摘要 | 第5-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
引言 | 第17-19页 |
第一部分 综述 | 第19-43页 |
第二部分 神经生长因子的制备和鉴定 | 第43-59页 |
一、神经生长因子的制备 | 第43-48页 |
1 实验材料 | 第43-44页 |
1.1 药品与试剂 | 第43页 |
1.2 仪器 | 第43-44页 |
2.试验方法 | 第44页 |
2.1 7s-NGF制备流程 | 第44页 |
3 实验结果 | 第44-46页 |
3.1 洗脱液紫外吸收曲线 | 第44-45页 |
3.2 一次阳离子提取纯化 | 第45页 |
3.3 二次阳离子提取纯化 | 第45-46页 |
4 实验讨论 | 第46-48页 |
4.1 提取纯化背景 | 第46-47页 |
4.2 提取纯化条件 | 第47页 |
4.3 离子交换填料的选择 | 第47-48页 |
5 小结 | 第48页 |
二、提取蛋白鉴定 | 第48-54页 |
1 实验材料 | 第48-49页 |
1.1 药品与试剂 | 第48页 |
1.2 仪器与材料 | 第48-49页 |
2 实验方法 | 第49-51页 |
2.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第49-50页 |
2.2 Western blotting,免疫印迹 | 第50-51页 |
3 实验结果 | 第51-53页 |
3.1 SDS-PAGE电泳实验结果 | 第51页 |
3.2 二次阳离子纯化后的蛋白质电泳 | 第51-52页 |
3.3 Western blotting实验结果 | 第52-53页 |
4 实验讨论 | 第53页 |
4.1 SDS-PAGE电泳 | 第53页 |
4.2 免疫印迹(Western blotting) | 第53页 |
5 小结 | 第53-54页 |
三 神经生长因子定量方法建立 | 第54-59页 |
1 实验材料 | 第54页 |
1.1 药品与试剂 | 第54页 |
1.2 仪器 | 第54页 |
2 实验方法 | 第54-57页 |
2.1 Folin-酚法(Lowry法) | 第54-56页 |
2.2 考马斯亮兰标准曲线法 | 第56页 |
2.3 考马斯亮兰试剂盒法 | 第56-57页 |
2.4 直接冻干法测定蛋白质质量 | 第57页 |
3 实验结果 | 第57-58页 |
3.1 含量测定结果 | 第57页 |
3.2 颌下腺中神经生长因子的产率 | 第57-58页 |
4 实验讨论 | 第58页 |
4.1 蛋白质定量方法 | 第58页 |
4.2 神经生长因子定量方法比较 | 第58页 |
5 小结 | 第58-59页 |
第三部分 神经生长因子-紫杉醇偶联物的制备、鉴定及定量测定 | 第59-75页 |
1 实验材料 | 第59-60页 |
1.1 药品与试剂 | 第59-60页 |
1.2 仪器 | 第60页 |
2 实验方法 | 第60-64页 |
2.1 紫杉醇神经生长因子偶联物制备路线 | 第60-61页 |
2.2 紫杉醇-神经生长因子偶联物制备过程 | 第61-62页 |
2.3 产物鉴定 | 第62-63页 |
2.4 偶联物体外分析方法 | 第63-64页 |
3 实验结果 | 第64-71页 |
3.1 合成反应条件的优化结果 | 第64页 |
3.2 产物鉴定结果 | 第64-69页 |
3.3 体外分析方法 | 第69-71页 |
4 实验讨论 | 第71-73页 |
4.1 紫杉醇丁二酸酐酯的制备 | 第71-72页 |
4.2 偶联试剂 | 第72页 |
4.3 产物鉴定 | 第72页 |
4.4 熔点测定 | 第72页 |
4.5 偶联物中紫杉醇含量测定 | 第72-73页 |
4.6 溶解度测定 | 第73页 |
5 小结 | 第73-75页 |
第四部分 偶联物体外靶向性及体内分布初步研究 | 第75-93页 |
1 实验材料 | 第75-76页 |
1.1 药品与试剂 | 第75页 |
1.2 实验仪器 | 第75-76页 |
1.3 试验动物 | 第76页 |
2 实验方法 | 第76-78页 |
2.1 体外靶向实验 | 第76-77页 |
2.2 体内分布初步实验 | 第77-78页 |
3 实验结果 | 第78-91页 |
3.1 体外肿瘤抑制试验 | 第78-84页 |
3.2 体外细胞毒性试验 | 第84-86页 |
3.3 体内分布实验结果 | 第86-91页 |
4 实验讨论 | 第91-92页 |
4.1 抑瘤活性与毒性 | 第91页 |
4.2 体内分析方法的建立 | 第91页 |
4.3 靶向性评价结果 | 第91-92页 |
5 小结 | 第92-93页 |
全文总结 | 第93-95页 |
致谢 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-99页 |
攻读硕士期间发表的相关论文 | 第99页 |