| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-8页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 1 绪论 | 第9-17页 |
| ·柑橘果皮褐变研究进展 | 第9-11页 |
| ·钙调蛋白概述 | 第11-14页 |
| ·钙调蛋白家族的简介 | 第11页 |
| ·钙调蛋白的结构特点及生理功能 | 第11-13页 |
| ·钙调蛋白的靶蛋白简介 | 第13-14页 |
| ·研究目的和意义 | 第14-15页 |
| ·研究内容和技术路线 | 第15-17页 |
| ·研究内容 | 第15页 |
| ·技术路线 | 第15-17页 |
| 2 脐橙 CsCAB 基因的克隆和表达模式分析 | 第17-28页 |
| ·材料与仪器 | 第17-18页 |
| ·植物材料 | 第17页 |
| ·主要试剂及溶液配制 | 第17页 |
| ·引物 | 第17-18页 |
| ·主要仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-23页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第18-19页 |
| ·脐橙各组织总RNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·DNase I 的处理RNA 及反转录 | 第20-21页 |
| ·目的基因的PCR 扩增 | 第21页 |
| ·目的DNA 片段的回收并纯化 | 第21-22页 |
| ·连接、转化、测序 | 第22页 |
| ·生物信息学分析 | 第22页 |
| ·半定量RT-PCR 分析目的基因时空差异表达模式 | 第22页 |
| ·目的基因及其下游靶基因在损伤胁迫条件下的表达模式分析 | 第22-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-28页 |
| ·柑橘CsCAB 基因的RT-PCR 扩增 | 第23页 |
| ·生物信息学分析结果 | 第23-26页 |
| ·CsCAB 信号肽分析 | 第26页 |
| ·CsCAB 基因在褐变发生进程及不同组织中的表达模式 | 第26-27页 |
| ·CsCAB 基因及其下游靶基因ATPase 和GDP 在损伤条件下的表达模式. | 第27-28页 |
| 3 CsCAB 基因表达载体的构建及转化烟草的研究 | 第28-40页 |
| ·材料与仪器 | 第28-29页 |
| ·植物材料、菌株和质粒 | 第28页 |
| ·主要试剂及溶剂配置 | 第28-29页 |
| ·引物 | 第29页 |
| ·主要仪器 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-35页 |
| ·质粒DNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·CsCAB 基因植物表达载体的构建 | 第30-31页 |
| ·转化农杆菌 | 第31-32页 |
| ·侵染烟草准备工作 | 第32-33页 |
| ·转基因烟草的培养 | 第33页 |
| ·转基因烟草的检测 | 第33-35页 |
| ·转基因烟草中目的基因表达分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-40页 |
| ·目标基因的克隆（见2.3.1） | 第35页 |
| ·中间表达载体pDH-CsCAB 的鉴定 | 第35-36页 |
| ·表达载体的pCAMBIA1301-CsCAB 的鉴定 | 第36页 |
| ·根癌农杆菌的转化及鉴定 | 第36-37页 |
| ·叶盘法转化烟草 | 第37页 |
| ·转基因植株的PCR 鉴定 | 第37-38页 |
| ·GUS 染色检测 | 第38-39页 |
| ·RT-PCR 半定量检测 | 第39-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| ·CsCAB 基因表达载体的构建策略 | 第40页 |
| ·CsCAB 与柑橘果皮褐变的关系 | 第40-42页 |
| 5 结论与展望 | 第42-44页 |
| ·结论 | 第42页 |
| ·后续工作展望 | 第42-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 附录 | 第49页 |
