| 中文摘要 | 第1-4页 |
| ABSTRACT | 第4-7页 |
| 前言 | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-25页 |
| ·基因打靶研究现状 | 第8-9页 |
| ·基因打靶的基本原理及分子机制 | 第9-11页 |
| ·Holliday 模型 | 第9-10页 |
| ·Meselson-Radding 模型 | 第10页 |
| ·双链断裂修复模型（DSBR） | 第10-11页 |
| ·基因打靶策略 | 第11-17页 |
| ·利用置换型载体的完全基因敲除 | 第13-15页 |
| ·利用插入型载体的完全基因敲除 | 第15-17页 |
| ·基因打靶的影响因素 | 第17-18页 |
| ·基于Cre-LoxP 重组酶系统的条件基因打靶 | 第18-21页 |
| ·Cre-LoxP 重组酶系统实现基因重组的原理 | 第18-20页 |
| ·条件基因打靶 | 第20-21页 |
| ·基因打靶的应用前景 | 第21-23页 |
| ·基因打靶应用于基因功能研究 | 第21-22页 |
| ·基因打靶应用于研究疾病的动物模型 | 第22-23页 |
| ·基因打靶应用于改良动物品系和研制生物反应器 | 第23页 |
| ·本课题研究思路 | 第23-25页 |
| 第二章 实验材料和方法 | 第25-36页 |
| ·实验材料 | 第25-30页 |
| ·菌株与质粒 | 第25页 |
| ·主要实验仪器 | 第25-26页 |
| ·药品 | 第26-27页 |
| ·试剂 | 第27-29页 |
| ·培养基 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-36页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的质粒转化 | 第30-31页 |
| ·质粒的提取 | 第31页 |
| ·酵母染色体的快速分离 | 第31-32页 |
| ·酵母细胞的转化 | 第32页 |
| ·PCR 扩增 | 第32-33页 |
| ·DNA 的限制酶消化 | 第33-34页 |
| ·凝胶电泳法检测DNA | 第34页 |
| ·DNA 样品的回收纯化 | 第34页 |
| ·DNA 连接反应 | 第34-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-52页 |
| ·质粒pUC18-INT4 的构建 | 第36-45页 |
| ·将hom1 片断克隆在T 载体上构建质粒T-hom1 | 第36-41页 |
| ·将hom2 片断克隆在T 载体上构建质粒T-hom2 | 第41-42页 |
| ·将 hom1 片断克隆在 pUC18-RYUR 载体上构建质粒 pUC18-hom1 | 第42-44页 |
| ·将 hom2 片断克隆在 pUC18-hom1 载体上构建质粒 pUC18-INT4 | 第44-45页 |
| ·质粒pUC18-INT4-A 的构建 | 第45-48页 |
| ·将ADH1 克隆在T 载体上构建T-ADH1 | 第45-46页 |
| ·将 ADH1 克隆在 pUC18-INT4 载体上构建 pUC18-INT4-A 质粒分子 | 第46-48页 |
| ·pUC18-INT4 质粒转化酵母细胞 | 第48-50页 |
| ·pUC18-INT4-A 质粒转化酵母细胞 | 第50-52页 |
| 第四章 结论与展望 | 第52-53页 |
| ·结论 | 第52页 |
| ·展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
