| 摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-35页 |
| 1.1 Caspase蛋白酶家族与细胞凋亡 | 第17-27页 |
| 1.1.1 细胞凋亡与Caspase概述 | 第17-18页 |
| 1.1.2 Caspase特征及分类 | 第18-19页 |
| 1.1.3 起始Caspase的结构特点与活化特征 | 第19-20页 |
| 1.1.4 效应Caspase结构特点与活化特征 | 第20页 |
| 1.1.5 Caspase与凋亡信号转导途径 | 第20-25页 |
| 1.1.6 Caspase的调控机制 | 第25-27页 |
| 1.1.7 Caspase家族与细胞凋亡研究的生物学意义 | 第27页 |
| 1.2 CASPASE与果蝇细胞凋亡研究进展 | 第27-31页 |
| 1.2.1 果蝇Caspase与细胞凋亡 | 第27-28页 |
| 1.2.2 果蝇Caspase的功能研究进展 | 第28-30页 |
| 1.2.3 果蝇Caspase激活机制研究 | 第30-31页 |
| 1.3 细胞凋亡与昆虫抗病毒免疫应答 | 第31-32页 |
| 1.4 家蚕细胞凋亡与相关Caspase研究进展 | 第32-35页 |
| 第二章 引言 | 第35-39页 |
| 2.1 研究背景 | 第35-36页 |
| 2.2 研究的目的意义 | 第36-37页 |
| 2.3 研究内容 | 第37页 |
| 2.4 研究的主要技术路线 | 第37-39页 |
| 第三章 家蚕BmICE-2基因的克隆与表达分析 | 第39-61页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-50页 |
| 3.1.1 动物、病毒及细胞系 | 第39页 |
| 3.1.2 主要试剂及仪器 | 第39-44页 |
| 3.1.3 主要方法 | 第44-50页 |
| 3.2 结果与分析 | 第50-56页 |
| 3.2.1 BmICE-2基因克隆与序列特征分析 | 第50页 |
| 3.2.2 BmICE-2结构域预测与功能预测分析 | 第50-53页 |
| 3.2.3 BmICE-2基因mRNA表达分析 | 第53-54页 |
| 3.2.4 凋亡诱导与BmICE-2基因的mRNA表达 | 第54-55页 |
| 3.2.5 BmICE-2基因原核表达与Caspase活性分析 | 第55-56页 |
| 3.3 讨论 | 第56-59页 |
| 3.4 本章小结 | 第59-61页 |
| 第四章 BmICE-2蛋白Caspase特征鉴定与分析 | 第61-77页 |
| 4.1 材料与方法 | 第61-65页 |
| 4.1.1 细胞、动物 | 第61页 |
| 4.1.2 所需试剂及溶液配制 | 第61-62页 |
| 4.1.3 BmICE-2瞬时表达载体的构建 | 第62页 |
| 4.1.4 BmICE-2多肽抗体的制备 | 第62页 |
| 4.1.5 基因定点突变(Dpn Ⅰ法)与质粒构建 | 第62-63页 |
| 4.1.6 原核表达与Caspase活性检测 | 第63页 |
| 4.1.7 细胞培养与转染 | 第63页 |
| 4.1.8 SDS-PAGE与Western blot分析 | 第63-64页 |
| 4.1.9 BmICE-2蛋白异位表达与Caspase活性分析 | 第64页 |
| 4.1.10 免疫荧光双染与ER-Tracker(Red) | 第64-65页 |
| 4.1.11 免疫荧光双染与Mito-Tracker(Green) | 第65页 |
| 4.2 结果 | 第65-73页 |
| 4.2.1 BmICE-2蛋白瞬时表达与活化特征 | 第65-69页 |
| 4.2.2 定点突变与序列分析特征 | 第69页 |
| 4.2.3 突变质粒原核表达与Caspase活性分析 | 第69-70页 |
| 4.2.4 突变质粒瞬时表达与Caspase活性分析 | 第70-71页 |
| 4.2.5 在Sf-9细胞中BmICE-2蛋白瞬时表达与活化特征 | 第71-72页 |
| 4.2.6 内源性的BmICE-2蛋白的亚细胞定位特征 | 第72-73页 |
| 4.3 讨论 | 第73-76页 |
| 4.4 本章小结 | 第76-77页 |
| 第五章 BmICE-2基因在家蚕细胞中的功能分析 | 第77-101页 |
| 5.1 材料与方法 | 第77-83页 |
| 5.1.1 试剂仪器 | 第77页 |
| 5.1.2 BmIAP基因克隆与瞬时表达载体的构建 | 第77-78页 |
| 5.1.3 细胞培养与转染 | 第78页 |
| 5.1.4 BmICE-2基因干涉与凋亡诱导 | 第78-79页 |
| 5.1.5 原位免疫荧光 | 第79-80页 |
| 5.1.6 免疫荧光双染与ER-Tracker(Red) | 第80页 |
| 5.1.7 免疫荧光双染与Mito-Tracker(Green) | 第80页 |
| 5.1.8 家蚕细胞线粒体与细胞核蛋白组分提取 | 第80-81页 |
| 5.1.9 RNA提取与qRT-PCR分析 | 第81页 |
| 5.1.10 家蚕抑凋亡相关基因结构域预测及功能分析 | 第81页 |
| 5.1.11 Western blot分析 | 第81-82页 |
| 5.1.12 免疫共沉淀分析 | 第82-83页 |
| 5.2 结果 | 第83-97页 |
| 5.2.1 BmICE-2蛋白瞬时表达诱导家蚕BmN-SWU1细胞凋亡 | 第83-86页 |
| 5.2.2 在BmN-SWU1细胞中凋亡诱导与BmICE-2蛋白活化 | 第86-87页 |
| 5.2.3 在BmE-SWU1细胞中凋亡诱导与BmICE-2蛋白活化 | 第87-88页 |
| 5.2.4 BmIAP瞬时表达抑制BmICE-2激发的细胞凋亡 | 第88-90页 |
| 5.2.5 BmICE-2基因RNA干涉与细胞凋亡 | 第90页 |
| 5.2.6 凋亡诱导与内源性的BmICE-2蛋白的活化 | 第90-95页 |
| 5.2.7 BmICE-2活化与线粒体定位特征 | 第95-97页 |
| 5.3 讨论 | 第97-100页 |
| 5.4 本章小结 | 第100-101页 |
| 第六章 全文总结与结论 | 第101-103页 |
| 论文创新点 | 第103-105页 |
| 参考文献 | 第105-113页 |
| 附录 | 第113-115页 |
| 博士在读期间发表论文及参加课题 | 第115-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
