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小鼠合子中DNA甲基化和H3K9me2修饰的变化及调控机制研究

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-12页
缩略语的中英文对照第13-14页
第一篇 文献综述第14-36页
    第一章 DNA甲基化研究综述第14-24页
        1 DNA甲基化修饰概述及其功能作用第14-15页
            1.1 DNA甲基化修饰概述第14-15页
            1.2 DNA甲基化功能第15页
        2 DNA甲基化调控机制第15-18页
            2.1 DNA甲基化机制第16-17页
            2.2 DNA去甲基化机制第17-18页
        3 小鼠合子期DNA甲基化变化第18-19页
            3.1 主动去甲基化第18-19页
            3.2 被动去甲基化第19页
        参考文献第19-24页
    第二章 H3K9甲基化修饰及其甲基转移酶G9A和GLP研究综述第24-36页
        1 H3K9甲基化概述及其功能作用第24-26页
            1.1 H3K9甲基化概述第24-25页
            1.2 H3K9甲基化功能作用第25-26页
            1.3 H3K9甲基化和DNA甲基化之间的联系第26页
        2 H3K9甲基化调控机制第26-27页
            2.1 H3K9甲基化第26-27页
            2.2 H3K9去甲基化第27页
        3 G9A和GLP功能及作用机制第27-29页
        研究目的与意义第29-30页
        参考文献第30-36页
第二篇 试验部分第36-104页
    第一章 小鼠合子中DNA甲基化的变化及其机制的初步研究第36-58页
        1 材料与方法第36-41页
            1.1 实验动物第36页
            1.2 体外受精(IVF)及胚胎培养第36-37页
            1.3 6-DMAP等胚胎处理试剂的添加第37页
            1.4 孤雄胚胎的获得第37-38页
            1.5 孤雌胚胎的获得第38-39页
            1.6 生产PZM胚胎第39页
            1.7 DNA甲基化免疫荧光检测第39页
            1.8 常规免疫荧光检测第39-40页
            1.9 免疫荧光相对定量分析第40-41页
            1.10 数据统计分析第41页
        2 结果第41-52页
            2.1 孤雄和孤雌胚胎的DNA甲基化状态第41页
            2.2 Aphi 6-24h、CHX 10-24h和PZM胚胎的DNA甲基化状态第41-42页
            2.3 一、二细胞胚胎的H3K9与DNA甲基化状态第42-45页
            2.4 父源基因组新生DNA甲基化发生的时间第45页
            2.5 第一次有丝分裂过程中新生DNA甲基化检测第45-47页
            2.6 雌雄原核异染色质的表观遗传标记检测第47-48页
            2.7 新生DNA甲基转移酶的定位第48-52页
        3 讨论第52-53页
        参考文献第53-58页
    第二章 小鼠合子中H3K9ME2修饰的变化及调控机制研究第58-104页
        1 材料与方法第58-70页
            1.1 实验动物第58-59页
            1.2 GV期卵母细胞的获取第59页
            1.3 体外受精(IVF)及胚胎培养第59-60页
            1.4 NIH3T3细胞的培养第60-61页
            1.5 胚胎处理试剂的添加第61页
            1.6 常规免疫荧光检测第61-62页
            1.7 小鼠卵巢cDNA模板的合成第62-63页
            1.8 G9A mRNA模板质粒的构建第63-66页
            1.9 G9A mRNA的体外合成第66-68页
            1.10 G9A mRNA及抗体的显微注射第68-70页
        2 结果第70-97页
            2.1 CHX和嘌呤霉素处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响第70-71页
            2.2 小鼠合子不同发育阶段H3K9me2修饰的变化第71页
            2.3 CHX不同时间处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响第71-73页
            2.4 Roscovitin和Aphidicolin处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响第73页
            2.5 BIX处理对小鼠合子H3K9me2修饰的影响第73-77页
            2.6 三种G9A抗体的免疫荧光染色结果第77-79页
            2.7 G9A在GV、合子、二细胞期呈现特异的点状定位第79-81页
            2.8 CHX不同时间处理对G9A分布的影响第81-83页
            2.9 雄原核是否发生了H3K9me2的去甲基化第83-86页
            2.10 CHX和BIX处理对G9A分布的影响第86页
            2.11 添加Roscovitin和Aphidicolin处理对G9A分布的影响第86-88页
            2.12 合子显微注射G9A(N-19)抗体对H3K9me2修饰分布及G9A定位的影响第88-90页
            2.13 合子显微注射G9A mRNA对H3K9me2修饰分布的影响第90-95页
            2.14 GLP分布与合子显微注射GLP抗体的影响第95-97页
        3 讨论第97-99页
        参考文献第99-104页
全文结论第104-106页
创新第106-108页
附录第108-118页
致谢第118-120页
攻读博士学位期间发表的论文第120页

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