中文摘要 | 第4-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-26页 |
1.1 木质纤维素 | 第10页 |
1.2 半纤维素 | 第10-14页 |
1.2.1 木糖的利用 | 第10-13页 |
1.2.2 阿拉伯糖的利用 | 第13-14页 |
1.3 纤维素 | 第14-16页 |
1.3.1 纤维素的特性 | 第14-15页 |
1.3.2 纤维素酶 | 第15页 |
1.3.3 一体化生物加工过程 | 第15-16页 |
1.4 微生物发酵生产乙偶姻 | 第16-22页 |
1.4.1 大肠杆菌发酵生产乙偶姻 | 第17页 |
1.4.2 粘质沙雷氏菌发酵生产乙偶姻 | 第17-18页 |
1.4.3 其他微生物发酵生产乙偶姻 | 第18-19页 |
1.4.4 枯草芽孢杆菌发酵生产乙偶姻 | 第19-20页 |
1.4.5 微生物发酵生产乙偶姻的改进方式 | 第20-22页 |
1.5 进化工程 | 第22-24页 |
1.5.1 提高菌体对环境的适应能力及对有害物质的耐受性 | 第22-23页 |
1.5.2 菌体底物的拓展 | 第23页 |
1.5.3 枯草芽孢杆菌的适应性进化 | 第23-24页 |
1.6 选题背景与主要技术路线 | 第24-26页 |
1.6.1 选题背景 | 第24页 |
1.6.2 主要研究路线 | 第24-26页 |
第二章 通过反向代谢工程构建高效利用木糖的枯草芽孢杆菌 | 第26-68页 |
2.1 实验材料 | 第26-30页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第26-28页 |
2.1.2 实验仪器 | 第28页 |
2.1.3 实验试剂 | 第28-29页 |
2.1.4 培养基 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-44页 |
2.2.1 CaCl_2法大肠杆菌感受态的制备与转化 | 第30-31页 |
2.2.2 质粒的提取 | 第31-33页 |
2.2.3 基因组DNA的提取 | 第33页 |
2.2.4 DNA片段的PCR扩增 | 第33-35页 |
2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第35-36页 |
2.2.6 DNA片段的纯化 | 第36页 |
2.2.7 DNA片段的胶回收纯化 | 第36-37页 |
2.2.8 DNA片段或质粒的酶切 | 第37-38页 |
2.2.9 DNA片段的酶连 | 第38页 |
2.2.10 菌落PCR验证质粒 | 第38-39页 |
2.2.11 枯草芽孢杆菌化学感受态的制备及其转化 | 第39-40页 |
2.2.12 菌体培养与发酵 | 第40页 |
2.2.13 枯草芽孢杆菌的好氧及微氧发酵 | 第40页 |
2.2.14 发酵底物与产物的检测 | 第40-41页 |
2.2.15 RT-qPCR | 第41-44页 |
2.3 结果与讨论 | 第44-66页 |
2.3.1 枯草芽孢杆菌对于木糖利用的适应性进化 | 第44-45页 |
2.3.2 进化菌株E72的全基因组测序分析 | 第45-47页 |
2.3.3 araR基因突变的影响 | 第47-52页 |
2.3.4 sinR基因突变效果的鉴定 | 第52-61页 |
2.3.5 comP基因突变效果的鉴定 | 第61-66页 |
2.4 本章小结 | 第66-68页 |
第三章 枯草芽孢杆菌利用木糖生产乙偶姻 | 第68-76页 |
3.1 实验材料 | 第68-69页 |
3.1.1 菌株与质粒 | 第68页 |
3.1.2 实验仪器 | 第68页 |
3.1.3 实验试剂 | 第68-69页 |
3.1.4 培养基 | 第69页 |
3.2 实验方法 | 第69页 |
3.3 结果与讨论 | 第69-75页 |
3.3.1 不同氧条件对乙偶姻生产的影响 | 第69-72页 |
3.3.2 acoA与bdhA基因的敲除对于乙偶姻生产的影响 | 第72-74页 |
3.3.3 在发酵罐中利用木糖生产乙偶姻 | 第74-75页 |
3.4 本章小结 | 第75-76页 |
第四章 枯草芽孢杆菌利用混合糖生产乙偶姻 | 第76-88页 |
4.1 实验材料 | 第76-77页 |
4.1.1 菌株与质粒 | 第76页 |
4.1.2 实验仪器 | 第76页 |
4.1.3 实验试剂 | 第76页 |
4.1.4 培养基 | 第76-77页 |
4.2 实验方法 | 第77页 |
4.3 结果与讨论 | 第77-86页 |
4.3.1 木糖与葡萄糖的共利用 | 第77-79页 |
4.3.2 木糖、阿拉伯糖与葡萄糖的共利用 | 第79-83页 |
4.3.3 在发酵罐中利用混合糖生产乙偶姻 | 第83-86页 |
4.4 本章小结 | 第86-88页 |
第五章 枯草芽孢杆菌直接利用木聚糖与纤维素的研究 | 第88-110页 |
5.1 实验材料 | 第88-89页 |
5.1.1 菌种与质粒 | 第88-89页 |
5.1.2 实验仪器 | 第89页 |
5.1.3 实验试剂 | 第89页 |
5.1.4 培养基 | 第89页 |
5.2 实验方法 | 第89-91页 |
5.2.1 纤维素酶酶活检测 | 第90页 |
5.2.2 半乳糖苷酶酶活检测 | 第90-91页 |
5.3 结果与讨论 | 第91-109页 |
5.3.1 枯草芽孢杆菌利用木聚糖 | 第91-93页 |
5.3.2 枯草芽孢杆菌利用纤维素潜力的探究 | 第93-96页 |
5.3.3 枯草芽孢杆菌纤维素酶信号肽的筛选 | 第96-102页 |
5.3.4 枯草芽孢杆菌启动子的筛选 | 第102-106页 |
5.3.5 其它方法优化枯草芽孢杆菌纤维素酶的过表达 | 第106-109页 |
5.4 本章小结 | 第109-110页 |
第六章 结论与展望 | 第110-113页 |
6.1 结论与创新点 | 第110-112页 |
6.1.1 主要结论 | 第110-111页 |
6.1.2 创新点 | 第111-112页 |
6.2 展望 | 第112-113页 |
参考文献 | 第113-122页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第122-123页 |
致谢 | 第123-124页 |