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耐热β-葡萄糖苷酶细菌的筛选、基因的克隆与表达

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
第一章 绪论第9-14页
   ·β-葡萄糖苷酶的简介第9-11页
     ·β-葡萄糖苷酶的分类第9页
     ·β-葡萄糖苷酶的生化性质第9-10页
       ·分子量第9页
       ·最适反应pH 及pH 稳定性第9页
       ·最适反应温度和热稳定性第9-10页
     ·β-葡萄糖苷酶的催化反应机制第10页
       ·反应机制第10页
       ·反应抑制剂第10页
       ·底物专一性第10页
     ·β-葡萄糖苷酶活性测定方法第10-11页
   ·β-葡萄糖苷酶的应用价值第11-12页
     ·β-葡萄糖苷酶在燃料乙醇工业中的应用前景第11页
     ·β-葡萄糖苷酶在其他方面的应用第11-12页
   ·β-葡萄糖苷酶的研究概况第12-13页
   ·立题意义第13页
   ·研究内容第13-14页
第二章 材料与方法第14-21页
   ·材料第14-16页
     ·菌种与质粒第14页
     ·试剂第14页
     ·工具酶第14页
     ·其他材料第14页
     ·主要仪器第14-15页
     ·培养基第15-16页
   ·实验方法第16-21页
     ·菌种筛选第16-18页
       ·初筛方法第16页
       ·复筛方法第16页
       ·色谱条件第16页
       ·菌种鉴定方法第16页
       ·纤维二糖转化率的测定第16-17页
       ·粗酶液的提取第17页
       ·蛋白含量测定第17页
       ·蛋白质浓度标准曲线第17页
       ·酶活力测定第17页
       ·对硝基苯酚标准曲线制备第17-18页
     ·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的研究第18页
       ·大肠杆菌产磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的验证第18页
       ·IPTG 对大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 促进作用的验证第18页
       ·IPTG 诱导原因的研究第18页
     ·β-葡萄糖苷酶的克隆与表达第18-21页
       ·地衣芽孢杆菌染色体提取第18-19页
       ·地衣芽孢杆菌bglH 基因的PCR 扩增第19页
       ·DNA 操做技术第19页
       ·大肠杆菌的感受态细胞的制备和转化第19-20页
       ·重组菌诱导表达第20页
       ·菌体量的测定第20-21页
第三章 结果与讨论第21-40页
   ·产β-葡萄糖苷酶细菌的初筛第21页
   ·产β-葡萄糖苷酶细菌的复筛第21-22页
   ·分子生物学鉴定第22-23页
   ·粗酶液酶学性质初步分析第23-27页
     ·粗酶液最适反应温度研究第24页
     ·粗酶液最适反应pH 的研究第24-25页
     ·粗酶液热稳定性的研究第25-26页
     ·粗酶液pH 稳定性的研究第26页
     ·粗酶液比酶活的比较第26-27页
   ·菌株的形态观察与生理生化鉴定第27-28页
   ·地衣芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶酶学性质的进一步分析第28-30页
     ·不同糖类对酶活力的影响第28-29页
     ·不同金属离子对酶活力的影响第29页
     ·不同酒精浓度对酶活力的影响第29-30页
   ·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A(P-β-glucosidaseA)的研究第30-33页
     ·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的验证第30页
     ·IPTG 对大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的影响第30-31页
     ·IPTG 的促进作用原理分析第31-32页
     ·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的最适反应温度第32-33页
   ·重组菌的构建与表达第33-38页
     ·地衣芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因(bglH)的PCR 扩增第33-34页
     ·重组质粒的构建第34页
     ·pET-206(+)-bglH 在大肠杆菌中的诱导表达第34-35页
     ·诱导条件的优化第35-38页
       ·IPTG 浓度对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响第35页
       ·诱导前菌体浓度对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响第35-36页
       ·诱导温度对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响第36页
       ·出发培养基对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响第36-38页
   ·大肠杆菌本底酶活对重组菌酶活影响的探讨第38-39页
   ·主要结论与展望第39-40页
     ·主要结论第39页
     ·展望第39-40页
致谢第40-41页
参考文献第41-45页
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文第45页

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