中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-7页 |
缩略词表 | 第11-13页 |
1 绪论 | 第13-23页 |
1.1 植物转录因子的研究进展 | 第13-16页 |
1.1.1 植物转录因子与形态建成和生长发育 | 第13-14页 |
1.1.2 植物转录因子与非生物胁迫应答 | 第14-16页 |
1.2 Trihelix转录因子的研究进展 | 第16-20页 |
1.2.1 Trihelix转录因子的发现 | 第16-17页 |
1.2.2 Trihelix转录因子的结构及分类 | 第17页 |
1.2.3 Trihelix转录因子的功能 | 第17-20页 |
1.2.4 番茄Trihelix转录因子的研究现状 | 第20页 |
1.3 课题的提出及研究意义 | 第20-21页 |
1.4 课题的研究内容、技术路线及创新点 | 第21-23页 |
1.4.1 研究内容 | 第21-22页 |
1.4.2 技术路线 | 第22页 |
1.4.3 创新点 | 第22-23页 |
2 SlPTL基因生物信息学分析 | 第23-25页 |
2.1 分析方法 | 第23页 |
2.2 结果与分析 | 第23-25页 |
2.2.1 SlPTL的进化树分析 | 第23-24页 |
2.2.2 SlPTL蛋白序列的分析 | 第24-25页 |
3 SlPTL基因的表达模式分析 | 第25-33页 |
3.1 材料与试剂 | 第25页 |
3.1.1 植物材料 | 第25页 |
3.1.2 试剂 | 第25页 |
3.2 实验方法 | 第25-29页 |
3.2.1 番茄总RNA的提取 | 第25-26页 |
3.2.2 cDNA的合成 | 第26页 |
3.2.3 SlPTL基因的组织表达模式分析 | 第26-27页 |
3.2.4 非生物胁迫处理野生型番茄方法 | 第27页 |
3.2.5 外源激素处理野生型番茄方法 | 第27-28页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR检测基因表达水平 | 第28-29页 |
3.3 结果与分析 | 第29-33页 |
3.3.1 RNA的提取 | 第29-30页 |
3.3.2 SlPTL基因在野生型番茄中的表达模式 | 第30-31页 |
3.3.3 SlPTL基因对非生物胁迫处理的响应 | 第31页 |
3.3.4 SlPTL基因对激素处理的响应 | 第31-33页 |
4 SlPTL转基因植株的获得 | 第33-49页 |
4.1 材料、试剂、设备 | 第33-36页 |
4.1.1 材料 | 第33页 |
4.1.2 试剂 | 第33-35页 |
4.1.3 主要仪器设备 | 第35-36页 |
4.2 实验方法 | 第36-43页 |
4.2.1 番茄基因组DNA的提取 | 第36页 |
4.2.2 SlPTL基因沉默片段的克隆 | 第36-39页 |
4.2.3 SlPTL基因RNAi沉默载体的构建 | 第39-41页 |
4.2.4 农杆菌LBA4404介导的番茄遗传转化以及阳性株系的筛选 | 第41-43页 |
4.2.5 实验所用的引物 | 第43页 |
4.3 结果与分析 | 第43-49页 |
4.3.1 SlPTL基因RNAi沉默载体的构建 | 第43-47页 |
4.3.2 SlPTL转基因番茄苗系的培育与鉴定 | 第47-49页 |
5 SlPTL沉默株系表型观察及功能鉴定 | 第49-63页 |
5.1 材料、试剂、设备 | 第49页 |
5.2 实验方法 | 第49-51页 |
5.2.1 SlPTL在转基因番茄株系中的表达分析 | 第49页 |
5.2.2 番茄植株形态参数的测定 | 第49页 |
5.2.3 茎的组织切片分析 | 第49页 |
5.2.4 GA3处理实验 | 第49-50页 |
5.2.5 SlPTL在野生型番茄开花期的表达模式分析 | 第50页 |
5.2.6 花粉萌发率的检测 | 第50页 |
5.2.7 种子数目的统计 | 第50页 |
5.2.8 实验所用的引物 | 第50-51页 |
5.3 结果与分析 | 第51-63页 |
5.3.1 SlPTL转基因番茄株系的基因表达分析 | 第51-52页 |
5.3.2 沉默SlPTL改变番茄植株的形态 | 第52-56页 |
5.3.3 外源GA3敏感性实验以及植株生长状况 | 第56-57页 |
5.3.4 沉默SlPTL改变了赤霉素合成、代谢和信号转导相关基因的转录水平 | 第57-58页 |
5.3.5 沉默SlPTL导致短小的萼片,影响了花粉的发育 | 第58-63页 |
6 沉默SlPTL提高番茄非生物胁迫的抗性 | 第63-69页 |
6.1 材料、试剂、设备 | 第63页 |
6.2 实验方法 | 第63-65页 |
6.2.1 SlPTL转基因植株苗期干旱胁迫实验 | 第63页 |
6.2.2 SlPTL转基因植株苗期盐胁迫实验 | 第63页 |
6.2.3 植株离体叶片失水率的检测 | 第63-64页 |
6.2.4 相对含水量的检测 | 第64页 |
6.2.5 干旱胁迫和盐胁迫处理下相关基因的表达分析 | 第64页 |
6.2.6 实验所用的引物 | 第64-65页 |
6.3 结果与分析 | 第65-69页 |
6.3.1 SlPTL基因的沉默提高了番茄植株的抗旱性 | 第65-66页 |
6.3.2 SlPTL基因的沉默增加了番茄植株的耐盐性 | 第66-67页 |
6.3.3 盐胁迫处理下野生型和转基因株系中胁迫相关基因的表达分析 | 第67-69页 |
7 讨论 | 第69-73页 |
7.1 SlPTL属于Trihelix转录因子GT-2亚家族 | 第69页 |
7.2 SlPTL基因的表达分析 | 第69-70页 |
7.3 沉默SlPTL基因导致番茄植株赤霉素敏感型矮化 | 第70页 |
7.4 沉默SlPTL基因影响了花粉的发育 | 第70-71页 |
7.5 沉默SlPTL基因增强番茄植株的抗逆性 | 第71-73页 |
8 结论与展望 | 第73-75页 |
8.1 主要结论 | 第73页 |
8.2 展望 | 第73-75页 |
致谢 | 第75-77页 |
参考文献 | 第77-89页 |
附录 | 第89页 |
A.作者在攻读硕士学位期间的论文目录 | 第89页 |