中文摘要 | 第9-11页 |
Abstract | 第11-12页 |
1.引言 | 第13-26页 |
1.1 牛结核病的流行及危害 | 第13-14页 |
1.2 牛结核病的临床症状和病变特征 | 第14-16页 |
1.3 牛结核病病原学特征 | 第16-18页 |
1.3.1 细菌分类 | 第16页 |
1.3.2 细菌学特征 | 第16-17页 |
1.3.3 基因组特征 | 第17-18页 |
1.4 牛结核病诊断技术研究进展 | 第18-24页 |
1.4.1 细菌学检测方法 | 第18-19页 |
1.4.2 免疫学方法 | 第19-21页 |
1.4.3 分子生物学检测方法 | 第21-22页 |
1.4.4 病理组织学观察 | 第22-24页 |
1.5 共同黏膜免疫系统研究进展 | 第24页 |
1.6 研究背景及其目的和意义 | 第24-26页 |
2.材料和方法 | 第26-38页 |
2.1 材料 | 第26-28页 |
2.1.1 试剂 | 第26页 |
2.1.2 仪器和器材 | 第26页 |
2.1.3 试剂配制 | 第26-28页 |
2.2 方法 | 第28-38页 |
2.2.1 检疫阳性牛结核病组织分布状况调查方法 | 第28-32页 |
2.2.1.1 样品收集 | 第28页 |
2.2.1.2 HE染色的步骤 | 第28-29页 |
2.2.1.3 抗酸染色的步骤 | 第29-30页 |
2.2.1.4 免疫组化的步骤 | 第30-32页 |
2.2.1.5 结果统计 | 第32页 |
2.2.2 建立的荧光定量PCR方法及其奶样和粪便的检测 | 第32-35页 |
2.2.2.1 材料 | 第32页 |
2.2.2.2 引物设计 | 第32页 |
2.2.2.3 样品的采集 | 第32页 |
2.2.2.4 标准毒株H37Rv、BCGDNA以及临床样品的提取 | 第32-33页 |
2.2.2.5 获取目的基因 | 第33页 |
2.2.2.6 胶回收 | 第33页 |
2.2.2.7 转化克隆 | 第33-34页 |
2.2.2.8 提取重组质粒DNA | 第34页 |
2.2.2.9 标准曲线的建立 | 第34-35页 |
2.2.2.10 荧光定量PCR方法性能评价 | 第35页 |
2.2.2.10 荧光定量PCR方法的应用 | 第35页 |
2.2.3 细菌鉴定及致病性试验 | 第35-38页 |
2.2.3.1 试剂 | 第35页 |
2.2.3.2 分离细菌DNA提取 | 第35页 |
2.2.3.3 引物 | 第35-36页 |
2.2.3.4 细菌鉴定的方法 | 第36-37页 |
2.2.3.5 测序 | 第37页 |
2.2.3.6 致病性试验 | 第37-38页 |
3.结果与分析 | 第38-47页 |
3.1 结核阳性牛结核病的病理学观察 | 第38-41页 |
3.1.1 剖检病变 | 第38-39页 |
3.1.2 HE染色和抗酸染色结果 | 第39页 |
3.1.3 免疫组化结果 | 第39-40页 |
3.1.4 结果分析 | 第40-41页 |
3.2 荧光定量PCR检测奶样和粪便结果 | 第41-42页 |
3.2.1 结核杆菌复合群和牛分枝杆菌荧光定量PCR标准曲线的建立 | 第41页 |
3.2.2 敏感性试验结果 | 第41页 |
3.2.3 特异性试验结果 | 第41页 |
3.2.4 样品检测结果 | 第41-42页 |
3.2.5 结果分析 | 第42页 |
3.3 细菌分离鉴定和致病性试验结果 | 第42-47页 |
3.3.1 细菌分离鉴定结果 | 第42页 |
3.3.2 核酸遗传进化树 | 第42-44页 |
3.3.3 致病性试验结果 | 第44-47页 |
3.3.3.1 HE染色结果 | 第44页 |
3.3.3.2 抗酸染色结果 | 第44-46页 |
3.3.3.3 结果分析 | 第46-47页 |
4.讨论 | 第47-51页 |
5.结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-59页 |
致谢 | 第59-61页 |
硕士期间发表论文情况 | 第61页 |