| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 前言 | 第13-30页 |
| 1.1 L-半胱氨酸性质 | 第13页 |
| 1.2 L-半胱氨酸的应用 | 第13-15页 |
| 1.3 L-半胱氨酸的生产方法 | 第15-20页 |
| 1.3.1 毛发水解法 | 第15-16页 |
| 1.3.2 化学法合成 | 第16页 |
| 1.3.3 发酵法 | 第16-18页 |
| 1.3.4 生物转化法 | 第18-20页 |
| 1.4 微生物酶法转化DL-ATC生产L-半胱氨酸过程分析 | 第20-26页 |
| 1.4.1 代谢途径分析 | 第20-22页 |
| 1.4.2 酶法合成L-半胱氨酸合成酶分析 | 第22-24页 |
| 1.4.3 合成L-半胱氨酸酶在分子水平上的研究进展 | 第24-26页 |
| 1.5 微生物酶法转化生产L-半胱氨酸条件及优化 | 第26-29页 |
| 1.5.1 产酶条件的优化 | 第26-27页 |
| 1.5.2 转化条件的优化 | 第27-28页 |
| 1.5.3 细胞固定化技术的应用研究 | 第28-29页 |
| 1.6 本课题研究意义 | 第29-30页 |
| 第二章 菌种筛选和鉴定 | 第30-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 土样来源 | 第30页 |
| 2.1.2 培养基 | 第30-31页 |
| 2.2 主要试剂与仪器 | 第31-32页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第31页 |
| 2.2.2 主要设备 | 第31-32页 |
| 2.3 实验方法 | 第32-37页 |
| 2.3.1 菌种筛选 | 第32页 |
| 2.3.2 转化反应 | 第32-33页 |
| 2.3.3 分析方法 | 第33-37页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第37-44页 |
| 2.4.1 菌种的筛选 | 第37-38页 |
| 2.4.2 F12菌株的菌落形态 | 第38-39页 |
| 2.4.3 16SrDNA序列分析 | 第39-40页 |
| 2.4.4 薄层层析的产物鉴定 | 第40-41页 |
| 2.4.5 产物的旋光性鉴定 | 第41-42页 |
| 2.4.6 高效液相色谱鉴定结果 | 第42页 |
| 2.4.7 质谱的鉴定结果 | 第42-44页 |
| 2.5 本章小结 | 第44-45页 |
| 第三章 菌体生长及产酶特性 | 第45-71页 |
| 3.1 实验材料 | 第46页 |
| 3.1.1 菌种 | 第46页 |
| 3.1.2 培养基 | 第46页 |
| 3.2 实验方法 | 第46-51页 |
| 3.2.1 菌体培养方法 | 第46-47页 |
| 3.2.2 分析方法 | 第47-50页 |
| 3.2.3 主要试剂和仪器 | 第50-51页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第51-70页 |
| 3.3.1 假单胞菌F12在复合培养基和基本培养基中的生长与产生L-半胱氨酸能力 | 第51页 |
| 3.3.2 在简单培养基的生长与产酶关系 | 第51-53页 |
| 3.3.3 DL-ATC对合成L-半胱氨酸合成酶的诱导 | 第53-54页 |
| 3.3.4 增加初始培养基中DL-ATC浓度对产酶的影响 | 第54页 |
| 3.3.5 假单胞菌F12的5-L罐发酵 | 第54-56页 |
| 3.3.6 氨对生长的影响 | 第56-57页 |
| 3.3.7 氨存在下DL-ATC的代谢 | 第57-58页 |
| 3.3.8 氨对酶的诱导的影响 | 第58-59页 |
| 3.3.9 葡萄糖和(或)氨对酶的诱导 | 第59-64页 |
| 3.3.10 葡萄糖在诱导过程中的代谢 | 第64-68页 |
| 3.3.11 葡萄糖代谢物对L-半胱氨酸合成酶的影响 | 第68-70页 |
| 3.4 本章小结 | 第70-71页 |
| 第四章 生产L-半胱氨酸合成酶的两阶段培养 | 第71-88页 |
| 4.1 实验材料 | 第71页 |
| 4.1.1 菌种 | 第71页 |
| 4.1.2 培养基 | 第71页 |
| 4.2 实验方法 | 第71-73页 |
| 4.2.1 种子培养 | 第71-72页 |
| 4.2.2 摇瓶培养 | 第72页 |
| 4.2.3 5-L罐培养 | 第72页 |
| 4.2.4 分析方法 | 第72-73页 |
| 4.2.5 酶活的测定和定义 | 第73页 |
| 4.2.6 实验试剂和设备 | 第73页 |
| 4.3 实验结果及讨论 | 第73-86页 |
| 4.3.1 以葡萄糖为碳源生长的两阶段培养初步实验 | 第73-76页 |
| 4.3.2 指数流加葡萄糖生长的两阶段培养 | 第76-78页 |
| 4.3.3 菌体生长时间的缩短 | 第78-80页 |
| 4.3.4 以乙酸为碳源生长的两阶段培养 | 第80-86页 |
| 4.4 本章小结 | 第86-88页 |
| 第五章 影响L-半胱氨酸合成的反应条件 | 第88-98页 |
| 5.1 实验材料 | 第88-89页 |
| 5.1.1 菌种 | 第88页 |
| 5.1.2 培养基 | 第88-89页 |
| 5.2 实验方法 | 第89页 |
| 5.2.1 含酶细胞的获得 | 第89页 |
| 5.2.2 酶反应 | 第89页 |
| 5.2.3 酶活定义和测定 | 第89页 |
| 5.2.4 分析方法 | 第89页 |
| 5.2.5 主要试剂和设备 | 第89页 |
| 5.3 实验结果和讨论 | 第89-97页 |
| 5.3.1 L-半胱氨酸的合成 | 第89-90页 |
| 5.3.2 pH对转化的影响 | 第90-91页 |
| 5.3.3 温度对酶反应的影响 | 第91页 |
| 5.3.4 氨对酶反应的影响 | 第91-92页 |
| 5.3.5 空气的影响 | 第92-93页 |
| 5.3.6 中间产物的鉴定 | 第93-94页 |
| 5.3.7 SCC的自发水解和酶解 | 第94-95页 |
| 5.3.8 L-半胱氨酸对反应的抑制 | 第95页 |
| 5.3.9 以DL-ATC为底物的酶反应 | 第95-97页 |
| 5.4 本章小结 | 第97-98页 |
| 第六章 结论与展望 | 第98-101页 |
| 6.1 结论 | 第98-99页 |
| 6.2 主要创新点 | 第99页 |
| 6.3 展望 | 第99-101页 |
| 参考文献 | 第101-112页 |
| 博士期间发表文章 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
