| 中文摘要 | 第3-7页 |
| 英文摘要 | 第7-11页 |
| 中英文缩略词对照表 | 第17-20页 |
| 1 绪论 | 第20-34页 |
| 1.1 问题的提出与研究意义 | 第20-22页 |
| 1.1.1 问题的提出 | 第20-21页 |
| 1.1.2 研究的意义 | 第21-22页 |
| 1.2 国内外研究现状 | 第22-30页 |
| 1.2.1 韧带的结构和功能 | 第22-23页 |
| 1.2.2 韧带的生物力学性质和损伤 | 第23-25页 |
| 1.2.3 韧带的愈合 | 第25页 |
| 1.2.4 韧带组织工程 | 第25-28页 |
| 1.2.5 滑膜及滑液 | 第28-29页 |
| 1.2.6 力生长因子 | 第29-30页 |
| 1.3 本文的研究目的、研究内容及技术路线 | 第30-34页 |
| 1.3.1 研究目的 | 第30页 |
| 1.3.2 研究内容 | 第30-32页 |
| 1.3.3 本文创新点 | 第32-33页 |
| 1.3.4 技术路线 | 第33-34页 |
| 2 MGF-C24E对韧带损伤后膝关节滑膜的影响 | 第34-50页 |
| 2.1 引言 | 第34-35页 |
| 2.2 实验材料 | 第35-38页 |
| 2.2.1 主要实验仪器设备和耗材 | 第35页 |
| 2.2.2 主要实验药品和试剂 | 第35-37页 |
| 2.2.3 主要药品和试剂配置 | 第37-38页 |
| 2.3 实验方法 | 第38-44页 |
| 2.3.1 人原代成纤维样滑膜细胞分离 | 第38页 |
| 2.3.2 人成纤维样滑膜细胞传代培养 | 第38-39页 |
| 2.3.3 MTS检测细胞活性(Viability) | 第39页 |
| 2.3.4 EdU检测细胞增殖(Proliferation) | 第39-40页 |
| 2.3.5 实时定量PCR(qRT-PCR)检测基因表达 | 第40-42页 |
| 2.3.6 免疫印迹(Westernblotting) | 第42-44页 |
| 2.4 实验结果 | 第44-47页 |
| 2.4.1 MGF-C24E对OA-FLSs活性无显著影响 | 第44页 |
| 2.4.2 MGF-C24E上调OA-FLSs中Lox家族成员基因表达 | 第44-46页 |
| 2.4.3 MGF-C24E激活OA-FLSs内质网应激并抑制细胞增殖 | 第46-47页 |
| 2.4.4 MGF-C24E抑制OA-FLSs炎症因子产生 | 第47页 |
| 2.5 分析与讨论 | 第47-49页 |
| 2.5.1 MGF-C24E对OA-FLSs活性无显著影响 | 第48页 |
| 2.5.2 MGF-C24E诱导Lox家族基因表达上调 | 第48页 |
| 2.5.3 MGF-C24E诱导OA-FLS凋亡并激活细胞内质网应激 | 第48-49页 |
| 2.5.4 MGF-C24E诱导抑制炎症因子产生 | 第49页 |
| 2.6 本章小结 | 第49-50页 |
| 3 MGF-C24E调节关节腔微环境促进ACL的损伤修复 | 第50-70页 |
| 3.1 引言 | 第50-52页 |
| 3.2 实验材料 | 第52-54页 |
| 3.2.1 主要实验仪器设备和耗材 | 第52页 |
| 3.2.2 主要实验药品和试剂 | 第52-53页 |
| 3.2.3 主要药品和试剂配置 | 第53-54页 |
| 3.3 实验方法 | 第54-57页 |
| 3.3.1 力学加载 | 第54页 |
| 3.3.2 免疫荧光 | 第54页 |
| 3.3.3 细胞骨架染色 | 第54页 |
| 3.3.4 流式细胞术 | 第54-55页 |
| 3.3.5 细胞ROS分析 | 第55页 |
| 3.3.6 微管吮吸技术 | 第55页 |
| 3.3.7 明胶酶谱 | 第55-56页 |
| 3.3.8 qRT-PCR引物 | 第56-57页 |
| 3.4 实验结果 | 第57-66页 |
| 3.4.1 MGF-C24E抑制力学加载FLS诱导的细胞应激 | 第57-59页 |
| 3.4.2 MGF-C24E维持FLS力学损伤过程中Lox家族基因水平 | 第59-60页 |
| 3.4.3 MGF-C24E抑制FLS力学损伤过程中MMP-2活性 | 第60-61页 |
| 3.4.4 MGF-C24E维持FLS力学损伤过程中细胞形态 | 第61-62页 |
| 3.4.5 共培养体系下MGF-C24E促进受损ACLFs的增殖和迁移 | 第62-63页 |
| 3.4.6 共培养体系下MGF-C24E下调受损ACLFs中MMPs表达水平 | 第63-64页 |
| 3.4.7 共培养体系下MGF-C24E促进受损ACLFs胶原的合成 | 第64-65页 |
| 3.4.8 共培养体系下MGF-C24E缓解由于力学损伤造成的细胞粘弹性变化 | 第65-66页 |
| 3.5 分析与讨论 | 第66-69页 |
| 3.5.1 力学损伤过程中MGF-C24E通过滑膜调节关节腔微环境 | 第66-68页 |
| 3.5.2 MGF-C24E调节关节腔微环境促进ACL损伤修复 | 第68-69页 |
| 3.6 本章小结 | 第69-70页 |
| 4 MGF-C24E诱导滑膜源干细胞向韧带分化促进ACL的再生 | 第70-92页 |
| 4.1 引言 | 第70-71页 |
| 4.2 实验材料 | 第71-74页 |
| 4.2.1 主要实验仪器设备和耗材 | 第71页 |
| 4.2.2 主要实验药品和试剂 | 第71-73页 |
| 4.2.3 主要药品和试剂配置 | 第73-74页 |
| 4.2.4 实验动物 | 第74页 |
| 4.3 实验方法 | 第74-77页 |
| 4.3.1 细胞分离 | 第74页 |
| 4.3.2 单细胞成球培养 | 第74页 |
| 4.3.3 干细胞分化能力检测 | 第74-75页 |
| 4.3.4 Transwell检测细胞迁移 | 第75页 |
| 4.3.5 AFM检测细胞杨氏模量 | 第75页 |
| 4.3.6 动物模型建立 | 第75-76页 |
| 4.3.7 H&E染色 | 第76页 |
| 4.3.8 qRT-PCR引物 | 第76-77页 |
| 4.4 实验结果 | 第77-90页 |
| 4.4.1 滑膜干细胞的分离鉴定 | 第77-79页 |
| 4.4.2 滑膜来源干细胞的蛋白表达谱 | 第79-80页 |
| 4.4.3 MGF-C24E诱导SMSCs向韧带分化 | 第80-84页 |
| 4.4.4 SMSCs在体内作用于SMSCs促进韧带修复 | 第84-87页 |
| 4.4.5 MGF-C24E通过FAK-ERK1/2信号通路促进SMSCs迁移 | 第87-90页 |
| 4.5 分析与讨论 | 第90-91页 |
| 4.6 本章小结 | 第91-92页 |
| 5 MGF-C24E抑制软骨退变及其抗炎机制 | 第92-128页 |
| 5.1 引言 | 第92-93页 |
| 5.2 实验材料 | 第93-96页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第93页 |
| 5.2.2 主要实验仪器设备和耗材 | 第93页 |
| 5.2.3 主要实验药品和试剂 | 第93-95页 |
| 5.2.4 主要药品和试剂配置 | 第95-96页 |
| 5.3 实验方法 | 第96-100页 |
| 5.3.1 基因沉默 | 第96页 |
| 5.3.2 动物模型建立 | 第96页 |
| 5.3.3 Masson染色 | 第96-97页 |
| 5.3.4 SafraninO-Fastgreen染色 | 第97页 |
| 5.3.5 丝素蛋白制备 | 第97页 |
| 5.3.6 高压静电纺丝制备PCL纳米纤维支架 | 第97页 |
| 5.3.7 丝素层层自组装 | 第97页 |
| 5.3.8 丝素蛋白重氮耦合 | 第97-98页 |
| 5.3.9 MGF-E肽聚乙二醇化 | 第98页 |
| 5.3.10 点击化学反应 | 第98页 |
| 5.3.11 qRT-PCR引物 | 第98-99页 |
| 5.3.12 软骨组织病理学评级 | 第99-100页 |
| 5.4 实验结果 | 第100-124页 |
| 5.4.1 MGF-C24E抑制OA软骨细胞凋亡 | 第100-101页 |
| 5.4.2 MGF-C24E促进软骨细胞增殖 | 第101-102页 |
| 5.4.3 MGF-C24E对OA软骨细胞迁移、形态和力学性质的影响 | 第102-103页 |
| 5.4.4 MGF-C24E促进软骨胞外基质的合成抑制OA病程恶化 | 第103-105页 |
| 5.4.5 MGF-C24E通过PERK调控细胞内质网应激抑制OA病程恶化 | 第105-106页 |
| 5.4.6 体外模型证实MGF-C24E对OA软骨退变的抑制作用 | 第106-108页 |
| 5.4.7 MGF-C25E调控巨噬细胞从M1型向M2型转化 | 第108-111页 |
| 5.4.8 MGF-C25E调控巨噬细胞极化生物材料的制备 | 第111-116页 |
| 5.4.9 功能性纳米纤维支架对体外巨噬细胞极化的调节作用 | 第116-121页 |
| 5.4.10 功能性纳米纤维支架对体内炎症的调节作用 | 第121-124页 |
| 5.5 结果与讨论 | 第124-127页 |
| 5.5.1 MGF-C24E抑制OA软骨退变 | 第124-125页 |
| 5.5.2 MGF-C25E调控巨噬细胞极化 | 第125-127页 |
| 5.6 本章小结 | 第127-128页 |
| 6 结论与展望 | 第128-132页 |
| 6.1 本文主要结论 | 第128-129页 |
| 6.2 展望 | 第129-132页 |
| 致谢 | 第132-134页 |
| 参考文献 | 第134-144页 |
| 附录 | 第144-145页 |
| A.作者攻读博士学位期间发表的论文目录 | 第144-145页 |
| B.作者在攻读博士学位期间参与编译书目 | 第145页 |
| C.作者在攻读博士学位期间参与的课题 | 第145页 |
