| 摘要 | 第8-9页 |
| ABSTRACT | 第9页 |
| 缩略语表(ABBREVIATION) | 第10-11页 |
| 第一部分:文献综述 | 第11-24页 |
| 1 斑马鱼作为模式动物在生命科学研究中的优点 | 第11-14页 |
| 1.1 斑马鱼成鱼个体小,便于实验室大规模饲养 | 第12-13页 |
| 1.2 斑马鱼幼鱼发育快速、性成熟早、繁殖力强 | 第13页 |
| 1.3 斑马鱼卵体外受精、胚胎透明,易于试验操作和观察 | 第13页 |
| 1.4 较为完善的胚胎和遗传学实验操作技术 | 第13页 |
| 1.5 斑马鱼基因组序列的注解完成 | 第13-14页 |
| 1.6 斑马鱼品系较丰富 | 第14页 |
| 2 斑马鱼早期胚胎发育过程及其调控分子机制 | 第14-17页 |
| 2.1 受精卵期(0-3/4 hpf) | 第14页 |
| 2.2 分裂期(3/4-2(1/4) hpf) | 第14-15页 |
| 2.3 囊胚期(2(1/4)-5(1/4) hpf) | 第15页 |
| 2.4 原肠胚期(5(1/4)-10 hpf) | 第15-16页 |
| 2.5 体节期(10-24 hpf) | 第16页 |
| 2.6 咽裂期(24-48 hpf) | 第16-17页 |
| 2.7 孵化期(48-72 hpf) | 第17页 |
| 3 斑马鱼在生命科学研究中的应用 | 第17-20页 |
| 3.1 斑马鱼胚胎发育研究 | 第17-18页 |
| 3.2 斑马鱼在遗传与发育过程中基因功能研究 | 第18-19页 |
| 3.3 斑马鱼在神经科学中行为学和记忆研究 | 第19页 |
| 3.4 斑马鱼在药物筛选上的应用 | 第19-20页 |
| 3.5 斑马鱼在人类疾病研究中的应用 | 第20页 |
| 4 哺乳动物锌离子转运蛋白研究进展 | 第20-22页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二部分 ZIP7基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的时空表达 | 第24-43页 |
| 1 前言 | 第24-25页 |
| 2 Real-time PCR分析ZIP7 mRNA在斑马鱼胚胎中的表达 | 第25-28页 |
| 2.1 材料与方法 | 第25-28页 |
| 2.1.1 材料 | 第25页 |
| 2.1.2 试验用鱼 | 第25页 |
| 2.1.3 斑马鱼总RNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.1.4 RT-PCR反应 | 第26-27页 |
| 2.1.5 Real-time反应 | 第27-28页 |
| 2.2 结果与分析 | 第28页 |
| 2.2.1 Real-time PCR分析ZIP7 mRNA在早期胚胎发育过程中的表达 | 第28页 |
| 3 整体原位杂交分析ZIP7 mRNA在胚胎早期发育中的表达定位 | 第28-43页 |
| 3.1 材料与方法 | 第28-39页 |
| 3.1.1 质粒、菌株、酶、试剂(盒) | 第28-29页 |
| 3.1.2 试验用鱼及胚胎处理 | 第29页 |
| 3.1.3 质粒构建 | 第29-30页 |
| 3.1.4 基因克隆 | 第30-34页 |
| 3.1.5 整体原位杂交 | 第34-39页 |
| 3.2 结果与分析 | 第39-41页 |
| 3.2.1 ZIP7探针制备合成 | 第39-41页 |
| 3.2.2 ZIP7 mRNA在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达定位 | 第41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-43页 |
| 第三部分:ZIP7基因对斑马鱼早期胚胎眼睛发育的影响 | 第43-58页 |
| 1 前言 | 第43页 |
| 2 材料和方法 | 第43-46页 |
| 2.1 反义寡核苷酸(Morpholinos,MO)的设计合成及使用 | 第43-44页 |
| 2.2 试验用鱼 | 第44页 |
| 2.3 ZIP7 mRNA表达质粒构建 | 第44页 |
| 2.4 ZIP7 mRNA体外转录 | 第44-45页 |
| 2.5 显微注射 | 第45页 |
| 2.6 上海光源同步辐射X射线荧光技术 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-54页 |
| 3.1 ZIP7 mRNA表达质粒构建 | 第46-48页 |
| 3.2 胚胎ZIP7基因沉默的表型观察 | 第48-50页 |
| 3.3 ZIP7 mRNA对胚胎ZIP7基因沉默畸形表型的营救 | 第50页 |
| 3.4 锌离子对胚胎ZIP7基因沉默畸形表型的营救 | 第50-53页 |
| 3.5 BL15U硬X射线扫描ZIP7基因沉默胚胎体内锌离子分布 | 第53-54页 |
| 4 讨论 | 第54-58页 |
| 4.1 显微注射MO导致基因基因沉默对胚胎发育的影响 | 第54-56页 |
| 4.2 不同方法对ZIP7基因沉默表型的营救 | 第56-57页 |
| 4.3 光源同步辐射X射线荧光分析技术 | 第57-58页 |
| 第四部分 小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 附录 | 第69页 |
