摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-9页 |
第一章 绪论 | 第9-14页 |
·β-葡萄糖苷酶的简介 | 第9-11页 |
·β-葡萄糖苷酶的分类 | 第9页 |
·β-葡萄糖苷酶的生化性质 | 第9-10页 |
·分子量 | 第9页 |
·最适反应pH 及pH 稳定性 | 第9页 |
·最适反应温度和热稳定性 | 第9-10页 |
·β-葡萄糖苷酶的催化反应机制 | 第10页 |
·反应机制 | 第10页 |
·反应抑制剂 | 第10页 |
·底物专一性 | 第10页 |
·β-葡萄糖苷酶活性测定方法 | 第10-11页 |
·β-葡萄糖苷酶的应用价值 | 第11-12页 |
·β-葡萄糖苷酶在燃料乙醇工业中的应用前景 | 第11页 |
·β-葡萄糖苷酶在其他方面的应用 | 第11-12页 |
·β-葡萄糖苷酶的研究概况 | 第12-13页 |
·立题意义 | 第13页 |
·研究内容 | 第13-14页 |
第二章 材料与方法 | 第14-21页 |
·材料 | 第14-16页 |
·菌种与质粒 | 第14页 |
·试剂 | 第14页 |
·工具酶 | 第14页 |
·其他材料 | 第14页 |
·主要仪器 | 第14-15页 |
·培养基 | 第15-16页 |
·实验方法 | 第16-21页 |
·菌种筛选 | 第16-18页 |
·初筛方法 | 第16页 |
·复筛方法 | 第16页 |
·色谱条件 | 第16页 |
·菌种鉴定方法 | 第16页 |
·纤维二糖转化率的测定 | 第16-17页 |
·粗酶液的提取 | 第17页 |
·蛋白含量测定 | 第17页 |
·蛋白质浓度标准曲线 | 第17页 |
·酶活力测定 | 第17页 |
·对硝基苯酚标准曲线制备 | 第17-18页 |
·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的研究 | 第18页 |
·大肠杆菌产磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的验证 | 第18页 |
·IPTG 对大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 促进作用的验证 | 第18页 |
·IPTG 诱导原因的研究 | 第18页 |
·β-葡萄糖苷酶的克隆与表达 | 第18-21页 |
·地衣芽孢杆菌染色体提取 | 第18-19页 |
·地衣芽孢杆菌bglH 基因的PCR 扩增 | 第19页 |
·DNA 操做技术 | 第19页 |
·大肠杆菌的感受态细胞的制备和转化 | 第19-20页 |
·重组菌诱导表达 | 第20页 |
·菌体量的测定 | 第20-21页 |
第三章 结果与讨论 | 第21-40页 |
·产β-葡萄糖苷酶细菌的初筛 | 第21页 |
·产β-葡萄糖苷酶细菌的复筛 | 第21-22页 |
·分子生物学鉴定 | 第22-23页 |
·粗酶液酶学性质初步分析 | 第23-27页 |
·粗酶液最适反应温度研究 | 第24页 |
·粗酶液最适反应pH 的研究 | 第24-25页 |
·粗酶液热稳定性的研究 | 第25-26页 |
·粗酶液pH 稳定性的研究 | 第26页 |
·粗酶液比酶活的比较 | 第26-27页 |
·菌株的形态观察与生理生化鉴定 | 第27-28页 |
·地衣芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶酶学性质的进一步分析 | 第28-30页 |
·不同糖类对酶活力的影响 | 第28-29页 |
·不同金属离子对酶活力的影响 | 第29页 |
·不同酒精浓度对酶活力的影响 | 第29-30页 |
·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A(P-β-glucosidaseA)的研究 | 第30-33页 |
·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的验证 | 第30页 |
·IPTG 对大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的影响 | 第30-31页 |
·IPTG 的促进作用原理分析 | 第31-32页 |
·大肠杆菌磷酸化β-葡萄糖苷酶A 的最适反应温度 | 第32-33页 |
·重组菌的构建与表达 | 第33-38页 |
·地衣芽孢杆菌β-葡萄糖苷酶基因(bglH)的PCR 扩增 | 第33-34页 |
·重组质粒的构建 | 第34页 |
·pET-206(+)-bglH 在大肠杆菌中的诱导表达 | 第34-35页 |
·诱导条件的优化 | 第35-38页 |
·IPTG 浓度对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第35页 |
·诱导前菌体浓度对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第35-36页 |
·诱导温度对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第36页 |
·出发培养基对重组β-葡萄糖苷酶表达的影响 | 第36-38页 |
·大肠杆菌本底酶活对重组菌酶活影响的探讨 | 第38-39页 |
·主要结论与展望 | 第39-40页 |
·主要结论 | 第39页 |
·展望 | 第39-40页 |
致谢 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-45页 |
附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45页 |