体细胞MCL-1基因突变对胶质母细胞瘤发病机理的影响及其机制的研究
| 中文摘要 | 第9-13页 |
| 英文摘要 | 第13-16页 |
| 第一部分 | 第17-43页 |
| 前言 | 第17-19页 |
| 材料和方法 | 第19-30页 |
| 1. 材料 | 第19-22页 |
| 1.1 组织样本 | 第19-20页 |
| 1.2 主要实验仪器 | 第20页 |
| 1.3 主要化学试剂 | 第20-21页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第21-22页 |
| 2. 实验方法 | 第22-30页 |
| 2.1 Sanger直接测序 | 第22-24页 |
| 2.2 RT-PCR反应实验操作方法 | 第24-26页 |
| 2.3 免疫组化实验操作方法 | 第26-28页 |
| 2.4 Western-blot实验操作方法 | 第28-29页 |
| 2.5 统计分析 | 第29-30页 |
| 结果 | 第30-36页 |
| 1. 突变位置检测结果 | 第30-33页 |
| 2. 免疫组化检测结果 | 第33-34页 |
| 3. Western-blot结果 | 第34-35页 |
| 4. qPCR检测结果 | 第35-36页 |
| 讨论 | 第36-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-43页 |
| 第二部分 | 第43-71页 |
| 前言 | 第43-46页 |
| 材料和方法 | 第46-57页 |
| 1. 材料 | 第46-49页 |
| 1.1 细胞系及载体 | 第46页 |
| 1.2 主要试剂 | 第46-47页 |
| 1.3 主要仪器 | 第47-48页 |
| 1.4 主要溶液配制 | 第48-49页 |
| 2. 实验方法 | 第49-57页 |
| 2.1 细胞系和细胞培养 | 第49页 |
| 2.2 Mcl-1的克隆和诱变 | 第49页 |
| 2.3 U251细胞瞬时转染实验 | 第49-50页 |
| 2.4 转染后细胞收集及鉴定 | 第50-54页 |
| 2.5 细胞活力和增殖分析 | 第54页 |
| 2.6 细胞凋亡分析 | 第54页 |
| 2.7 半衰期的检测 | 第54页 |
| 2.8 免疫沉淀反应 | 第54-55页 |
| 2.9 蛋白表达量分析 | 第55页 |
| 2.10 细胞侵袭能力实验 | 第55-56页 |
| 2.11 裸鼠饲养及体内成瘤实验 | 第56页 |
| 2.12 统计分析 | 第56-57页 |
| 结果 | 第57-62页 |
| 1. 转染结果验证 | 第57页 |
| 2. 细胞增殖和抑制实验 | 第57-59页 |
| 3. 细胞侵袭实验 | 第59页 |
| 4. 对磷酸化蛋白影响的实验 | 第59-60页 |
| 5. 半衰期考察实验 | 第60页 |
| 6. 裸鼠体内成瘤实验 | 第60-62页 |
| 讨论 | 第62-66页 |
| 结论 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-71页 |
| 文献综述 | 第71-86页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 附录1 英文缩写 | 第86-87页 |
| 附录2 攻读学位期间发表论文情况 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
