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荣昌猪、长白猪免疫相关基因FKBP5的克隆、表达以及其表达蛋白质活性分析

摘要第5-6页
Abstract第6页
缩略词表第7-10页
1 文献综述第10-20页
    1.1 FKBPs家族概述第10-11页
    1.2 FKBPs分子结构和功能第11-16页
        1.2.1 FKBPs分子结构第11-12页
        1.2.2 FKBPs功能第12-16页
    1.3 FKBP5的分子结构、组织分布与功能第16-20页
        1.3.1 FKBP5的分子结构第16-17页
        1.3.2 FKBP5的组织分布第17-18页
        1.3.3 FKBP5功能第18-20页
2 研究的目的与意义第20-21页
3 材料和方法第21-39页
    3.1 实验材料第21页
        3.1.1 实验动物第21页
        3.1.2 样品采集第21页
    3.2 主要仪器设备第21-22页
    3.3 主要试剂盒第22-23页
    3.4 主要试剂及酶第23-24页
    3.5 载体、菌株和细胞第24页
    3.6 实验室常规实验方法及原理第24-39页
        3.6.1 总RNA提取第24页
        3.6.2 SMART-RACE-PCR技术第24-27页
        3.6.3 PCR扩增技术第27-28页
        3.6.4 琼脂糖电泳及胶回收第28-29页
        3.6.5 目的片段连接与转化第29-30页
            3.6.5.1 目的片段与19 Simple T vector连接(TAKARA)第29页
            3.6.5.2 连接产物转化及阳性克隆筛选第29-30页
        3.6.6 基因序列分析第30-31页
        3.6.7 RT-PCR及荧光定量PCR第31-32页
        3.6.8 Western Blot(免疫印迹)技术第32-34页
        3.6.9 FKBP5蛋白原核表达和纯化第34-38页
        3.6.10 FKBP5蛋白磷酸酶活性分析第38-39页
4 结果与分析第39-54页
    4.1 FKBP5基因的克隆,序列及序列同源性分析第39-42页
        4.1.1 Total RNA质量鉴定第39页
        4.1.2 SMART cDNA的合成第39页
        4.1.3 FKBP5基因的克隆,序列及序列同源性分析第39-42页
    4.2 FKBP5基因组织表达谱第42-48页
        4.2.1 FKBP5 mRNA组织表达谱第42-47页
        4.2.2 荣昌猪、长白猪FKBP5基因表达差异第47-48页
        4.2.3 FKBP5蛋白表达谱第48页
    4.3 FKBP5蛋白原核表达第48-54页
        4.3.1 FKBP5原核表达载体构建第48-49页
        4.3.2 FKBP5蛋白诱导表达第49-50页
        4.3.3 FKBP5蛋白鉴定第50页
        4.3.4 诱导FKBP5蛋白表达诱导剂浓度、诱导时间第50-52页
        4.3.5 FKBP5蛋白分离纯化第52页
        4.3.6 FKBP5蛋白磷酸酶活性分析第52-54页
5 讨论第54-58页
    5.1 FKBP5基因的克隆,序列及序列同源性分析第54-55页
    5.2 FKBP5基因组织表达谱第55-57页
    5.3 FKBP5蛋白原核表达第57-58页
6 结论第58-59页
参考文献第59-65页
致谢第65-66页
攻读学位期间发表的学术论文第66页

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