| 摘要 | 第10-13页 |
| ABSTRACT | 第13-16页 |
| 缩略词表 | 第17-19页 |
| 引言 | 第19-21页 |
| 第一章 文献综述 | 第21-37页 |
| 1 芽变的概念及其在果树育种中的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.1 芽变的概念 | 第21页 |
| 1.2 芽变的特点 | 第21-22页 |
| 1.2.1 芽变的嵌合性 | 第21页 |
| 1.2.2 芽变的多样性 | 第21页 |
| 1.2.3 芽变的重演性 | 第21页 |
| 1.2.4 芽变性状的局限性和多效性 | 第21-22页 |
| 1.3 芽变的发生和遗传 | 第22-23页 |
| 1.3.1 梢端分生组织的组织发生层学说 | 第22页 |
| 1.3.2 芽变的遗传 | 第22-23页 |
| 1.4 梨芽变的变异性状与梨芽变育种研究进展 | 第23-24页 |
| 2 果树芽变的研究策略 | 第24-25页 |
| 3 分子标记技术研究进展 | 第25-33页 |
| 3.1 AFLP分子标记 | 第25-28页 |
| 3.1.1 AFLP分子标记的原理及特点 | 第25-26页 |
| 3.1.2 AFLP技术在果树研究中的应用 | 第26-28页 |
| 3.2 MSAP分子标记 | 第28-30页 |
| 3.2.1 MSAP分子标记的原理及特点 | 第28-30页 |
| 3.2.2 MSAP技术在果树研究中的应用 | 第30页 |
| 3.3 cDNA-AFLP技术 | 第30-33页 |
| 3.3.1 cDNA-AFLP分子标记的原理及特点 | 第31页 |
| 3.3.2 cDNA-AFLP分子标记在果树研究中的应用 | 第31-33页 |
| 4 实时荧光定量RT-PCR技术的原理及特点 | 第33页 |
| 5 NAC转录因子研究进展 | 第33-35页 |
| 5.1 NAC转录因子的进化 | 第34页 |
| 5.2 NAC转录因子的结构特征 | 第34-35页 |
| 5.3 NAC转录因子的生物学功能 | 第35页 |
| 6 本研究的目的及技术路线 | 第35-37页 |
| 第二章 ‘南果梨’及其芽变品种‘大南果梨’果实发育的细胞学基础 | 第37-49页 |
| 摘要 | 第37页 |
| 前言 | 第37-38页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| 1.1 试验材料 | 第38页 |
| 1.2 试验方法 | 第38-41页 |
| 1.2.1 果实干重/鲜重的测定 | 第38页 |
| 1.2.2 果实纵横径、托杯和果心宽度的测定 | 第38-39页 |
| 1.2.3 果实体积的测定 | 第39页 |
| 1.2.4 品种的倍性鉴定 | 第39页 |
| 1.2.5 果实组织结构的细胞学观察 | 第39-40页 |
| 1.2.6 细胞数目与大小的测定 | 第40-41页 |
| 1.2.7 细胞分裂期的确定 | 第41页 |
| 1.2.8 果实库活性和库强的比较分析 | 第41页 |
| 1.2.9 统计分析 | 第41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-46页 |
| 2.1 ‘南果梨’和‘大南果梨’的果实表型分析 | 第41-43页 |
| 2.2 ‘南果梨’和‘大南果梨’的倍性分析 | 第43页 |
| 2.3 ‘南果梨’和‘大南果梨’细胞长度的比较 | 第43-44页 |
| 2.4 ‘南果梨’和‘大南果梨’细胞数目的比较 | 第44-45页 |
| 2.5 ‘南果梨’和‘大南果梨’果实细胞分裂期的比较 | 第45-46页 |
| 2.6 ‘南果梨’和‘大南果梨’果实库活性和库强变化的比较 | 第46页 |
| 3 讨论 | 第46-49页 |
| 第三章 ‘南果梨’果个变异与果实可溶性糖、有机酸含量的相关性分析 | 第49-65页 |
| 摘要 | 第49页 |
| 前言 | 第49-50页 |
| 1 试验材料与方法 | 第50-51页 |
| 1.1 试验材料 | 第50页 |
| 1.2 试验方法 | 第50-51页 |
| 1.2.1 果实大小主要形态指标的测定 | 第50页 |
| 1.2.2 溶性糖和有机酸的提取 | 第50页 |
| 1.2.3 可溶性糖和有机酸含量的测定方法 | 第50-51页 |
| 1.2.4 标准曲线的绘制及线性相关性及检出限的计算 | 第51页 |
| 1.2.5 统计分析 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-62页 |
| 2.1 果实中可溶性糖和有机酸组分测定 | 第51-54页 |
| 2.2 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中可溶性糖含量的比较 | 第54-57页 |
| 2.2.1 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中可溶性总糖含量的动态变化 | 第54-55页 |
| 2.2.2 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中蔗糖含量的动态变化 | 第55页 |
| 2.3.3 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实葡萄糖含量的动态变化 | 第55页 |
| 2.2.4 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实果糖含量的动态变化 | 第55页 |
| 2.2.5 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实山梨醇含量的动态变化 | 第55-57页 |
| 2.3 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实有机酸含量的动态变化 | 第57-59页 |
| 2.3.1 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中总酸含量的动态变化 | 第57页 |
| 2.3.2 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中苹果酸含量的动态变化 | 第57页 |
| 2.3.3 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中柠檬酸含量的动态变化 | 第57页 |
| 2.3.4 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中莽草酸含量的动态变化 | 第57-58页 |
| 2.3.5 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中草酸含量的动态变化 | 第58页 |
| 2.3.6 ‘南果梨’与‘大南果梨’果实中奎尼酸含量的动态变化 | 第58-59页 |
| 2.4 果实大小与各组分可溶性糖、有机酸含量的相关性分析 | 第59-62页 |
| 3 讨论 | 第62-65页 |
| 第四章 ‘南果梨’和‘大南果梨’果实发育过程中内源激素的含量变化 | 第65-77页 |
| 摘要 | 第65页 |
| 前言 | 第65-66页 |
| 1 材料与方法 | 第66-68页 |
| 1.1 试验材料 | 第66页 |
| 1.2 试验方法 | 第66-68页 |
| 1.2.1 果实和种子的内源激素的提取 | 第66页 |
| 1.2.2 果实和种子的内源激素的测定 | 第66-67页 |
| 1.2.3 标准曲线的绘制及线性相关性、重复性和回收率的计算 | 第67页 |
| 1.2.4 统计分析 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-74页 |
| 2.1 果实及种子中内源激素组分测定 | 第68-69页 |
| 2.2 ‘南果梨’和‘大南果梨’生长发育过程中果肉的内源激素含量的变化 | 第69-70页 |
| 2.2.1 内源IAA含量的变化 | 第69页 |
| 2.2.2 内源GA3含量的变化 | 第69页 |
| 2.2.3 内源ZT含量的变化 | 第69-70页 |
| 2.2.4 内源ABA含量的变化 | 第70页 |
| 2.3 ‘南果梨’和‘大南果梨’生长发育过程中种子的内源激素含量变化 | 第70-72页 |
| 2.3.1 内源IAA含量的变化 | 第70页 |
| 2.3.2 内源GA3含量的变化 | 第70-71页 |
| 2.3.3 内源ZT含量的变化 | 第71页 |
| 2.3.4 内源ABA含量的变化 | 第71-72页 |
| 2.4 ‘南果梨’和‘大南果梨’生长发育过程中不同激素比值的平衡 | 第72-74页 |
| 2.4.1 果肉生长发育过程中不同激素比值的平衡 | 第72-73页 |
| 2.4.2 种子生长发育过程中不同激素比值的平衡 | 第73-74页 |
| 3 讨论 | 第74-77页 |
| 第五章 ‘南果梨’及其大果芽变品种的分子标记鉴定 | 第77-89页 |
| 摘要 | 第77页 |
| 前言 | 第77-78页 |
| 第一节 利用AFLP技术检测‘南果梨’及其大果芽变品种基因组DNA的遗传差异 | 第78-83页 |
| 1 试验材料与方法 | 第78-81页 |
| 1.1 试验材料 | 第78页 |
| 1.2 试验方法 | 第78-81页 |
| 1.2.1 基因组DNA提取 | 第78-79页 |
| 1.2.2 AFLP分析 | 第79-80页 |
| 1.2.3 选择性扩增产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染 | 第80-81页 |
| 2 结果与分析 | 第81-83页 |
| 2.1 梨基因组的提取与纯化 | 第81页 |
| 2.2 AFLP分析体系的建立 | 第81-82页 |
| 2.3 选择性扩增产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及芽变品种的AFLP分析 | 第82-83页 |
| 第二节 利用MSAP技术检测‘南果梨’及其大果芽变品种基因组DNA甲基化的差异 | 第83-89页 |
| 1 试验材料与方法 | 第83-84页 |
| 1.1 试验材料 | 第83页 |
| 1.2 试验方法 | 第83-84页 |
| 1.2.1 基因组DNA提取 | 第83页 |
| 1.2.2 MSAP分析 | 第83-84页 |
| 2 结果与分析 | 第84-87页 |
| 3 讨论 | 第87-89页 |
| 第六章 ‘南果梨,及其大果芽变品种在转录水平上的基因表达差异分析 | 第89-109页 |
| 摘要 | 第89页 |
| 前言 | 第89-90页 |
| 1 材料与方法 | 第90-96页 |
| 1.1 试验材料 | 第90页 |
| 1.2 试验方法 | 第90-96页 |
| 1.2.1 RNA提取方法及步骤 | 第90-91页 |
| 1.2.2 ds-cDNA的合成 | 第91-92页 |
| 1.2.3 cDNA-AFLP分析 | 第92-93页 |
| 1.2.4 Transcript derived fragments(TDFs)的分离、克隆及测序 | 第93-94页 |
| 1.2.5 TDFs的序列分析 | 第94页 |
| 1.2.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第94-96页 |
| 2 结果与分析 | 第96-104页 |
| 2.1 cDNA-AFLP基因差异表达分析 | 第96-104页 |
| 2.1.1 总RNA的质量检测 | 第96页 |
| 2.1.2 差异片段的序列分析 | 第96-102页 |
| 2.1.3 差异片段表达分析 | 第102-104页 |
| 3 讨论 | 第104-109页 |
| 第七章 梨NAC转录因子的克隆与生物信息学分析 | 第109-121页 |
| 摘要 | 第109页 |
| 前言 | 第109-110页 |
| 1. 材料与方法 | 第110-112页 |
| 1.1 试验材料 | 第110页 |
| 1.2 引物设计 | 第110页 |
| 1.3 NAC基因组的扩增 | 第110页 |
| 1.4 NAC cDNA的扩增 | 第110-111页 |
| 1.4.1 cDNA第一链的合成 | 第110-111页 |
| 1.4.2 cDNA的扩增 | 第111页 |
| 1.5 NAC基因扩增片段的分离、克隆及测序 | 第111页 |
| 1.6 NAC基因序列的生物信息学分析 | 第111-112页 |
| 1.6.1 基本性质分析 | 第111页 |
| 1.6.2 同源性分析和构建系统树 | 第111-112页 |
| 2 结果与分析 | 第112-118页 |
| 2.1 NAC基因的序列分析 | 第112-113页 |
| 2.2 同源性分析和系统树构建 | 第113-115页 |
| 2.2.1 梨NAC推导蛋白质一级结构特征 | 第113-114页 |
| 2.2.2 同源性分析和系统树分析 | 第114-115页 |
| 2.3 梨NAC蛋白亚细胞定位和导肽的预测与分析 | 第115-116页 |
| 2.4 梨NAC蛋白质跨膜结构域的预测与分析 | 第116页 |
| 2.5 梨NAC蛋白质疏水性分析 | 第116页 |
| 2.6 梨NAC蛋白质二级和三级结构预测 | 第116-118页 |
| 3. 讨论 | 第118-121页 |
| 综合讨论 | 第121-127页 |
| 1 梨果个大小变异的细胞学基础 | 第121页 |
| 2 梨果个大小的变异的生理代谢差异 | 第121-123页 |
| 3 梨果个大小变异的分子遗传基础 | 第123-127页 |
| 全文结论与创新点 | 第127-129页 |
| 一、全文结论 | 第127-128页 |
| 二、创新点 | 第128-129页 |
| 参考文献 | 第129-143页 |
| 攻读博士学位期间发表(待发表)的论文 | 第143-145页 |
| 致谢 | 第145页 |
