摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-29页 |
·小麦与条锈病 | 第14-17页 |
·什么是小麦条锈病 | 第14页 |
·小麦条锈病的危害 | 第14-15页 |
·小麦与条锈菌亲和性反应的发病过程 | 第15页 |
·小麦条锈病的防治策略 | 第15-16页 |
·小麦条锈病的流行学研究 | 第16页 |
·小麦条锈病组织学与细胞学研究 | 第16-17页 |
·锈菌与寄主植物亲和互作研究进展 | 第17-21页 |
·在锈菌与寄主亲和互作过程中表达的锈菌基因 | 第17-20页 |
·小麦与条锈菌亲和互作的分子生物学研究进展 | 第20-21页 |
·功能基因组学研究进展 | 第21-23页 |
·功能基因组学 | 第21页 |
·功能基因组学研究方法 | 第21-23页 |
·EST 技术 | 第23-25页 |
·EST 技术的概念 | 第23-24页 |
·EST 技术的应用 | 第24-25页 |
·EST 尚存在的问题 | 第25页 |
·比较基因组学研究进展 | 第25-26页 |
·比较基因组学 | 第25-26页 |
·表达序列标签(EST)在比较基因组学中的应用 | 第26页 |
·病毒诱导的基因沉默(Virus Iduced Gene Silence,VIGS ) | 第26-27页 |
·病毒诱导的基因沉默 | 第26页 |
·病毒诱导的基因沉默在植物基因功能研究中的应用 | 第26-27页 |
·本研究的目的意义 | 第27-29页 |
第二章 表达序列标签(EST)大规模测序及生物信息学分析 | 第29-40页 |
·实验材料、仪器与试剂 | 第29页 |
·材料 | 第29页 |
·主要仪器 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·实验方法 | 第29-32页 |
·EST 测序测定及初步分析 | 第29页 |
·目的菌体(质粒)培养 | 第29-30页 |
·质粒提取 | 第30-31页 |
·EST 序列测定 | 第31页 |
·测序产物纯化 | 第31-32页 |
·EST 序列分析 | 第32页 |
·EST 序列与秆锈菌基因组进行相似性同源比对 | 第32页 |
·结果与分析 | 第32-37页 |
·克隆质粒菌落PCR 检测 | 第32-33页 |
·表达序列标签(EST)测序 | 第33页 |
·表达序列标签(EST)序列质量分析 | 第33-34页 |
·原始序列拼接结果 | 第34页 |
·基因注释和功能分类 | 第34-35页 |
·Unigene 序列与秆锈菌基因组进行相似性同源比对结果 | 第35-37页 |
·讨论 | 第37-40页 |
·EST 测序 | 第38-39页 |
·EST 聚类、拼接蛋白功能分类 | 第39页 |
·Unigene 序列与秆锈菌基因组进行相似性同源比对 | 第39-40页 |
第三章 候选基因转录表达分析和VIGS 功能分析 | 第40-62页 |
·实验仪器、试剂与材料 | 第40页 |
·大部分试剂和仪器同第一章 | 第40页 |
·小麦与条锈菌材料 | 第40页 |
·实验方法 | 第40-52页 |
·表达分析接种与取样 | 第40-41页 |
·VIGS 实验样品培养和处理 | 第41页 |
·小麦叶片总 RNA 的提取、纯化及质量检测 | 第41-42页 |
·反转录合成cDNA 第一链 | 第42-43页 |
·半定量RT-PCR 分析条锈菌基因转录表达 | 第43-45页 |
·候选基因的qRT-PCR 转录表达分析 | 第45-48页 |
·病毒诱导的基因沉默分析候选基因的功能 | 第48-52页 |
·结果与分析 | 第52-60页 |
·用于转录表达分析的组织样品反应型 | 第52-53页 |
·RNA 的提取与质量检测 | 第53页 |
·反转录产物合成cDNA 第一链PCR 检测 | 第53-54页 |
·8 个来自条锈菌菌基因的SqRT-PCR 分析结果 | 第54页 |
·候选基因qRT-PCR 分析其转录表达结果 | 第54-57页 |
·VIGS 介导的基因沉默验证基因功能 | 第57-60页 |
·讨论 | 第60-62页 |
第四章 小麦条锈菌Puccinia striiformis f. sp. Tritici 转录基因物理图谱的构建与分析 | 第62-78页 |
·材料和仪器 | 第62页 |
·试验材料 | 第62页 |
·所用仪器 | 第62页 |
·试验方法 | 第62-63页 |
·小麦条锈菌转录基因物理图谱构建 | 第62页 |
·选择基因特异性引物对图谱进行验证 | 第62-63页 |
·结果与分析 | 第63-76页 |
·小麦条锈菌EST 与小麦秆锈菌基因组序列的同源性分析 | 第63页 |
·小麦条锈菌转录基因物理图谱构建 | 第63-74页 |
·条锈菌EST 序列外显子信息 | 第74页 |
·基于条锈菌BAC 文库的转录基因物理图谱验证 | 第74-76页 |
·讨论 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
附录 | 第84-157页 |
致谢 | 第157-158页 |
个人简介 | 第158页 |