摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
缩略语的中英文对照 | 第13-14页 |
第一篇 文献综述 | 第14-36页 |
第一章 DNA甲基化研究综述 | 第14-24页 |
1 DNA甲基化修饰概述及其功能作用 | 第14-15页 |
1.1 DNA甲基化修饰概述 | 第14-15页 |
1.2 DNA甲基化功能 | 第15页 |
2 DNA甲基化调控机制 | 第15-18页 |
2.1 DNA甲基化机制 | 第16-17页 |
2.2 DNA去甲基化机制 | 第17-18页 |
3 小鼠合子期DNA甲基化变化 | 第18-19页 |
3.1 主动去甲基化 | 第18-19页 |
3.2 被动去甲基化 | 第19页 |
参考文献 | 第19-24页 |
第二章 H3K9甲基化修饰及其甲基转移酶G9A和GLP研究综述 | 第24-36页 |
1 H3K9甲基化概述及其功能作用 | 第24-26页 |
1.1 H3K9甲基化概述 | 第24-25页 |
1.2 H3K9甲基化功能作用 | 第25-26页 |
1.3 H3K9甲基化和DNA甲基化之间的联系 | 第26页 |
2 H3K9甲基化调控机制 | 第26-27页 |
2.1 H3K9甲基化 | 第26-27页 |
2.2 H3K9去甲基化 | 第27页 |
3 G9A和GLP功能及作用机制 | 第27-29页 |
研究目的与意义 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-36页 |
第二篇 试验部分 | 第36-104页 |
第一章 小鼠合子中DNA甲基化的变化及其机制的初步研究 | 第36-58页 |
1 材料与方法 | 第36-41页 |
1.1 实验动物 | 第36页 |
1.2 体外受精(IVF)及胚胎培养 | 第36-37页 |
1.3 6-DMAP等胚胎处理试剂的添加 | 第37页 |
1.4 孤雄胚胎的获得 | 第37-38页 |
1.5 孤雌胚胎的获得 | 第38-39页 |
1.6 生产PZM胚胎 | 第39页 |
1.7 DNA甲基化免疫荧光检测 | 第39页 |
1.8 常规免疫荧光检测 | 第39-40页 |
1.9 免疫荧光相对定量分析 | 第40-41页 |
1.10 数据统计分析 | 第41页 |
2 结果 | 第41-52页 |
2.1 孤雄和孤雌胚胎的DNA甲基化状态 | 第41页 |
2.2 Aphi 6-24h、CHX 10-24h和PZM胚胎的DNA甲基化状态 | 第41-42页 |
2.3 一、二细胞胚胎的H3K9与DNA甲基化状态 | 第42-45页 |
2.4 父源基因组新生DNA甲基化发生的时间 | 第45页 |
2.5 第一次有丝分裂过程中新生DNA甲基化检测 | 第45-47页 |
2.6 雌雄原核异染色质的表观遗传标记检测 | 第47-48页 |
2.7 新生DNA甲基转移酶的定位 | 第48-52页 |
3 讨论 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-58页 |
第二章 小鼠合子中H3K9ME2修饰的变化及调控机制研究 | 第58-104页 |
1 材料与方法 | 第58-70页 |
1.1 实验动物 | 第58-59页 |
1.2 GV期卵母细胞的获取 | 第59页 |
1.3 体外受精(IVF)及胚胎培养 | 第59-60页 |
1.4 NIH3T3细胞的培养 | 第60-61页 |
1.5 胚胎处理试剂的添加 | 第61页 |
1.6 常规免疫荧光检测 | 第61-62页 |
1.7 小鼠卵巢cDNA模板的合成 | 第62-63页 |
1.8 G9A mRNA模板质粒的构建 | 第63-66页 |
1.9 G9A mRNA的体外合成 | 第66-68页 |
1.10 G9A mRNA及抗体的显微注射 | 第68-70页 |
2 结果 | 第70-97页 |
2.1 CHX和嘌呤霉素处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响 | 第70-71页 |
2.2 小鼠合子不同发育阶段H3K9me2修饰的变化 | 第71页 |
2.3 CHX不同时间处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响 | 第71-73页 |
2.4 Roscovitin和Aphidicolin处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响 | 第73页 |
2.5 BIX处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响 | 第73-77页 |
2.6 三种G9A抗体的免疫荧光染色结果 | 第77-79页 |
2.7 G9A在GV、合子、二细胞期呈现特异的点状定位 | 第79-81页 |
2.8 CHX不同时间处理对G9A分布的影响 | 第81-83页 |
2.9 雄原核是否发生了H3K9me2的去甲基化 | 第83-86页 |
2.10 CHX和BIX处理对G9A分布的影响 | 第86页 |
2.11 添加Roscovitin和Aphidicolin处理对G9A分布的影响 | 第86-88页 |
2.12 合子显微注射G9A(N-19)抗体对H3K9me2修饰分布及G9A定位的影响 | 第88-90页 |
2.13 合子显微注射G9A mRNA对H3K9me2修饰分布的影响 | 第90-95页 |
2.14 GLP分布与合子显微注射GLP抗体的影响 | 第95-97页 |
3 讨论 | 第97-99页 |
参考文献 | 第99-104页 |
全文结论 | 第104-106页 |
创新 | 第106-108页 |
附录 | 第108-118页 |
致谢 | 第118-120页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第120页 |