摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
缩略词表 | 第7-10页 |
1 文献综述 | 第10-20页 |
1.1 FKBPs家族概述 | 第10-11页 |
1.2 FKBPs分子结构和功能 | 第11-16页 |
1.2.1 FKBPs分子结构 | 第11-12页 |
1.2.2 FKBPs功能 | 第12-16页 |
1.3 FKBP5的分子结构、组织分布与功能 | 第16-20页 |
1.3.1 FKBP5的分子结构 | 第16-17页 |
1.3.2 FKBP5的组织分布 | 第17-18页 |
1.3.3 FKBP5功能 | 第18-20页 |
2 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
3 材料和方法 | 第21-39页 |
3.1 实验材料 | 第21页 |
3.1.1 实验动物 | 第21页 |
3.1.2 样品采集 | 第21页 |
3.2 主要仪器设备 | 第21-22页 |
3.3 主要试剂盒 | 第22-23页 |
3.4 主要试剂及酶 | 第23-24页 |
3.5 载体、菌株和细胞 | 第24页 |
3.6 实验室常规实验方法及原理 | 第24-39页 |
3.6.1 总RNA提取 | 第24页 |
3.6.2 SMART-RACE-PCR技术 | 第24-27页 |
3.6.3 PCR扩增技术 | 第27-28页 |
3.6.4 琼脂糖电泳及胶回收 | 第28-29页 |
3.6.5 目的片段连接与转化 | 第29-30页 |
3.6.5.1 目的片段与19 Simple T vector连接(TAKARA) | 第29页 |
3.6.5.2 连接产物转化及阳性克隆筛选 | 第29-30页 |
3.6.6 基因序列分析 | 第30-31页 |
3.6.7 RT-PCR及荧光定量PCR | 第31-32页 |
3.6.8 Western Blot(免疫印迹)技术 | 第32-34页 |
3.6.9 FKBP5蛋白原核表达和纯化 | 第34-38页 |
3.6.10 FKBP5蛋白磷酸酶活性分析 | 第38-39页 |
4 结果与分析 | 第39-54页 |
4.1 FKBP5基因的克隆,序列及序列同源性分析 | 第39-42页 |
4.1.1 Total RNA质量鉴定 | 第39页 |
4.1.2 SMART cDNA的合成 | 第39页 |
4.1.3 FKBP5基因的克隆,序列及序列同源性分析 | 第39-42页 |
4.2 FKBP5基因组织表达谱 | 第42-48页 |
4.2.1 FKBP5 mRNA组织表达谱 | 第42-47页 |
4.2.2 荣昌猪、长白猪FKBP5基因表达差异 | 第47-48页 |
4.2.3 FKBP5蛋白表达谱 | 第48页 |
4.3 FKBP5蛋白原核表达 | 第48-54页 |
4.3.1 FKBP5原核表达载体构建 | 第48-49页 |
4.3.2 FKBP5蛋白诱导表达 | 第49-50页 |
4.3.3 FKBP5蛋白鉴定 | 第50页 |
4.3.4 诱导FKBP5蛋白表达诱导剂浓度、诱导时间 | 第50-52页 |
4.3.5 FKBP5蛋白分离纯化 | 第52页 |
4.3.6 FKBP5蛋白磷酸酶活性分析 | 第52-54页 |
5 讨论 | 第54-58页 |
5.1 FKBP5基因的克隆,序列及序列同源性分析 | 第54-55页 |
5.2 FKBP5基因组织表达谱 | 第55-57页 |
5.3 FKBP5蛋白原核表达 | 第57-58页 |
6 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第66页 |