| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-27页 |
| 1.1 骨髓移植中的铁过载 | 第12-14页 |
| 1.1.1 细胞铁代谢 | 第12-13页 |
| 1.1.2 铁过载和骨髓移植 | 第13-14页 |
| 1.2 过量ROS影响多条信号通路 | 第14-19页 |
| 1.2.1 ROS途径 | 第14-15页 |
| 1.2.2 MAPKs途径 | 第15-16页 |
| 1.2.3 NF-κB途径 | 第16-17页 |
| 1.2.4 凋亡通路 | 第17-18页 |
| 1.2.5 炎症途径 | 第18-19页 |
| 1.3 胞内铁稳态通路 | 第19-21页 |
| 1.4 炎症和免疫反应中的TLR2角色 | 第21-23页 |
| 1.4.1 Toll样受体概述 | 第21-22页 |
| 1.4.2 TLR2的细胞内信号转导网络 | 第22-23页 |
| 1.5 DNA损伤反应中的细胞周期 | 第23-25页 |
| 1.5.1 细胞周期概述 | 第23页 |
| 1.5.2 DNA损伤反应中的细胞周期信号转导通路 | 第23-25页 |
| 1.6 本课题的研究背景、意义和主要研究内容 | 第25-27页 |
| 第二章 铁过载诱导ROS介导的人肝细胞死亡受体途径及线粒体途径凋亡 | 第27-39页 |
| 2.1 前言 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-31页 |
| 2.2.1 试剂与仪器 | 第27-28页 |
| 2.2.2 细胞培养 | 第28页 |
| 2.2.3 HH4胞内铁离子浓度测定 | 第28-29页 |
| 2.2.4 FAC对HH4细胞活力影响 | 第29页 |
| 2.2.5 HH4胞内ROS测定 | 第29页 |
| 2.2.6 蛋白质印迹法（Western blot）检测 | 第29页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR（RT-PCR）检测 | 第29-30页 |
| 2.2.8 凋亡细胞检测 | 第30页 |
| 2.2.9 RNA干扰实验（RNAi） | 第30页 |
| 2.2.10 统计分析 | 第30-31页 |
| 2.3 结果 | 第31-37页 |
| 2.3.1 FAC处理促使HH4胞内铁离子浓度呈时间依赖性增加 | 第31页 |
| 2.3.2 FAC过载抑制HH4细胞活力 | 第31-32页 |
| 2.3.3 抗氧化剂减弱FAC诱发的ROS生成 | 第32-33页 |
| 2.3.4 FAC过载激活MAPK和NF-κB信号通路 | 第33-34页 |
| 2.3.5 FAC过载激活凋亡信号途径 | 第34-35页 |
| 2.3.6 GSH对ROS相关信号通路及凋亡路径影响 | 第35-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-38页 |
| 2.5 本章小结 | 第38-39页 |
| 第三章 NF-κB参与FAC过载诱导的人Hepcidin基因表达 | 第39-48页 |
| 3.1 前言 | 第39页 |
| 3.2 材料与方法 | 第39-43页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.2.2 试剂与仪器 | 第39-40页 |
| 3.2.3 细胞培养 | 第40页 |
| 3.2.4 半定量RT-PCR检测Hepcidin表达水平 | 第40-41页 |
| 3.2.5 ChIP和EMSA实验 | 第41页 |
| 3.2.6 双荧光素酶报告基因系统实验 | 第41-42页 |
| 3.2.7 NF-κB活性抑制实验 | 第42页 |
| 3.2.8 统计分析 | 第42-43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-46页 |
| 3.3.1 枸橼酸铁铵提高HH4胞内Hepcidin表达水平 | 第43页 |
| 3.3.2 NF-κB与Hepcidin上游启动子结合作用的分析 | 第43-44页 |
| 3.3.3 荧光素酶报告载体TOPFlash-pHepcidin的构建 | 第44-45页 |
| 3.3.4 突变荧光素酶报告载体TOPFlash-pHepcidin-mut的构建 | 第45页 |
| 3.3.5 人Hepcidin基因启动子转录活性检测 | 第45-46页 |
| 3.3.6 抑制NF-κB活性对Hepcidin表达的影响 | 第46页 |
| 3.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 人肝细胞在铁过载模型中的蛋白质组学研究 | 第48-75页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 方法 | 第48-56页 |
| 4.2.1 试剂与仪器 | 第48-49页 |
| 4.2.2 细胞培养 | 第49页 |
| 4.2.3 功能蛋白质组学分析 | 第49-50页 |
| 4.2.4 磷酸化蛋白质组学分析 | 第50-53页 |
| 4.2.5 RT-PCR检测 | 第53-55页 |
| 4.2.6 Western blot检测 | 第55页 |
| 4.2.7 RNA干扰实验（RNAi） | 第55-56页 |
| 4.2.8 FAC对小鼠肝细胞NMH活力影响 | 第56页 |
| 4.2.9 细胞周期阻滞检测 | 第56页 |
| 4.2.10 统计分析 | 第56页 |
| 4.3 结果 | 第56-69页 |
| 4.3.1 功能蛋白质组学蛋白质谱鉴定与蛋白质功能聚类分析 | 第56-62页 |
| 4.3.2 质谱结果的RT-PCR方法验证 | 第62-63页 |
| 4.3.3 铁过载对铁稳态相关蛋白表达水平的影响 | 第63-64页 |
| 4.3.4 铁过载诱导TLR2介导的炎症反应发生 | 第64-65页 |
| 4.3.5 铁过载诱导的磷酸化蛋白质组学蛋白质谱鉴定与蛋白质功能聚类分析 | 第65-68页 |
| 4.3.6 FAC过载诱发HH4细胞G2/M期阻滞 | 第68-69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-74页 |
| 4.4.1 功能蛋白组学实验解析结果暗示FAC过载诱导HH4胞内多生物学过程发生 | 第70-72页 |
| 4.4.2 磷酸化蛋白组学实验解析结果暗示FAC过载诱导HH4细胞周期进程紊乱 | 第72-74页 |
| 4.5 本章小结 | 第74-75页 |
| 主要结论与展望 | 第75-77页 |
| 论文创新点 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-88页 |
| 附录 1：表 | 第88-107页 |
| 附录 2：作者在攻读博士学位期间发表的论文 | 第107页 |
