| 中文摘要 | 第3-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 符号说明 | 第14-18页 |
| 第一部分 文献综述 | 第18-53页 |
| 第一章 破骨细胞融合及相关调控机理 | 第18-27页 |
| 1 破骨细胞的融合 | 第18-19页 |
| 2 破骨细胞融合的生物学意义 | 第19-21页 |
| 3 调控破骨细胞融合的关键因子 | 第21-27页 |
| 3.1 RANKL依赖性融合相关因子 | 第21-23页 |
| 3.2 RANKL非依赖性融合相关因子 | 第23-25页 |
| 3.3 膜结构域和因子间的相互作用 | 第25-27页 |
| 第二章 OPG与骨骼疾病 | 第27-36页 |
| 1 OPG/RANKL/RANK系统 | 第29-31页 |
| 1.1 OPG及RANKL的发现 | 第29页 |
| 1.2 OPG及RANK/RANKL的功能 | 第29-30页 |
| 1.3 OPG/RANKL/RANK系统与骨骼疾病 | 第30-31页 |
| 2 破骨细胞相关疾病 | 第31-34页 |
| 2.1 骨质疏松 | 第31-32页 |
| 2.2 关节炎 | 第32-33页 |
| 2.3 骨髓瘤骨病 | 第33-34页 |
| 2.4 Paget病 | 第34页 |
| 3 OPG在临床诊断中的应用 | 第34-35页 |
| 4 OPG在临床治疗中的应用 | 第35-36页 |
| 5 本研究的目的意义 | 第36页 |
| 参考文献 | 第36-53页 |
| 第二部分 试验研究 | 第53-115页 |
| 第一章 OPG对不同分化阶段破骨细胞的形成及功能的影响 | 第53-69页 |
| 1 材料和方法 | 第53-57页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第53-54页 |
| 1.2 主要仪器 | 第54页 |
| 1.3 主要化学试剂 | 第54页 |
| 1.4 细胞培养及处理 | 第54-55页 |
| 1.5 破骨细胞TRAP染色 | 第55页 |
| 1.6 xCelligence系统检测细胞生长曲线变化 | 第55页 |
| 1.7 免疫荧光检测细胞黏附结构 | 第55-56页 |
| 1.8 免疫印迹法检测破骨细胞标志性蛋白的表达 | 第56页 |
| 1.9 数据分析 | 第56-57页 |
| 2 结果 | 第57-63页 |
| 2.1 OPG对不同分化阶段破骨细胞形成的影响 | 第57-60页 |
| 2.2 OPG对不同分化阶段的破骨细胞黏附结构的影响 | 第60-62页 |
| 2.3 OPG对不同分化阶段破骨细胞特征性蛋白表达的影响 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 第二章 OPG对破骨细胞黏附结构的影响及调控机理 | 第69-85页 |
| 1 材料和方法 | 第69-71页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第69-70页 |
| 1.2 主要仪器 | 第70页 |
| 1.3 主要化学试剂 | 第70页 |
| 1.4 细胞培养及处理 | 第70页 |
| 1.5 xCelligence系统检测生长曲线变化 | 第70页 |
| 1.6 破骨细胞TRAP染色及计数 | 第70页 |
| 1.7 扫描电镜观察破骨细胞黏附结构 | 第70-71页 |
| 1.8 免疫荧光及激光共聚焦观察黏附相关蛋白的分布 | 第71页 |
| 1.9 免疫印迹法检测黏附相关蛋白的表达 | 第71页 |
| 1.10 数据分析 | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-79页 |
| 2.1 OPG对破骨细胞分化的影响 | 第71-72页 |
| 2.2 OPG对破骨细胞黏附结构的影响 | 第72-74页 |
| 2.3 OPG对Pyk2和Src酪氨酸磷酸化的影响 | 第74-76页 |
| 2.4 OPG对破骨细胞Pyk2和Src分布的影响 | 第76-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-85页 |
| 第三章 OPG调控破骨细胞黏附结构的Ca2+、ERK和p38 MAPK信号通路 | 第85-101页 |
| 1 材料和方法 | 第85-87页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第85-86页 |
| 1.2 主要仪器 | 第86页 |
| 1.3 主要化学试剂 | 第86页 |
| 1.4 细胞培养及处理 | 第86页 |
| 1.5 xCelligence系统检测细胞生长曲线变化 | 第86页 |
| 1.6 破骨细胞TRAP染色及计数 | 第86页 |
| 1.7 流式细胞术检测细胞内游离钙离子浓度[Ca~(2+)]_i | 第86-87页 |
| 1.8 扫描电镜观察破骨细胞形态变化 | 第87页 |
| 1.9 免疫印迹法检测黏附相关蛋白的表达 | 第87页 |
| 1.10 数据分析 | 第87页 |
| 2 结果 | 第87-95页 |
| 2.1 Ca~(2+)、Erk和p38 MAPK抑制剂对OPG调控破骨细胞分化的影响 | 第87-89页 |
| 2.2 Ca~(2+)、Erk和p38 MAPK抑制剂对OPG调控破骨细胞黏附结构的影响 | 第89-92页 |
| 2.3 Ca~(2+)、Erk和p38 MAPK抑制剂对OPG调控[Ca~(2+)]_i的影响 | 第92-93页 |
| 2.4 Ca~(2+)、Erk和p38 MAPK抑制剂对OPG介导破骨细胞Pyk2和Src磷酸化的影响 | 第93-95页 |
| 3 讨论 | 第95-97页 |
| 参考文献 | 第97-101页 |
| 第四章 OPG抑制破骨细胞及其前体融合的调控机理 | 第101-115页 |
| 1 材料和方法 | 第101-103页 |
| 1.1 实验细胞株 | 第101-102页 |
| 1.2 主要仪器 | 第102页 |
| 1.3 主要化学试剂 | 第102页 |
| 1.4 细胞培养及处理 | 第102页 |
| 1.5 xCelligence系统检测生长曲线变化 | 第102页 |
| 1.6 破骨细胞TRAP染色及计数 | 第102页 |
| 1.7 免疫荧光及激光共聚焦检测融合相关因子的分布 | 第102-103页 |
| 1.8 免疫印迹法检测融合相关因子的表达 | 第103页 |
| 1.9 数据分析 | 第103页 |
| 2 结果 | 第103-110页 |
| 2.1 OPG对破骨细胞分化融合的影响 | 第103-105页 |
| 2.2 OPG对破骨细胞及其前体融合相关蛋白表达的影响 | 第105-106页 |
| 2.3 OPG对融合相关因子在细胞中分布的影响 | 第106-109页 |
| 2.4 ATP对OPG调控破骨细胞及其前体融合相关因子表达的影响 | 第109-110页 |
| 3 讨论 | 第110-112页 |
| 参考文献 | 第112-115页 |
| 全文结论 | 第115-116页 |
| 致谢 | 第116-117页 |
| 攻读博士学位期间发表论文 | 第117-118页 |
