| 摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-16页 |
| ·转录因子GATA2 | 第9-12页 |
| ·GATA2 在造血过程中的作用 | 第10-11页 |
| ·GATA2 相互作用蛋白质研究 | 第11-12页 |
| ·TGFβ信号通路及Smads 家族蛋白 | 第12-14页 |
| ·TGFβ,Smad4 与造血调控的关系 | 第14页 |
| ·GATA2 与TGFβ信号通路存在密切关联 | 第14-16页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第16-27页 |
| ·仪器设备,细胞系,菌株及试剂的配制 | 第16-17页 |
| ·仪器设备 | 第16页 |
| ·细胞株 | 第16-17页 |
| ·菌株、载体 | 第17页 |
| ·质粒 | 第17页 |
| ·酶、抗体及其他试剂 | 第17页 |
| ·试剂的配制 | 第17-19页 |
| ·细菌培养溶液 | 第17-18页 |
| ·细胞培养溶液 | 第18页 |
| ·Western-Blot 相关溶液 | 第18-19页 |
| ·细胞裂解相关溶液 | 第19页 |
| ·实验方法 | 第19-27页 |
| ·重组质粒载体的构建 | 第19-22页 |
| ·质粒DNA 的小量提取 | 第22页 |
| ·真核细胞转染 | 第22页 |
| ·Western Blot | 第22-23页 |
| ·共定位实验 | 第23页 |
| ·免疫共沉淀 | 第23-24页 |
| ·GST-Pull Down | 第24页 |
| ·双荧光素酶报告基因检测 | 第24-25页 |
| ·凝胶迁移实验 | 第25-26页 |
| ·细胞总RNA 的提取 | 第26页 |
| ·反转录PCR | 第26-27页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第27-50页 |
| ·GATA2 真核表达载体的构建 | 第27-31页 |
| ·GATA2 CDS 序列的扩增 | 第27-28页 |
| ·GATA2 真核表达载体的构建 | 第28-31页 |
| ·GATA2 与Smad4 相互作用的验证 | 第31-34页 |
| ·免疫共沉淀 | 第31-32页 |
| ·GST-pull down | 第32-34页 |
| ·GATA2 与Smad4 在核内共定位 | 第34-35页 |
| ·GATA2 对Smad4 转录因子活性的影响 | 第35-38页 |
| ·GATA2 对TGFβ1 诱导下的Smad4 的转录因子活性的影响 | 第38-40页 |
| ·GATA2 对TGFβ信号通路下游靶基因PAI-1 启动子活性的影响 | 第40-41页 |
| ·GATA2 影响Smad4 的转录因子活性的结构域 | 第41-45页 |
| ·GATA2 截短体的真核表达载体构建及其表达 | 第41-44页 |
| ·GATA2 截短体片段对Smad4 的转录因子活性的影响 | 第44-45页 |
| ·GATA2 抑制Smad4 转录活性的机制 | 第45-49页 |
| ·GATA2 对Smad4 与DNA 结合活性影响 | 第45页 |
| ·转录辅助抑制因子的作用 | 第45-49页 |
| ·小结 | 第49-50页 |
| 第四章 结论与展望 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 致谢 | 第56页 |