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Trihelix转录因子SlPTL调控番茄生长发育和非生物胁迫的功能鉴定

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-7页
缩略词表第11-13页
1 绪论第13-23页
    1.1 植物转录因子的研究进展第13-16页
        1.1.1 植物转录因子与形态建成和生长发育第13-14页
        1.1.2 植物转录因子与非生物胁迫应答第14-16页
    1.2 Trihelix转录因子的研究进展第16-20页
        1.2.1 Trihelix转录因子的发现第16-17页
        1.2.2 Trihelix转录因子的结构及分类第17页
        1.2.3 Trihelix转录因子的功能第17-20页
        1.2.4 番茄Trihelix转录因子的研究现状第20页
    1.3 课题的提出及研究意义第20-21页
    1.4 课题的研究内容、技术路线及创新点第21-23页
        1.4.1 研究内容第21-22页
        1.4.2 技术路线第22页
        1.4.3 创新点第22-23页
2 SlPTL基因生物信息学分析第23-25页
    2.1 分析方法第23页
    2.2 结果与分析第23-25页
        2.2.1 SlPTL的进化树分析第23-24页
        2.2.2 SlPTL蛋白序列的分析第24-25页
3 SlPTL基因的表达模式分析第25-33页
    3.1 材料与试剂第25页
        3.1.1 植物材料第25页
        3.1.2 试剂第25页
    3.2 实验方法第25-29页
        3.2.1 番茄总RNA的提取第25-26页
        3.2.2 cDNA的合成第26页
        3.2.3 SlPTL基因的组织表达模式分析第26-27页
        3.2.4 非生物胁迫处理野生型番茄方法第27页
        3.2.5 外源激素处理野生型番茄方法第27-28页
        3.2.6 实时荧光定量PCR检测基因表达水平第28-29页
    3.3 结果与分析第29-33页
        3.3.1 RNA的提取第29-30页
        3.3.2 SlPTL基因在野生型番茄中的表达模式第30-31页
        3.3.3 SlPTL基因对非生物胁迫处理的响应第31页
        3.3.4 SlPTL基因对激素处理的响应第31-33页
4 SlPTL转基因植株的获得第33-49页
    4.1 材料、试剂、设备第33-36页
        4.1.1 材料第33页
        4.1.2 试剂第33-35页
        4.1.3 主要仪器设备第35-36页
    4.2 实验方法第36-43页
        4.2.1 番茄基因组DNA的提取第36页
        4.2.2 SlPTL基因沉默片段的克隆第36-39页
        4.2.3 SlPTL基因RNAi沉默载体的构建第39-41页
        4.2.4 农杆菌LBA4404介导的番茄遗传转化以及阳性株系的筛选第41-43页
        4.2.5 实验所用的引物第43页
    4.3 结果与分析第43-49页
        4.3.1 SlPTL基因RNAi沉默载体的构建第43-47页
        4.3.2 SlPTL转基因番茄苗系的培育与鉴定第47-49页
5 SlPTL沉默株系表型观察及功能鉴定第49-63页
    5.1 材料、试剂、设备第49页
    5.2 实验方法第49-51页
        5.2.1 SlPTL在转基因番茄株系中的表达分析第49页
        5.2.2 番茄植株形态参数的测定第49页
        5.2.3 茎的组织切片分析第49页
        5.2.4 GA3处理实验第49-50页
        5.2.5 SlPTL在野生型番茄开花期的表达模式分析第50页
        5.2.6 花粉萌发率的检测第50页
        5.2.7 种子数目的统计第50页
        5.2.8 实验所用的引物第50-51页
    5.3 结果与分析第51-63页
        5.3.1 SlPTL转基因番茄株系的基因表达分析第51-52页
        5.3.2 沉默SlPTL改变番茄植株的形态第52-56页
        5.3.3 外源GA3敏感性实验以及植株生长状况第56-57页
        5.3.4 沉默SlPTL改变了赤霉素合成、代谢和信号转导相关基因的转录水平第57-58页
        5.3.5 沉默SlPTL导致短小的萼片,影响了花粉的发育第58-63页
6 沉默SlPTL提高番茄非生物胁迫的抗性第63-69页
    6.1 材料、试剂、设备第63页
    6.2 实验方法第63-65页
        6.2.1 SlPTL转基因植株苗期干旱胁迫实验第63页
        6.2.2 SlPTL转基因植株苗期盐胁迫实验第63页
        6.2.3 植株离体叶片失水率的检测第63-64页
        6.2.4 相对含水量的检测第64页
        6.2.5 干旱胁迫和盐胁迫处理下相关基因的表达分析第64页
        6.2.6 实验所用的引物第64-65页
    6.3 结果与分析第65-69页
        6.3.1 SlPTL基因的沉默提高了番茄植株的抗旱性第65-66页
        6.3.2 SlPTL基因的沉默增加了番茄植株的耐盐性第66-67页
        6.3.3 盐胁迫处理下野生型和转基因株系中胁迫相关基因的表达分析第67-69页
7 讨论第69-73页
    7.1 SlPTL属于Trihelix转录因子GT-2亚家族第69页
    7.2 SlPTL基因的表达分析第69-70页
    7.3 沉默SlPTL基因导致番茄植株赤霉素敏感型矮化第70页
    7.4 沉默SlPTL基因影响了花粉的发育第70-71页
    7.5 沉默SlPTL基因增强番茄植株的抗逆性第71-73页
8 结论与展望第73-75页
    8.1 主要结论第73页
    8.2 展望第73-75页
致谢第75-77页
参考文献第77-89页
附录第89页
    A.作者在攻读硕士学位期间的论文目录第89页

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