| 中文摘要 | 第1-5页 |
| 英文摘要 | 第5-12页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 1 绪论 | 第13-47页 |
| ·土壤盐渍化 | 第13-14页 |
| ·土壤盐渍化对植物的影响 | 第14-17页 |
| ·不同植物的耐盐差异性 | 第14-16页 |
| ·盐胁迫对植物影响 | 第16-17页 |
| ·植物耐盐机理 | 第17-28页 |
| ·植物耐盐机理分类 | 第17-19页 |
| ·植物的渗透压耐受机理 | 第19-23页 |
| ·植物的排Na~+作用 | 第23-25页 |
| ·组织的Na~+耐受性 | 第25-28页 |
| ·植物在盐胁迫下的细胞信号传导 | 第28-40页 |
| ·细胞信号的输入和输出 | 第28-29页 |
| ·调节离子稳态和耐盐性的SOS 路径 | 第29-32页 |
| ·渗透胁迫下的蛋白质磷酸化信号传导路径 | 第32-33页 |
| ·渗透胁迫下的磷脂信号传导 | 第33-36页 |
| ·ABA 与渗透逆境信号传递 | 第36-40页 |
| ·果糖二磷酸醛缩酶与植物耐盐作用 | 第40页 |
| ·PB1 结构域与细胞信号传导 | 第40-43页 |
| ·PB1 结构域与p62/aPKC 信号传导平台 | 第42页 |
| ·PB1 结构域与Par/aPKC 信号平台 | 第42-43页 |
| ·PB1 结构域与MEKK2 和MEKK3 激酶信号传导 | 第43页 |
| ·苜蓿耐盐性研究进展 | 第43-44页 |
| ·紫花苜蓿耐盐品种的筛选 | 第43-44页 |
| ·紫花苜蓿中部分盐胁迫相关基因的克隆分析 | 第44页 |
| ·本研究的目的、内容及意义 | 第44-47页 |
| 2 紫花苜蓿盐诱导基因 MsPBL 的分离克隆 | 第47-65页 |
| ·引言 | 第47页 |
| ·材料 | 第47-48页 |
| ·方法、原理 | 第48-54页 |
| ·紫花苜蓿总 RNA 提取 | 第48-49页 |
| ·RACE 引物 | 第49页 |
| ·5′RACE 原理 | 第49-50页 |
| ·3′RACE 原理 | 第50-51页 |
| ·引物的设计与合成 | 第51-52页 |
| ·SMART RACE cDNA 合成 | 第52页 |
| ·3′RACE 和5′RACE PCR 反应 | 第52-53页 |
| ·PCR 产物的切胶回收 | 第53页 |
| ·PCR 产物连接T 载体及转化DH5α | 第53-54页 |
| ·单克隆挑取、培养及 PCR 检测 | 第54页 |
| ·序列分析 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-62页 |
| ·紫花苜蓿总 RNA 提取 | 第54-55页 |
| ·目的基因3′端序列的克隆 | 第55-56页 |
| ·目的基因5′端序列的克隆 | 第56-57页 |
| ·目的基因的 c DNA 全序列的获得及序列分析 | 第57-58页 |
| ·目的基因编码蛋白序列分析 | 第58-61页 |
| ·氨基酸统计分析 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 3 紫花苜蓿 MsPBL 基因的亚细胞定位 | 第65-71页 |
| ·材料 | 第65-66页 |
| ·大肠杆菌菌株 | 第65页 |
| ·工具酶和主要试剂 | 第65页 |
| ·引物设计 | 第65页 |
| ·构建重组质粒MsPBL-GFP | 第65页 |
| ·基因枪金粉制备 | 第65-66页 |
| ·基因枪子弹制备 | 第66页 |
| ·重组质粒pA7-GFP-PBL 转化洋葱及检测 | 第66页 |
| ·结果 | 第66-69页 |
| ·MsPBL 基因亚细胞定位瞬时表达载体构建及鉴定 | 第66-67页 |
| ·MsPBL 基因在洋葱表皮细胞的亚细胞定位 | 第67-69页 |
| ·讨论 | 第69页 |
| ·结论 | 第69-71页 |
| 4 紫花苜蓿 MsPBL 基因的表达分析 | 第71-77页 |
| ·材料 | 第71页 |
| ·方法 | 第71-72页 |
| ·引物设计 | 第71页 |
| ·样品处理 | 第71页 |
| ·实时定量PCR 检测MsPBL 基因的表达变化 | 第71-72页 |
| ·结果及分析 | 第72-74页 |
| ·讨论 | 第74-75页 |
| ·小结 | 第75-77页 |
| 5 紫花苜蓿 MsPBL 基因的转录起始位点上游序列的克隆分析 | 第77-85页 |
| ·材料 | 第77页 |
| ·原理和方法 | 第77-80页 |
| ·试剂、引物 | 第77页 |
| ·原理 | 第77-79页 |
| ·基因组DNA 提取方法 | 第79页 |
| ·TAIL-PCR 扩增MsPBL 基因上游序列 | 第79-80页 |
| ·结果 | 第80-83页 |
| ·讨论 | 第83页 |
| ·小结 | 第83-85页 |
| 6 紫花苜蓿 MsPBL 基因超标达和干扰载体构建以及对烟草和苜蓿的转化研究 | 第85-101页 |
| ·材料 | 第85-87页 |
| ·植物材料和菌株 | 第85页 |
| ·载体和内切酶 | 第85页 |
| ·培养基 | 第85-87页 |
| ·方法 | 第87-91页 |
| ·引物设计 | 第87页 |
| ·超表达载体的构建 | 第87-88页 |
| ·干扰载体的构建 | 第88页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第88-89页 |
| ·农杆菌介导的烟草的转化 | 第89页 |
| ·农杆菌介导的对紫花苜蓿的转化 | 第89-90页 |
| ·转基因植株的检测 | 第90-91页 |
| ·结果 | 第91-99页 |
| ·超表达和干扰载体的构建 | 第91-92页 |
| ·重组载体的鉴定 | 第92-94页 |
| ·转基因植株的获得 | 第94-96页 |
| ·转基因烟草植株的鉴定 | 第96-99页 |
| ·讨论 | 第99页 |
| ·小结 | 第99-101页 |
| 7 紫花苜蓿果糖二磷酸醛缩酶基因的克隆及分析 | 第101-109页 |
| ·材料 | 第101页 |
| ·方法 | 第101页 |
| ·总RNA 提取及反转录 | 第101页 |
| ·使用RACE 法克隆目的基因的3’和5’端序列 | 第101页 |
| ·RACE 引物序列 | 第101页 |
| ·目的基因序列的生物信息学分析 | 第101页 |
| ·半定量RT-PCR 分析 | 第101页 |
| ·结果分析 | 第101-107页 |
| ·目的基因全长序列的获得 | 第101-104页 |
| ·MsALD 基因编码蛋白的理化性质和系统进化分析 | 第104-106页 |
| ·盐胁迫下MsALD 基因的半定量RT-PCR 分析 | 第106-107页 |
| ·讨论 | 第107-108页 |
| ·小结 | 第108-109页 |
| 8 结论与展望 | 第109-111页 |
| ·结论 | 第109页 |
| ·创新点 | 第109-110页 |
| ·后续研究工作展望 | 第110-111页 |
| 致谢 | 第111-113页 |
| 参考文献 | 第113-133页 |
| 附录 | 第133页 |
