBC KS-gsxb和pBC KS-gsex的构建及转化 | 第58页 |
| ·融合PCR构建同源片段gskF | 第58-62页 |
| ·结果与讨论 | 第62-67页 |
| ·谷氨酰胺合成酶基因的PCR扩增 | 第62页 |
| ·载体pBC KS-gsxb和pBC KS-gsex的构建及转化 | 第62-66页 |
| ·融合PCR构建gln gene同源片段gskF | 第66页 |
| ·融合PCR的引物及反应设计 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-78页 |
