| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 研究背景 | 第14-34页 |
| ·抑制性消减杂交技术的概念与用途 | 第14页 |
| ·SSH 的基本过程 | 第14-15页 |
| ·SSH 技术操作要点 | 第15页 |
| ·样本的选择 | 第15页 |
| ·杂交时间的控制 | 第15页 |
| ·验证 | 第15页 |
| ·SSH 技术评价 | 第15-17页 |
| ·SSH 的主要优点 | 第15-17页 |
| ·SSH 的缺点 | 第17页 |
| ·SSH 技术的应用 | 第17-33页 |
| ·SSH 在水产动物中的应用 | 第17-31页 |
| ·SSH 技术在其他动物上的研究与应用 | 第31-33页 |
| ·SSH 的研究展望 | 第33页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第33-34页 |
| 第二章 凡纳滨对虾极端体重个体腹部肌肉差异基因的筛选和测序 | 第34-58页 |
| ·材料 | 第34-35页 |
| ·实验动物与菌株 | 第34页 |
| ·试剂盒 | 第34-35页 |
| ·生化试剂 | 第35页 |
| ·设备仪器 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-44页 |
| ·RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·肌肉组织m RNA 的分离纯化 | 第36-37页 |
| ·抑制性消减杂交(SSH)实验 | 第37-42页 |
| ·消减效率分析 | 第42页 |
| ·消减 cDNA 文库的构建、测序分析 | 第42-44页 |
| ·结果 | 第44-49页 |
| ·肌肉组织中总RNA 的提取 | 第44页 |
| ·消减效率检测 | 第44-45页 |
| ·文库质量鉴定 | 第45-46页 |
| ·消减文库的测序和分析 | 第46-49页 |
| ·实时定量验证EST | 第49-56页 |
| ·材料与方法 | 第49-51页 |
| ·结果 | 第51-56页 |
| ·讨论 | 第56页 |
| ·对虾腹部肌肉是激素和肽类的靶器官 | 第56页 |
| ·对虾组织中总RNA 的提取应加大Trizol 的使用比例 | 第56页 |
| ·对虾总RNA 的检测需电泳和分光光度计结合使用 | 第56页 |
| ·小结 | 第56-58页 |
| 第三章 凡纳滨对虾体重调控基因的克隆及生物信息学分析 | 第58-74页 |
| 引言 | 第58页 |
| ·材料与方法 | 第58-61页 |
| ·材料 | 第58页 |
| ·RNA 提取 | 第58页 |
| ·引物设计 | 第58-59页 |
| ·RT-PCR | 第59页 |
| ·PCR 扩增 | 第59-60页 |
| ·PCR 产物的纯化和回收 | 第60页 |
| ·连接 | 第60页 |
| ·菌落PCR 检测和测序 | 第60页 |
| ·阳性克隆cDNA 片断测序及序列分析 | 第60-61页 |
| ·结果与分析 | 第61-70页 |
| ·组织总RNA 的提取和检测 | 第61页 |
| ·β-actin 检测 | 第61页 |
| ·凡纳滨对虾RAS 基因的克隆及生物信息学分析 | 第61-64页 |
| ·凡纳滨对虾P23 基因的克隆及生物信息学分析 | 第64-67页 |
| ·凡纳滨对虾Troponin 基因的克隆及生物信息学分析 | 第67-70页 |
| ·讨论 | 第70-73页 |
| ·生物信息学分析技术 | 第70-72页 |
| ·EST 序列 | 第72页 |
| ·RAS 蛋白 | 第72页 |
| ·Troponin | 第72-73页 |
| ·基因克隆方法 | 第73页 |
| ·小结 | 第73-74页 |
| 第四章 体重调控相关基因的表达分析 | 第74-92页 |
| 引言 | 第74页 |
| ·材料与方法 | 第74页 |
| ·材料 | 第74页 |
| ·样品采集 | 第74页 |
| ·方法 | 第74页 |
| ·结果 | 第74-88页 |
| ·RNA 提取结果 | 第74-75页 |
| ·12 个基因在不同组织中的表达规律 | 第75-81页 |
| ·凡纳滨对虾不同性别各基因在腹部肌肉中的表达量差异研究 | 第81-84页 |
| ·9 个基因腹部肌肉中表达量及体重之间的相关分析及曲线回归 | 第84-88页 |
| ·讨论 | 第88-91页 |
| ·AK 和CHH 基因的表达变化规律相同 | 第88-89页 |
| ·VTG 在雌虾组织中表达，而且在雄虾组织中也表达 | 第89页 |
| ·FABP 在肝胰脏中特异性表达 | 第89-90页 |
| ·CTSL 在肝胰腺中的表达量高于其他组织几十倍 | 第90页 |
| ·PK 参与生物信号在细胞中的传递 | 第90-91页 |
| ·小结 | 第91-92页 |
| 第五章 凡纳滨对虾RAS、P23 和Troponin 基因的原核表达 | 第92-105页 |
| 引言 | 第92页 |
| ·试验材料 | 第92-93页 |
| ·主要仪器 | 第92页 |
| ·主要试剂 | 第92-93页 |
| ·载体及宿主菌 | 第93页 |
| ·实验方法 | 第93-97页 |
| ·引物设计 | 第93页 |
| ·克隆载体的构建 | 第93-94页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第94-95页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第95-96页 |
| ·SDS-PAGE | 第96-97页 |
| ·结果 | 第97-103页 |
| ·克隆载体的构建 | 第97-98页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第98-101页 |
| ·目的蛋白的诱导表达 | 第101-103页 |
| ·讨论 | 第103-104页 |
| ·小结 | 第104-105页 |
| 结论 | 第105-106页 |
| 本研究的创新点 | 第106页 |
| 进一步研究的问题 | 第106-107页 |
| 参考文献 | 第107-118页 |
| 附录 | 第118-119页 |
| 致谢 | 第119-121页 |
| 个人简介 | 第121页 |
