摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-22页 |
1.1 水稻叶片发育过程及结构特点 | 第14-18页 |
1.1.1 植物叶片生长发育过程 | 第14-15页 |
1.1.2 水稻叶片的构造与特点 | 第15-18页 |
1.2 水稻卷叶性状与高产育种的关系 | 第18-19页 |
1.2.1 水稻卷叶性状的分类及生理生态效应 | 第18页 |
1.2.2 水稻卷叶性状在育种中的作用 | 第18-19页 |
1.3 水稻卷叶性状分子机制的研究进展 | 第19页 |
1.4 水稻泡状细胞与卷叶性状的关系 | 第19-20页 |
1.4.1 水稻泡状细胞发育过程 | 第19-20页 |
1.4.2 泡状细胞变化影响叶片形态 | 第20页 |
1.5 研究目的及意义 | 第20-22页 |
第二章 卷叶突变体ZW235的表型观察与叶片光合参数的测定 | 第22-29页 |
2.1 材料与方法 | 第22-23页 |
2.1.1 实验材料的来源 | 第22页 |
2.1.2 水稻的种植与观察 | 第22页 |
2.1.3 农艺性状的统计 | 第22页 |
2.1.4 叶片叶绿素含量及光合参数的测定 | 第22页 |
2.1.5 叶片显微结构观察 | 第22-23页 |
2.2 结果与分析 | 第23-28页 |
2.2.1 突变体zw235与野生型的形态学特征比较 | 第23-24页 |
2.2.2 突变体zw235与野生型农艺性状比较 | 第24-25页 |
2.2.3 突变体zw235与野生型叶片叶绿素含量及光合参数的测定分析 | 第25-26页 |
2.2.4 突变体zw235与野生型叶片显微结构的对比观察 | 第26-28页 |
2.3 讨论 | 第28-29页 |
第三章 水稻卷叶突变体ZW235的遗传分析与基因克隆 | 第29-36页 |
3.1 材料与方法 | 第29-32页 |
3.1.1 植物材料 | 第29页 |
3.1.2 突变体zw235的遗传分析 | 第29页 |
3.1.3 F2定位群体构建 | 第29页 |
3.1.4 水稻叶片基因组DNA的提取 | 第29-30页 |
3.1.5 PCR反应体系 | 第30页 |
3.1.6 PCR扩增产物电泳检测 | 第30-32页 |
3.1.7 分子标记设计 | 第32页 |
3.1.8 突变基因的定位 | 第32页 |
3.1.9 遗传作图 | 第32页 |
3.2 结果与分析 | 第32-35页 |
3.2.1 突变体zw235的遗传分析 | 第32-33页 |
3.2.2 突变体zw235的基因定位 | 第33-34页 |
3.2.3 突变体zw235突变位点的测定与分析 | 第34-35页 |
3.3 讨论 | 第35-36页 |
第四章 基因ZW235的互补验证与CRISPR-CAS9验证 | 第36-45页 |
4.1 材料与方法 | 第36-41页 |
4.1.1 实验所需材料 | 第36页 |
4.1.2 水稻总RNA的提取 | 第36-37页 |
4.1.3 RNA反转录 | 第37-38页 |
4.1.4 ZW235基因互补载体与CRISPR-Cas9载体的构建 | 第38-40页 |
4.1.5 农杆菌感受态的制备与转化 | 第40-41页 |
4.1.6 农杆菌侵染转化水稻愈伤组织 | 第41页 |
4.1.7 表型观察及鉴定 | 第41页 |
4.2 结果与分析 | 第41-44页 |
4.2.1 PCR检测转基因阳性植株 | 第41-42页 |
4.2.2 转基因阳性植株形态学特征分析 | 第42-44页 |
4.3 讨论 | 第44-45页 |
第五章 基因ZW235的表达蛋白亚细胞定位 | 第45-52页 |
5.1 材料与方法 | 第45-49页 |
5.1.1 实验材料的获得 | 第45页 |
5.1.2 实验所需试剂与仪器 | 第45-47页 |
5.1.3 ZW235-GFP载体的构建及转化 | 第47页 |
5.1.4 质粒大提 | 第47-48页 |
5.1.5 水稻原生质体的制备 | 第48页 |
5.1.6 质粒转化原生质体 | 第48页 |
5.1.7 激光共聚焦扫描显微镜观察 | 第48-49页 |
5.2 结果与分析 | 第49-51页 |
5.2.1 ZW235-GFP载体的构建 | 第49-50页 |
5.2.2 基因表达蛋白ZW235的亚细胞定位 | 第50-51页 |
5.3 讨论 | 第51-52页 |
第六章 酵母双杂交 | 第52-58页 |
6.1 材料与方法 | 第52-56页 |
6.1.1 实验所需材料 | 第52-53页 |
6.1.1.1 所需载体及酵母菌株 | 第52页 |
6.1.1.2 主要实验用品及仪器 | 第52-53页 |
6.1.2 ZW235-AD/BD载体构建 | 第53页 |
6.1.3 诱饵载体ZW235-BD转化酵母Y2H Gold Yeast | 第53-54页 |
6.1.3.1 酵母Y2H Gold Yeast感受态的制备 | 第53页 |
6.1.3.2 ZW235-BD载体转化酵母感受态 | 第53-54页 |
6.1.4 ZW235基因表达蛋白的自激活检测 | 第54页 |
6.1.5 诱饵载体ZW235-BD筛库 | 第54-55页 |
6.1.5.1 转化法酵母筛库 | 第54-55页 |
6.1.5.2 互作蛋白基因的获得 | 第55页 |
6.1.6 滴点法验证互作关系 | 第55-56页 |
6.2 结果与分析 | 第56-57页 |
6.2.1 ZW235-BD诱饵载体构建 | 第56页 |
6.2.2 ZW235蛋白自激活检测 | 第56-57页 |
6.2.3 ZW235蛋白互作蛋白的筛选鉴定 | 第57页 |
6.3 讨论 | 第57-58页 |
第七章 酵母单杂交 | 第58-63页 |
7.1 材料与方法 | 第58-60页 |
7.1.1 实验材料 | 第58页 |
7.1.2 突变体zw235与野生型叶片中YABBY基因表达量比较 | 第58页 |
7.1.3 YABBY基因质粒及其酵母菌株的构建 | 第58-59页 |
7.1.3.1 构建pBait-AbAi质粒 | 第58-59页 |
6.1.3.2 获得含pBait-AbAi质粒的酵母菌株 | 第59页 |
7.1.4 摸索抑制诱饵菌株生长的最低AbA浓度 | 第59页 |
7.1.5 ZW235蛋白与YABBY基因酵母单杂交 | 第59-60页 |
7.2 结果与分析 | 第60-62页 |
7.2.1 突变体zw235与野生型叶片中YABBY基因表达量对比 | 第60-61页 |
7.2.2 基因YABBY结合元件与ZW235蛋白互作筛选 | 第61-62页 |
7.3 讨论 | 第62-63页 |
第八章 全文结论 | 第63-65页 |
8.1 结果 | 第63-64页 |
8.2 讨论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
作者简历 | 第71页 |