摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩写词表(Abbreviations) | 第12-13页 |
1 前言 | 第13-32页 |
1.1 细胞周期调控的关键节点 | 第13-15页 |
1.2 细胞周期调控因子及其功能 | 第15-26页 |
1.2.1 细胞周期依赖性蛋白激酶 | 第15-18页 |
1.2.2 细胞周期蛋白 | 第18-20页 |
1.2.3 细胞周期依赖性蛋白激酶抑制因子 | 第20-24页 |
1.2.4 Rb/E2F | 第24-26页 |
1.3 植物有性生殖及发育过程 | 第26-30页 |
1.3.1 大孢子的形成 | 第26页 |
1.3.2 雌配子体的形成与胚囊发育 | 第26-29页 |
1.3.3 雄配子体的形成 | 第29页 |
1.3.4 植物受精与胚的形成 | 第29-30页 |
1.4 细胞周期与大孢子和雌配子体的形成 | 第30-31页 |
1.5 本研究目的及意义 | 第31-32页 |
2 材料与方法 | 第32-46页 |
2.1 试验材料 | 第32页 |
2.2 相关试剂 | 第32-34页 |
2.2.1 工具酶 | 第32-33页 |
2.2.2 生物生化试剂 | 第33页 |
2.2.3 主要试剂盒 | 第33-34页 |
2.3 主要试剂的配制 | 第34-36页 |
2.3.1 DNA提取液 | 第34页 |
2.3.2 PCR相关试剂 | 第34-35页 |
2.3.3 FAA固定液 | 第35页 |
2.3.4 Gus染色液 | 第35-36页 |
2.3.5 透明剂 | 第36页 |
2.4 试验方法 | 第36-46页 |
2.4.1 拟南芥种植 | 第36页 |
2.4.2 拟南芥种子灭菌 | 第36页 |
2.4.3 T-DNA插入突变体鉴定 | 第36-37页 |
2.4.4 总RNA的提取方法 | 第37-38页 |
2.4.5 RNA的浓度测定 | 第38页 |
2.4.6 反转录 | 第38-39页 |
2.4.7 表达分析 | 第39页 |
2.4.8 ICK六突变体和七突变体的构建 | 第39-40页 |
2.4.9 样品的固定 | 第40-41页 |
2.4.10 GUS染色 | 第41页 |
2.4.11 显微镜DIC观察 | 第41页 |
2.4.12 表达载体建构 | 第41-44页 |
2.4.13 拟南芥的转化 | 第44-45页 |
2.4.15 转基因植株的筛选及鉴定 | 第45页 |
2.4.16 互补检验 | 第45-46页 |
3 结果 | 第46-78页 |
3.1 ICK基因多突变体构建 | 第46-48页 |
3.1.1 ick3和ick4单突变体基因型检测及表达分析 | 第46-47页 |
3.1.2 ICK七突变体的基因型检测和表达分析 | 第47-48页 |
3.2 ICK七突变体主要形态表型分析 | 第48-52页 |
3.2.1 苗期相关表型分析 | 第48-51页 |
3.2.2 七突变体粒重增加 | 第51页 |
3.2.3 七突变体单株产量降低 | 第51-52页 |
3.3 ICK七突变体抽苔时间与野生型相似 | 第52-53页 |
3.4 ICK七突变体对非生物胁迫的反应 | 第53-55页 |
3.4.1 胁迫处理对七突变体根生长表现的影响 | 第54页 |
3.4.2 胁迫处理条件下七突变体生物量表现 | 第54-55页 |
3.5 ICK七突变体角果变短、胚珠败育 | 第55-57页 |
3.6 正反交实验证明胚珠败育与雌配子发育异常有关 | 第57页 |
3.7 ICK七突变体花粉发育部分异常 | 第57-58页 |
3.8 ICK七突变体胚珠发育 | 第58-69页 |
3.8.1 七突变体的雌配子体数目增多 | 第58-62页 |
3.8.2 七突变体的非功能大孢子退化异常 | 第62-66页 |
3.8.3 七突变体中双胚与不同类型胚乳的形成 | 第66-69页 |
3.9 ICK七突变体可产生双胚苗 | 第69-71页 |
3.10 互补实验 | 第71-78页 |
3.10.1 利用ICK4互补七突变体的表型 | 第71-74页 |
3.10.2 利用ICK7互补七突变体的表型 | 第74-78页 |
4 讨论 | 第78-83页 |
4.1 细胞周期调控因子ICK与植物生长发育 | 第78页 |
4.2 细胞周期调控因子ICK与植物形态建成 | 第78-79页 |
4.3 细胞分裂调控与功能大孢子和胚囊的发育 | 第79-80页 |
4.4 ICK基因的下调表达与双胚和双胚乳的发育 | 第80-81页 |
4.5 ICK基因在进化上的意义 | 第81-83页 |
5 小结与展望 | 第83-85页 |
5.1 本研究的创新之处 | 第83页 |
5.2 展望 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-101页 |
附录 | 第101-104页 |
附录1 相关引物序列 | 第101-102页 |
附录2 作者简介和论文发表 | 第102-104页 |
致谢 | 第104-105页 |