| 摘要 | 第12-13页 |
| Abstract | 第13页 |
| 第一章 前言 | 第14-35页 |
| 1.1 李斯特菌(listeria) | 第14-19页 |
| 1.1.1 listeria概述 | 第14页 |
| 1.1.2 listeria表型特征 | 第14-15页 |
| 1.1.3 listeria基因型特征 | 第15页 |
| 1.1.4 listeria毒力因子 | 第15-19页 |
| 1.1.4.1 环境耐受性相关毒力因子 | 第18页 |
| 1.1.4.2 黏附侵袭性相关毒力因子 | 第18页 |
| 1.1.4.3 细胞内感染性相关毒力因子 | 第18-19页 |
| 1.1.4.4 其他毒力因子 | 第19页 |
| 1.2 单核细胞增多性李斯特菌(L.monocytogenes) | 第19-29页 |
| 1.2.1 L.monocytogenes危害 | 第19-20页 |
| 1.2.2 L.monocytogenes感染后的固有免疫 | 第20-26页 |
| 1.2.2.1 IFN-γ和TNF | 第21页 |
| 1.2.2.2 Ⅰ型干扰素 | 第21-22页 |
| 1.2.2.3 ROS | 第22-23页 |
| 1.2.2.4 中性粒细胞 | 第23页 |
| 1.2.2.5 巨噬细胞 | 第23-24页 |
| 1.2.2.6 树突状细胞 | 第24页 |
| 1.2.2.7 Toll样受体 | 第24页 |
| 1.2.2.8 MyD88 | 第24-25页 |
| 1.2.2.9 IRAKM | 第25页 |
| 1.2.2.10 RIP2 | 第25页 |
| 1.2.2.11 NF-κB | 第25-26页 |
| 1.2.2.12 T细胞和T细胞凋亡 | 第26页 |
| 1.2.3 获得性免疫 | 第26-29页 |
| 1.2.3.1 CD8~+T细胞 | 第26-28页 |
| 1.2.3.2 CD4~+T细胞 | 第28-29页 |
| 1.3 类固醇受体辅激活子3 | 第29-33页 |
| 1.3.1 SRC-3的蛋白结构和分子功能 | 第29-30页 |
| 1.3.2 SRC-3表达与蛋白后修饰 | 第30-31页 |
| 1.3.3 SRC-3在癌症发生过程中的作用(图7) | 第31-33页 |
| 1.3.3.1 SRC-3与细胞周期 | 第31页 |
| 1.3.3.2 SRC-3与细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 1.3.3.3 SRC-3与细胞侵袭和转移 | 第32-33页 |
| 1.3.3.4 SRC-3在免疫中的作用 | 第33页 |
| 1.4 立题背景 | 第33-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-56页 |
| 2.1 实验材料 | 第35-38页 |
| 2.1.1 小鼠 | 第35页 |
| 2.1.2 菌株 | 第35页 |
| 2.1.3 细胞 | 第35页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第35-37页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第37-38页 |
| 2.2 实验方法 | 第38-56页 |
| 2.2.1 DNA相关实验方法 | 第38-43页 |
| 2.2.1.1 DH5α大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第38-39页 |
| 2.2.1.2 质粒的小量提取(碱裂解法) | 第39页 |
| 2.2.1.3 质粒的中量提取 | 第39-40页 |
| 2.2.1.4 荧光素酶报告质粒的构建 | 第40-42页 |
| 2.2.1.5 点突变 | 第42-43页 |
| 2.2.2 RNA相关实验及方法 | 第43-45页 |
| 2.2.2.1 总RNA提取 | 第43-44页 |
| 2.2.2.2 逆转录合成cDNA | 第44页 |
| 2.2.2.3 实时荧光定量PCR(Real-time PCR) | 第44-45页 |
| 2.2.3 蛋白质相关实验及方法 | 第45-46页 |
| 2.2.3.1 蛋白质样品制备 | 第45页 |
| 2.2.3.2 蛋白质浓度测定(BCA法) | 第45-46页 |
| 2.2.3.3 蛋白电泳和Western Blot | 第46页 |
| 2.2.4 细胞相关实验及方法 | 第46-50页 |
| 2.2.4.1 细胞培养 | 第46-47页 |
| 2.2.4.2 细胞瞬时转染(Fugene6转染) | 第47-48页 |
| 2.2.4.3 稳定细胞系的建立 | 第48页 |
| 2.2.4.4 细胞荧光素酶活性检测 | 第48-49页 |
| 2.2.4.5 骨髓细胞分离及原代骨髓衍生细胞的刺激分化 | 第49页 |
| 2.2.4.6 流式分析骨髓衍生巨噬细胞分化率 | 第49页 |
| 2.2.4.7 流式分析细胞活性氧的产生 | 第49页 |
| 2.2.4.8 化学发光法检测细胞活性氧的产生 | 第49-50页 |
| 2.2.5 小鼠相关实验及方法 | 第50-52页 |
| 2.2.5.1 SRC-3基因敲除小鼠的鉴定 | 第50-51页 |
| 2.2.5.2 L.monocytogenes感染小鼠实验 | 第51-52页 |
| 2.2.6 切片相关实验及方法 | 第52-53页 |
| 2.2.6.1 石蜡切片 | 第52页 |
| 2.2.6.2 H.E.染色 | 第52-53页 |
| 2.2.7. ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6和IFN-β等细胞因子 | 第53-54页 |
| 2.2.8. TUNEL | 第54-56页 |
| 第三章 结果与分析 | 第56-73页 |
| 3.1 SRC-3~(-/-)小鼠表现出对L.monocytogenes敏感性减弱 | 第56页 |
| 3.2 SRC-3~(-/-)小鼠表现出对L.monocytogenes更强的清除能力 | 第56-57页 |
| 3.3 SRC-3~(-/-)小鼠表现出对L.monocytogenes体重变化减轻 | 第57-58页 |
| 3.4 L.monocytogenes感染后SRC-3~(-/-)小鼠表现出更轻的组织学损伤 | 第58-60页 |
| 3.5 L.monocytogenes感染后SRC-3~(-/-)小鼠表达更少的NRROS | 第60-61页 |
| 3.6 SRC-3~(-/-)BMDM对L.monocytogenes的清除能力加强 | 第61页 |
| 3.7 L.monocytogenes感染后SRC-3~(-/-)BMDM表达更少的NRROS | 第61-62页 |
| 3.8 L.monocytogenes感染后SRC-3~(-/-)BMDM产生更多的ROS | 第62-64页 |
| 3.9 在RAW264.7中SRC-3可调控NRROS的转录 | 第64-65页 |
| 3.10 SRC-3~(-/-)小鼠中IFN-β和凋亡相关基因表达减少 | 第65-66页 |
| 3.11 感染L.monocytogenes后SRC-3~(-/-)小鼠脾脏中细胞凋亡减少 | 第66-67页 |
| 3.12 感染L.monocytogenes后SRC-3~(-/-)小鼠脾脏中CD4~+和CD8~+T细胞相对较高 | 第67-69页 |
| 3.13 L.monocytogenes感染后SRC-3~(-/-)小鼠表现出更轻的炎症反应 | 第69-70页 |
| 3.14 SRC-3~(-/-)小鼠ISR通路相关基因表达量减少 | 第70-71页 |
| 3.15 在RAW264.7中SRC-3通过与IFN-β启动子上IRF-3刺激结合元件结合而促进其转录 | 第71-73页 |
| 第四章 讨论 | 第73-76页 |
| 参考文献 | 第76-86页 |
| 缩略语及英文全称 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
