致谢 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
缩略语表 | 第12-18页 |
1 绪论 | 第18-27页 |
1.1 柿果实分类 | 第18-19页 |
1.2 单宁 | 第19-24页 |
1.2.1 单宁的分类与组成 | 第19-20页 |
1.2.2 柿单宁的功能与应用 | 第20-21页 |
1.2.3 植物单宁的代谢 | 第21-23页 |
1.2.4 柿单宁代谢及转录调控 | 第23-24页 |
1.3 柿果实脱涩 | 第24-26页 |
1.3.1 柿果实采后脱涩处理 | 第24页 |
1.3.2 柿果实采后脱涩机理 | 第24-25页 |
1.3.3 柿果实采后脱涩的转录调控机制 | 第25-26页 |
1.4 研究目标和内容 | 第26-27页 |
2 高二氧化碳/低氧响应转录因子参与柿果实采后脱涩 | 第27-47页 |
2.1 材料与方法 | 第27-35页 |
2.1.1 植物材料与处理 | 第27页 |
2.1.2 单宁印迹 | 第27-28页 |
2.1.3 可溶性单宁含量测定 | 第28页 |
2.1.4 乙醇乙醛含量测定 | 第28页 |
2.1.5 RNA的提取和cDNA的合成 | 第28-29页 |
2.1.6 RACE和全长序列克隆 | 第29-30页 |
2.1.7 基因表达分析 | 第30-31页 |
2.1.8 烟草双荧光素酶体系(调控效应分析) | 第31-32页 |
2.1.9 酵母单杂交(转录因子-启动子互作) | 第32-33页 |
2.1.10 启动子点突变 | 第33页 |
2.1.11 柿果实圆片瞬时过量表达分析(基因功能验证) | 第33-34页 |
2.1.12 统计分析 | 第34-35页 |
2.2 结果与分析 | 第35-44页 |
2.2.1 AHCA处理对‘磨盘柿’果实可溶性单宁含量及乙醇乙醛含量的影响 | 第35页 |
2.2.2 AHCA和AHNA处理对不同转录因子的诱导表达分析 | 第35-38页 |
2.2.3 AHCA响应转录因子对DkADH1和DkPDC2启动子的调控效应 | 第38-39页 |
2.2.4 AHCA响应转录因子对DkERF9/10/19启动子的调控效应 | 第39-40页 |
2.2.5 TFs与脱涩相关基因启动子结合能力分析 | 第40-42页 |
2.2.6 AHCA响应转录因子在柿果实圆片中瞬时过量表达分析 | 第42-44页 |
2.3 讨论 | 第44-47页 |
3 DkERF24和DkWRKY1协同调控柿果实采后脱涩 | 第47-66页 |
3.1 材料与方法 | 第47-54页 |
3.1.1 植物材料与处理 | 第47页 |
3.1.2 RNA提取和cDNA合成 | 第47页 |
3.1.3 酵母单杂交文库构建 | 第47页 |
3.1.4 DkPDC2启动子酵母单杂文库筛选 | 第47页 |
3.1.5 RACE和全长序列克隆 | 第47-48页 |
3.1.6 酵母单杂交分析(单一验证) | 第48页 |
3.1.7 烟草双荧光素酶体系分析(调控效应分析) | 第48-49页 |
3.1.8 基因表达分析 | 第49页 |
3.1.9 亚细胞定位 | 第49-50页 |
3.1.10 酵母双杂交(蛋白互作) | 第50-51页 |
3.1.11 双分子荧光互补(蛋白互作) | 第51页 |
3.1.12 拟南芥基因获得 | 第51-52页 |
3.1.13 统计分析 | 第52-54页 |
3.2 结果与分析 | 第54-63页 |
3.2.1 筛库获得的转录因子对DkDPC2启动子结合能力分析 | 第54-55页 |
3.2.2 DkERF23/24/25和DkWRKY1/5/6/7对DkPDC2启动子的调控效应分析 | 第55页 |
3.2.3 AHCA处理对DkERF23/24/25和DkWRKY1/5/6/7的诱导表达分析 | 第55-57页 |
3.2.4 DkERF23/24/25和DkWRKY1/5/6/7亚细胞定位分析 | 第57页 |
3.2.5 DkERF24与DkWRKY1组合对DkPDC2启动子的调控效应 | 第57-58页 |
3.2.6 酵母双杂分析DkERF24和DkWRKY1蛋白互作关系 | 第58页 |
3.2.7 双分子荧光互补验证DkERF24与DkWRKY1蛋白互作 | 第58-60页 |
3.2.8 拟南芥中同源基因对DkPDC2启动子的调控效应和结合能力分析 | 第60-61页 |
3.2.9 AtERF1与AtWRKY53组合对DkPDC2启动子的调控效应 | 第61页 |
3.2.10 双分子荧光互补验证AtERF1与AtWRKY53蛋白互作 | 第61-63页 |
3.3 讨论 | 第63-66页 |
4 小结与展望 | 第66-68页 |
4.1 小结 | 第66页 |
4.2 展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-80页 |
附图 | 第80-85页 |
作者简历及在学期间所取得的科研成果: | 第85-86页 |