中文摘要 | 第9-15页 |
英文摘要 | 第15-22页 |
第一部分 MMP-1在乳腺癌组织中的表达及其临床意义 | 第23-47页 |
(一)前言 | 第23-24页 |
(二)材料和方法 | 第24-32页 |
1.材料 | 第24-25页 |
1.1 材料和试剂 | 第24-25页 |
1.2 主要仪器 | 第25页 |
2.方法 | 第25-32页 |
2.1 免疫组织化学 | 第25-27页 |
2.2 蛋白印迹实验(Western-blot)检测MMP-1蛋白 | 第27-29页 |
2.3 RT-PCR检测MMP-1mRNA | 第29-31页 |
2.4 统计学处理 | 第31-32页 |
(三)结果 | 第32-38页 |
1.免疫组织化学染色结果 | 第32-35页 |
2.Western-blot结果 | 第35-36页 |
3.RT-PCR结果 | 第36-38页 |
(四)讨论 | 第38-42页 |
(五)结论 | 第42-43页 |
(六)附图 | 第43-44页 |
(七)参考文献 | 第44-47页 |
第二部分 MMP1基因沉默对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞MMP-1蛋白表达及细胞增殖的影响 | 第47-68页 |
(一)前言 | 第47-48页 |
(二)材料和方法 | 第48-55页 |
1.材料 | 第48-50页 |
1.1 细胞系和试剂 | 第48-49页 |
1.2 主要仪器 | 第49-50页 |
2.方法 | 第50-55页 |
2.1 细胞培养及SiRNA转染MCF-7细胞 | 第50-51页 |
2.2 蛋白印迹实验(Western-blot) | 第51-52页 |
2.3 免疫细胞化学法 | 第52-53页 |
2.4 MTT实验 | 第53页 |
2.5 平板克隆形成实验 | 第53-54页 |
2.6 流式细胞检测细胞周期 | 第54页 |
2.7 统计学处理 | 第54-55页 |
(三)结果 | 第55-61页 |
1.测序结果 | 第55-56页 |
2.MMP-1基因干扰效率Western-blot实验检测结果 | 第56页 |
3.MMP-1基因干扰细胞免疫化学结果 | 第56-57页 |
4.MTT实验结果 | 第57-58页 |
5.平板克隆实验结果 | 第58-59页 |
6.流式细胞检测细胞周期的结果 | 第59-61页 |
(四)讨论 | 第61-64页 |
(五)结论 | 第64-65页 |
(六)参考文献 | 第65-68页 |
第三部分 MMP1基因沉默对乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞侵袭能力和蛋白表达的影响 | 第68-83页 |
(一)前言 | 第68-69页 |
(二)材料和方法 | 第69-71页 |
1.材料 | 第69页 |
2.方法 | 第69-71页 |
2.1 细胞侵袭实验 | 第69-70页 |
2.2 细胞迁移实验 | 第70页 |
2.3 细胞划痕愈合实验 | 第70页 |
2.4 检测MMP1基因沉默对AKT/c-myc信号通路的影响 | 第70页 |
2.5 检测MMP1基因沉默对凋亡信号通路蛋白的影响 | 第70-71页 |
(三)结果 | 第71-75页 |
1.细胞侵袭实验结果 | 第71-72页 |
2.细胞迁移实验结果 | 第72-73页 |
3.细胞划痕愈合实验结果 | 第73页 |
4.MMP1基因沉默影响AKT/c-myc信号通路蛋白的结果 | 第73-74页 |
5.MMP1基因沉默影响凋亡信号通路蛋白的结果 | 第74-75页 |
(四)讨论 | 第75-79页 |
(五)结论 | 第79-80页 |
(六)参考文献 | 第80-83页 |
综述 | 第83-100页 |
参考文献 | 第93-100页 |
攻读学位期间发表文章情况 | 第100-101页 |
致谢 | 第101-102页 |