| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第15-31页 |
| 1.1 siRNA介绍 | 第15-16页 |
| 1.1.1 siRNA的发现 | 第15页 |
| 1.1.2 siRNA的作用机制 | 第15-16页 |
| 1.1.3 siRNA面临的问题 | 第16页 |
| 1.2 无机纳米载体用于siRNA负载 | 第16-21页 |
| 1.2.1 siRNA-金纳米颗粒 | 第17页 |
| 1.2.2 siRNA-磁性纳米颗粒 | 第17-18页 |
| 1.2.3 siRNA-介孔硅纳米颗粒 | 第18页 |
| 1.2.4 siRNA-量子点(QD) | 第18-19页 |
| 1.2.5 siRNA-LDH纳米材料 | 第19页 |
| 1.2.6 siRNA-硒纳米颗粒 | 第19-20页 |
| 1.2.7 siRNA-碳纳米颗粒 | 第20页 |
| 1.2.8 siRNA-CaP颗粒 | 第20-21页 |
| 1.3 脂质体载体用于负载siRNA | 第21-22页 |
| 1.4 聚合物载体用于负载siRNA | 第22-23页 |
| 1.5 siRNA-载体应用中存在的问题 | 第23-26页 |
| 1.5.1 给药途径 | 第23-24页 |
| 1.5.2 体内循环时间 | 第24页 |
| 1.5.3 肾脏清除 | 第24页 |
| 1.5.4 组织外渗 | 第24-25页 |
| 1.5.5 靶向性和细胞内在化 | 第25页 |
| 1.5.6 核内体逃逸 | 第25-26页 |
| 1.6 siRNA的应用 | 第26-29页 |
| 1.6.1 siRNA在口腔医学领域的应用 | 第26页 |
| 1.6.2 siRNA在肺部疾病领域的应用 | 第26-27页 |
| 1.6.3 siRNA在骨科疾病领域的应用 | 第27-28页 |
| (1)siRNA在骨关节炎中的应用 | 第27页 |
| (2)siRNA在骨肉瘤中的应用 | 第27-28页 |
| (3)siRNA在骨质疏松症的应用 | 第28页 |
| 1.6.4 siRNA在肝纤维疾病领域的应用 | 第28-29页 |
| 1.6.5 siRNA在中枢神经系统疾病领域的应用 | 第29页 |
| 1.6.6 siRNA在抗流感病毒感染领域的应用 | 第29页 |
| 1.7 论文选题及意义 | 第29-31页 |
| 第2章 介孔聚合物纳米球的合成及改性 | 第31-42页 |
| 2.1 引言 | 第31-32页 |
| 2.2 实验试剂及设备 | 第32页 |
| 2.2.1 实验试剂 | 第32页 |
| 2.2.2 实验仪器 | 第32页 |
| 2.3 介孔聚合物纳米球的合成及改性 | 第32-34页 |
| 2.3.1 介孔聚合物纳米球的合成 | 第32-33页 |
| 2.3.2 介孔聚合物纳米球表面负电性化 | 第33页 |
| 2.3.3 介孔聚合物纳米球表面氨基功能化 | 第33-34页 |
| 2.4 材料表征及分析 | 第34-36页 |
| 2.4.1 扫描电子显微镜(SEM)分析 | 第34页 |
| 2.4.2 透射电子显微镜(TEM)分析 | 第34页 |
| 2.4.3 纳米球孔径(BET)分析 | 第34页 |
| 2.4.4 傅里叶变换红外光谱(FTIR) | 第34-35页 |
| 2.4.5 粒径分布和Zeta电位分析 | 第35页 |
| 2.4.6 X射线光电子能谱(XPS)分析 | 第35页 |
| 2.4.7 差示扫描量热法(DSC)分析 | 第35页 |
| 2.4.8 降解实验分析 | 第35-36页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第36-41页 |
| 2.5.1 SEM结果分析 | 第36-37页 |
| 2.5.2 TEM及BET结果分析 | 第37-38页 |
| 2.5.3 表面改性结果分析 | 第38-40页 |
| 2.5.4 粒径分布和Zeta电位实验结果 | 第40页 |
| 2.5.5 降解实验结果分析 | 第40-41页 |
| 2.6 本章小结 | 第41-42页 |
| 第3章 介孔聚合物纳米球负载基因及释放研究 | 第42-49页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 实验试剂及设备 | 第42-43页 |
| 3.2.1 实验试剂 | 第42-43页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第43页 |
| 3.3 介孔聚合物纳米球负载oligo-DNA研究 | 第43-44页 |
| 3.3.1 oligo-DNA标准曲线绘制 | 第44页 |
| 3.3.2 介孔聚合物纳米球负载oligo-DNA | 第44页 |
| 3.3.3 阳离子表面功能化MPNs负载oligo-DNA | 第44页 |
| 3.4 oligo-DNA释放 | 第44-45页 |
| 3.4.1 不同pH下的缓释实验 | 第44-45页 |
| 3.4.2 PEI包覆后的缓释情况 | 第45页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第45-48页 |
| 3.5.1 oligo-DNA标准曲线结果 | 第45页 |
| 3.5.2 介孔聚合物纳米球负载实验结果 | 第45-47页 |
| 3.5.3 释放实验结果 | 第47-48页 |
| 3.6 本章小结 | 第48-49页 |
| 第4章 介孔聚合物纳米球负载siRNA的细胞学研究 | 第49-68页 |
| 4.1 引言 | 第49页 |
| 4.2 实验试剂及仪器 | 第49-51页 |
| 4.2.1 实验试剂 | 第49-50页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第50-51页 |
| 4.3 生物相容性 | 第51-52页 |
| 4.3.1 细胞培养实验 | 第51页 |
| 4.3.2 细胞增殖实验 | 第51页 |
| 4.3.3 细胞荧光成像 | 第51-52页 |
| 4.3.4 HE染色和CD31细胞免疫荧光染色 | 第52页 |
| 4.4 细胞内吞实验 | 第52-53页 |
| 4.4.1 细胞培养及实验材料制备 | 第52页 |
| 4.4.2 细胞内吞荧光显微镜分析 | 第52-53页 |
| 4.4.3 细胞内吞流式细胞术分析 | 第53页 |
| 4.5 细胞凋亡实验 | 第53页 |
| 4.5.1 细胞凋亡荧光显微镜分析 | 第53页 |
| 4.5.2 细胞凋亡流式细胞术分析 | 第53页 |
| 4.6 RT-PCR实验 | 第53-55页 |
| 4.6.1 样本总RNA的提取 | 第54页 |
| 4.6.2 基因组DNA的除去反应 | 第54页 |
| 4.6.3 逆转录反应 | 第54-55页 |
| 4.6.4 实时荧光定量PCR反应 | 第55页 |
| 4.7 Westernblot实验 | 第55-56页 |
| 4.8 结果与讨论 | 第56-67页 |
| 4.8.1 生物相容性实验结果 | 第56-59页 |
| 4.8.2 细胞内吞实验结果 | 第59-62页 |
| 4.8.2.1 细胞内吞荧光显微镜实验结果 | 第59-61页 |
| 4.8.2.2 细胞内吞流式细胞术实验结果 | 第61-62页 |
| 4.8.3 细胞凋亡实验结果 | 第62-65页 |
| 4.8.4 PCR和WB实验结果 | 第65-67页 |
| 4.9 本章小结 | 第67-68页 |
| 第5章 介孔聚合物纳米球负载siRNA体内抑制肿瘤研究 | 第68-78页 |
| 5.1 引言 | 第68页 |
| 5.2 实验材料及仪器 | 第68-69页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第68-69页 |
| 5.2.2 实验仪器 | 第69页 |
| 5.3 实验方法 | 第69-71页 |
| 5.3.1 裸鼠适应性观察 | 第69-70页 |
| 5.3.2 裸鼠成瘤实验 | 第70页 |
| 5.3.3 裸鼠抑制肿瘤实验 | 第70页 |
| 5.3.4 裸鼠组织病理学检测 | 第70-71页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第71-77页 |
| 5.4.1 裸鼠适应性观察 | 第71页 |
| 5.4.2 裸鼠成瘤实验结果 | 第71页 |
| 5.4.3 裸鼠抑制肿瘤实验结果 | 第71-73页 |
| 5.4.3.1 肿瘤体积变化 | 第71-72页 |
| 5.4.3.2 裸鼠体重变化 | 第72-73页 |
| 5.4.3.3 裸鼠生存曲线 | 第73页 |
| 5.4.4 裸鼠组织病理学分析结果 | 第73-77页 |
| 5.5 本章小结 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-80页 |
| 展望 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-93页 |
| 简写附录 | 第93-94页 |
| 发表学术论文情况 | 第94页 |
