| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 结核病简介 | 第12-16页 |
| 1.1.1 结核病病原学 | 第12-13页 |
| 1.1.2 结核病流行病学 | 第13-14页 |
| 1.1.3 结核病的防控 | 第14-16页 |
| 1.2 细菌表面展示系统的发展与应用 | 第16-18页 |
| 1.3 冰核蛋白展示系统 | 第18页 |
| 1.4 PepA, PPE18, EsxH | 第18-21页 |
| 1.5 研究目的和意义 | 第21-22页 |
| 第二章 结核分枝杆菌PepA、PPE18和Esx H蛋白表面展示疫苗载体的构建 | 第22-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-24页 |
| 2.1.1 载体和菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第22页 |
| 2.1.4 主要溶液及培养基 | 第22-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-29页 |
| 2.2.1 引物设计与基因PCR扩增 | 第24-25页 |
| 2.2.2 重组质粒的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.3 重组菌的构建 | 第26页 |
| 2.2.4 激光共聚焦检测 | 第26-27页 |
| 2.2.5 目的蛋白的SDS-PAGE、免疫印迹检测 | 第27页 |
| 2.2.6 目的蛋白超速离心法分离组分 | 第27页 |
| 2.2.7 目的蛋白蛋白酶K处理 | 第27-28页 |
| 2.2.8 目的蛋白激光共聚焦观察 | 第28-29页 |
| 2.3 实验结果 | 第29-36页 |
| 2.3.1 基因PCR扩增结果 | 第29-30页 |
| 2.3.2 重组质粒鉴定结果 | 第30页 |
| 2.3.3 EGFP激光共聚焦检测结果 | 第30-31页 |
| 2.3.4 目的蛋白免疫印迹检测结果 | 第31-32页 |
| 2.3.5 目的蛋白超速离心法分离组分结果 | 第32-34页 |
| 2.3.6 目的蛋白的蛋白酶K消化结果 | 第34-35页 |
| 2.3.7 目的蛋白激光共聚焦观察结果 | 第35-36页 |
| 2.4 讨论 | 第36-37页 |
| 第三章 结核分枝杆菌PepA, PPE18和Esx H蛋白表面展示疫苗免疫效果评价 | 第37-48页 |
| 3.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第37页 |
| 3.1.2 试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 3.1.4 主要溶液 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 小鼠免疫 | 第38页 |
| 3.2.2 多肽包被ELISA法检测抗体效价 | 第38-39页 |
| 3.2.3 细胞壁组分包被ELISA法检测抗体效价 | 第39页 |
| 3.2.4 小鼠脾脏淋巴细胞的分离 | 第39页 |
| 3.2.5 流式细胞术检测CD4+T和CD8+T细胞 | 第39页 |
| 3.2.6 小鼠外周血细胞因子的检测 | 第39-40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-45页 |
| 3.3.1 多肽包被ELISA法检测抗体水平 | 第40-41页 |
| 3.3.2 细胞壁组分包被ELISA法检测抗体水平 | 第41-42页 |
| 3.3.3 流式细胞术检测CD4+T和CD8+T细胞结果 | 第42-43页 |
| 3.3.4 小鼠外周血细胞因子的检测结果 | 第43-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
