| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-39页 |
| ·植物的抗病机理 | 第14-20页 |
| ·植物抗病性的遗传模式 | 第14-15页 |
| ·植物的抗病机制 | 第15-20页 |
| ·植物抗病基因的克隆 | 第20-24页 |
| ·植物抗病基因的结构 | 第20-21页 |
| ·植物基因分离和克隆的方法及其应用 | 第21-24页 |
| ·基因功能研究方法 | 第24-30页 |
| ·新基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
| ·基因的时空表达谱分析 | 第25-26页 |
| ·基因功能的实验学验证 | 第26-29页 |
| ·蛋白的亚细胞定位 | 第29-30页 |
| ·小麦条锈病的危害及研究现状 | 第30-38页 |
| ·小麦条锈病的危害及防治 | 第30-31页 |
| ·小麦条锈病的研究进展 | 第31-38页 |
| ·本研究目的和意义 | 第38-39页 |
| 第二章 小麦蛋白激酶(TaLRPK)基因的的克隆及特征分析 | 第39-62页 |
| ·前言 | 第39-41页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第41-42页 |
| ·材料 | 第41页 |
| ·试剂 | 第41-42页 |
| ·仪器 | 第42页 |
| ·实验方法 | 第42-53页 |
| ·小麦叶片总RNA的提取、纯化与质量检测 | 第42-43页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第43-44页 |
| ·5'-RACE和3'-RACE反应 | 第44页 |
| ·PCR产物的回收纯化 | 第44-45页 |
| ·PCR产物与载体的连接 | 第45页 |
| ·感受态细胞的制备及转化 | 第45-46页 |
| ·质粒DNA的小量制备 | 第46页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第46页 |
| ·测序反应 | 第46-47页 |
| ·测序反应产物纯化 | 第47页 |
| ·RACE全长序列的拼接和验证 | 第47页 |
| ·序列分析 | 第47-48页 |
| ·表达特征分析 | 第48-49页 |
| ·瞬时表达与亚细胞定位 | 第49-51页 |
| ·BSMV-VIGS介导的基因沉默 | 第51-53页 |
| ·实验结果 | 第53-60页 |
| ·小麦叶片总RNA的提取 | 第53-54页 |
| ·5'-RACE和3'-RACE扩增及TaLRPK开放阅读框的克隆 | 第54页 |
| ·小麦类TaLRPK序列分析 | 第54-57页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第57页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第57-59页 |
| ·TaLRPK亚细胞定位 | 第59页 |
| ·VIGS结果分析 | 第59-60页 |
| ·讨论与结论 | 第60-62页 |
| 第三章 小麦顺式还原酮加双氧酶(TaARD)基因的克隆及特征分析 | 第62-85页 |
| ·前言 | 第62-64页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第64页 |
| ·实验方法 | 第64-74页 |
| ·TaARD序列扩增 | 第64页 |
| ·小麦叶片基因组DNA提取 | 第64-65页 |
| ·染色体定位 | 第65页 |
| ·Southern blot | 第65-68页 |
| ·表达特征分析 | 第68页 |
| ·瞬时表达与亚细胞定位 | 第68-69页 |
| ·TaARD原核表达与纯化 | 第69-72页 |
| ·多克隆抗体的制备、检测与纯化 | 第72-73页 |
| ·Western杂交 | 第73-74页 |
| ·实验结果 | 第74-82页 |
| ·5'-RACE和3'-RACE扩增及ARD开放阅读框的克隆 | 第74页 |
| ·小麦顺式还原酮加双氧酶基因TaARD序列分析 | 第74-76页 |
| ·TaARD基因的染色体定位与southern杂交 | 第76-77页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第77页 |
| ·TaARD亚细胞定位 | 第77-78页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第78-80页 |
| ·TaARD基因的原核表达与纯化 | 第80-82页 |
| ·抗血清的免疫学性质分析 | 第82页 |
| ·抗体的纯化及特异性检测 | 第82页 |
| ·讨论与结论 | 第82-85页 |
| 第四章 小麦伤诱导蛋白基因(TaPWR)基因的的克隆及特征分析 | 第85-95页 |
| ·前言 | 第85-86页 |
| ·材料、试剂及仪器 | 第86页 |
| ·实验方法 | 第86-87页 |
| ·材料准备 | 第86页 |
| ·引物的设计与合成 | 第86页 |
| ·RACE全长序列的拼接和验证 | 第86-87页 |
| ·TaWRP基因在小麦的不同器官表达差异的半定量RT-PCR分析 | 第87页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第87页 |
| ·瞬时表达与亚细胞定位 | 第87页 |
| ·TaWRP原核表达与纯化 | 第87页 |
| ·实验结果 | 第87-93页 |
| ·5'-RACE和3'-RACE扩增及TaWRP开放阅读框的克隆 | 第87-88页 |
| ·小麦类TaWRP序列分析 | 第88-90页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第90页 |
| ·实时定量PCR分析 | 第90-92页 |
| ·TaWRP原核表达 | 第92-93页 |
| ·讨论 | 第93-95页 |
| 第五章 来源四倍体小麦抗条锈基因Yr481048的分子标记 | 第95-108页 |
| ·前言 | 第95页 |
| ·试验材料 | 第95-96页 |
| ·实验方法 | 第96-101页 |
| ·F3后代染色体观察 | 第96页 |
| ·苗期抗条锈性鉴定和遗传分析 | 第96-97页 |
| ·抗条锈病基因分子图谱的构建 | 第97-101页 |
| ·结果 | 第101-105页 |
| ·PI480148苗期抗锈性鉴定 | 第101-102页 |
| ·F3后代染色体观察结果 | 第102页 |
| ·PI480148抗条锈病基因遗传分析 | 第102-103页 |
| ·PI480148抗条锈病基因RGAP标记的建立与遗传连锁分析 | 第103页 |
| ·PI480148抗条锈病基因SSR标记的建立与遗传连锁分析 | 第103-104页 |
| ·YrPI480148遗传图谱构建 | 第104页 |
| ·PI480148所含抗锈基因YrPI480148与位于2BL染色体上其它抗条锈病基因的关系 | 第104-105页 |
| ·讨论与结论 | 第105-108页 |
| ·YrPI480148抗病基因的命名 | 第105页 |
| ·YrPI480148抗病基因及其分子标记的利用 | 第105-106页 |
| ·四倍体来源抗病基因发掘和标记 | 第106页 |
| ·四倍体小麦的分子标记 | 第106页 |
| ·细胞生物学技术在抗病基因选育中的应用 | 第106-108页 |
| 参考文献 | 第108-120页 |
| 附录 | 第120-123页 |
| 致谢 | 第123-124页 |
| 作者简介 | 第124页 |
