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血清4型禽腺病毒分离鉴定及间接ELISA检测方法的建立

中文摘要第9-10页
Abstract第10-11页
1 前言第12-26页
    1.1 病原学第12-18页
        1.1.1 禽腺病毒分类第13页
        1.1.2 病毒形态和理化特性第13-14页
        1.1.3 病毒的培养特性第14-15页
        1.1.4 禽腺病毒基因组结构和功能蛋白的特性第15页
        1.1.5 结构蛋白第15-16页
        1.1.6 非结构蛋白第16-17页
        1.1.7 腺病毒的感染及复制第17页
        1.1.8 肿瘤发生第17-18页
        1.1.9 腺病毒载体第18页
    1.2 FAdV-4流行病学第18-19页
        1.2.1 易感动物第18-19页
        1.2.2 传播途径第19页
    1.3 临诊症状及病理变化第19-20页
        1.3.1 临诊症状第19页
        1.3.2 病理变化第19-20页
    1.4 FAdV-4的诊断第20-24页
        1.4.1 病毒分离第20页
        1.4.2 血清学诊断第20-22页
        1.4.3 分子生物学诊断方法第22-24页
    1.5 FAd V-4 的防制第24-25页
    1.6 研究的目的和意义第25-26页
2 材料与方法第26-42页
    2.1 材料第26-29页
        2.1.1 病毒、载体、菌株、血清第26页
        2.1.2 主要试剂及化学药品第26页
        2.1.3 试验所用溶液的配制第26-29页
        2.1.4 主要仪器第29页
    2.2 方法第29-42页
        2.2.1 FAdV-4分离鉴定及序列分析第29-34页
        2.2.2 FAdV-4Hexon蛋白部分基因的原核表达和纯化第34-40页
        2.2.3 检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法建立第40-42页
3 结果与分析第42-53页
    3.1 FAdV-4分离鉴定及序列分析第42-46页
        3.1.1 病毒分离和鸡胚病变结果第42页
        3.1.2 琼脂扩散试验结果第42页
        3.1.3 PCR结果及Hexon基因的进化树分析结果第42-44页
        3.1.4 FAdV-4SDTW1-16毒株鸡胚攻毒结果第44页
        3.1.5 组织切片镜检及电镜观察结果第44-45页
        3.1.6 动物回归试验结果第45-46页
    3.2 Hexon蛋白部分基因的原核表达和纯化结果第46-49页
        3.2.1 重组表达载体的双酶切结果第46-47页
        3.2.2 蛋白诱导表达结果第47页
        3.2.3 蛋白的可溶性检测和Weestern-blot分析结果第47-48页
        3.2.4 重组蛋白的纯化结果第48-49页
    3.3 间接ELISA方法检测FAdV-4抗体的结果第49-53页
        3.3.1 抗原最佳包被浓度和血清最佳稀释度的确定第49页
        3.3.2 血清、酶标二抗最佳孵育时间第49-50页
        3.3.3 酶标二抗最佳工作浓度的确定结果第50页
        3.3.4 阴性阳性临界值确定结果第50-51页
        3.3.5 特异性试验结果第51页
        3.3.6 敏感性试验结果第51页
        3.3.7 间接ELISA方法的初步应用以及与AGPT的比较第51-53页
4 讨论第53-55页
    4.1 FAdV-4分离鉴定及序列分析第53页
    4.2 FAdV-4Hexon蛋白部分基因的原核表达和纯化第53-54页
    4.3 检测FAdV-4抗体的间接ELISA方法的确立第54-55页
5 结论第55-56页
参考文献第56-62页
致谢第62页

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