摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 引言 | 第9-16页 |
1.1 研究意义 | 第9页 |
1.2 研究现状 | 第9-14页 |
1.2.1 细丝蛋白(filamins) | 第9-10页 |
1.2.2 FLNA生物功能 | 第10-11页 |
1.2.3 GATA家族 | 第11页 |
1.2.4 GATA4 与发育和疾病发生 | 第11-13页 |
1.2.5 GATA4与癌症 | 第13页 |
1.2.6 RNA聚合酶Ⅲ基因转录与癌症 | 第13-14页 |
1.3 本课题产生的依据和研究目标 | 第14-16页 |
第2章 实验材料与方法 | 第16-31页 |
2.1 主要材料和仪器 | 第16-21页 |
2.1.1 实验所需的细胞和质粒 | 第16页 |
2.1.2 实验耗材 | 第16页 |
2.1.3 实验试剂 | 第16-18页 |
2.1.4 实验仪器 | 第18-19页 |
2.1.5 相关试剂溶液的配制 | 第19-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-30页 |
2.2.1 基因克隆 | 第21-26页 |
2.2.2 细胞培养、细胞瞬时转染及稳定表达细胞系的建立 | 第26-28页 |
2.2.3 实时荧光定量PCR(RT-qPCR) | 第28-29页 |
2.2.4 Western Blot | 第29-30页 |
2.2.5 荧光素酶测定 | 第30页 |
2.3 实验数据处理 | 第30-31页 |
第3章 实验结果 | 第31-45页 |
3.1 FLNA敲低后增强GATA4 的表达 | 第31-33页 |
3.2 GATA4 shRNA 瞬时表达降低部分 Pol Ⅰ 和 Pol Ⅲ基因转录 | 第33-35页 |
3.3 GATA4 shRNA稳定细胞系的建立 | 第35-37页 |
3.4 GATA4 shRNA稳定表达降低部分Pol Ⅰ和 Pol Ⅲ转录产物的表达 | 第37-38页 |
3.5 GATA4 shRNA稳定表达抑制细胞增殖 | 第38-40页 |
3.6 GATA4 敲低减少RRN3和UBF1 的表达 | 第40-41页 |
3.7 GATA4 敲低减少BRF1和TFIIIC2 的表达 | 第41-42页 |
3.8 BRF1和TFⅢC2 启动子活性检测 | 第42-43页 |
3.9 SP1 敲低影响GATA4 表达、GATA4 影响SP1 表达 | 第43-45页 |
第4章 结论与展望 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第55-56页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第56页 |