| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 中英文缩写词对照表 | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 C6醛类风味物质概述 | 第12页 |
| 1.2 C6醛的生物合成 | 第12-13页 |
| 1.3 HPL概述 | 第13-14页 |
| 1.4 HPL反应的研究现状 | 第14-15页 |
| 1.4.1 间歇式反应 | 第14-15页 |
| 1.4.2 半连续化反应 | 第15页 |
| 1.4.3 连续化反应 | 第15页 |
| 1.5 HPL反应的影响因素 | 第15-17页 |
| 1.5.1 反应时间 | 第16页 |
| 1.5.2 反应 pH | 第16页 |
| 1.5.3 反应温度 | 第16页 |
| 1.5.4 底物浓度 | 第16页 |
| 1.5.5 酶用量 | 第16页 |
| 1.5.6 其他添加剂的影响 | 第16页 |
| 1.5.7 HPL 的分子结构 | 第16-17页 |
| 1.6 HPL的固定化 | 第17-18页 |
| 1.7 固定化酶的理性设计和制备 | 第18-20页 |
| 1.7.1 仿生固定化酶 | 第18页 |
| 1.7.2 定向固定化酶 | 第18-19页 |
| 1.7.3 稳定化-固定化 | 第19-20页 |
| 1.8 固定化对酶的影响 | 第20-21页 |
| 1.8.1 酶活力 | 第20-21页 |
| 1.8.2 酶稳定性 | 第21页 |
| 1.8.3 酶的选择性 | 第21页 |
| 1.8.4 酶的反应动力学参数 | 第21页 |
| 1.9 立题背景和意义 | 第21-22页 |
| 1.10 本课题研究的主要内容 | 第22-23页 |
| 第二章 膜结合态HPL与羟基磷灰石固定化HPL的研究 | 第23-34页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料和设备 | 第23-24页 |
| 2.2.1 材料与试剂 | 第23页 |
| 2.2.2 实验仪器与设备 | 第23-24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-26页 |
| 2.3.1 膜结合态 HPL 的提取 | 第24页 |
| 2.3.2 游离 HPL 的提取 | 第24页 |
| 2.3.3 羟基磷灰石固定化 HPL 的制备 | 第24页 |
| 2.3.4 蛋白分析 | 第24-25页 |
| 2.3.4.1 蛋白含量的测定（BCA 法） | 第24页 |
| 2.3.4.2 十二烷基硫酸钠凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第24-25页 |
| 2.3.5 HPL 活力的测定 | 第25页 |
| 2.3.6 游离 HPL、M-HPL 与 CHT-HPL 酶学性质的研究 | 第25-26页 |
| 2.3.6.1 pH 对 HPL 活力的影响 | 第25页 |
| 2.3.6.2 温度对 HPL 活力的影响 | 第25-26页 |
| 2.3.7 游离 HPL、M-HPL 与 CHT-HPL 的稳定性研究 | 第26页 |
| 2.3.7.1 热稳定性 | 第26页 |
| 2.3.7.2 操作稳定性 | 第26页 |
| 2.3.7.3 产物 2(E)-己烯醛对 HPL 的抑制作用 | 第26页 |
| 2.3.8 HPL 反应动力学参数的测定 | 第26页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第26-33页 |
| 2.4.1 CHT-HPL 的制备 | 第26-27页 |
| 2.4.2 M-HPL 与 CHT-HPL 的比较研究 | 第27-28页 |
| 2.4.3 反应 pH 对 HPL 活力的影响 | 第28-29页 |
| 2.4.4 反应温度对 HPL 活力的影响 | 第29-30页 |
| 2.4.5 HPL 的热稳定性 | 第30页 |
| 2.4.6 M-HPL 与 CHT-HPL 的操作稳定性 | 第30-32页 |
| 2.4.7 HPL 的反应动力学参数 | 第32-33页 |
| 2.5 本章小结 | 第33-34页 |
| 第三章 仿叶绿体膜疏水性的壳聚糖复合水凝胶固定化 HPL | 第34-48页 |
| 3.1 前言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料与设备 | 第34-35页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第34-35页 |
| 3.2.2 实验仪器与设备 | 第35页 |
| 3.3 实验方法 | 第35-37页 |
| 3.3.1 复合水凝胶微球的制备 | 第35页 |
| 3.3.2 复合水凝胶微球的表征 | 第35页 |
| 3.3.2.1 复合水凝胶微球的溶胀度 | 第35页 |
| 3.3.2.2 复合水凝胶微球的表面疏水性 | 第35页 |
| 3.3.3 HPL 固定化 | 第35-36页 |
| 3.3.3.1 戊二醛作为偶联剂 | 第36页 |
| 3.3.3.2 EDC 作为偶联剂 | 第36页 |
| 3.3.4 固定化 HPL 蛋白载量及酶活力的测定 | 第36页 |
| 3.3.5 固定化 HPL 最适反应条件、酶学性质及稳定性的测定 | 第36页 |
| 3.3.6 高浓度氢过氧化物的制备 | 第36页 |
| 3.3.7 固定化 HPL 间歇式反应用于 C6 醛的制备 | 第36-37页 |
| 3.3.7.1 反应时间对 C6 醛反应产率的影响 | 第37页 |
| 3.3.7.2 反应温度对 C6 醛反应产率的影响 | 第37页 |
| 3.3.7.3 pH 对 C6 醛反应产率的影响 | 第37页 |
| 3.3.7.4 底物浓度对 C6 醛反应产率的影响 | 第37页 |
| 3.3.7.5 加酶量对 C6 醛反应产率的影响 | 第37页 |
| 3.3.7.6 BHT 以及 DTT 浓度对 C6 醛反应产率的影响 | 第37页 |
| 3.3.8 反应产物的鉴定及定量分析 | 第37页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第37-47页 |
| 3.4.1 聚电解质种类以及活化方式对 HPL 共价结合固定化的影响 | 第37-39页 |
| 3.4.2 间隔臂偶联 CCH 的性质表征 | 第39-40页 |
| 3.4.2.1 间隔臂偶联 CCH 的溶胀性 | 第39页 |
| 3.4.2.2 间隔臂偶联 CCH 的表面疏水性 | 第39-40页 |
| 3.4.3 不同间隔臂对固定化 HPL 活力的影响 | 第40页 |
| 3.4.4 游离 HPL 和 CCH-HMDA-HPL 的酶学性质研究 | 第40-42页 |
| 3.4.4.1 反应 pH 和温度对 HPL 活力的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.4.2 游离 HPL 和 CCH-HMDA-HPL 底物特异性以及动力学反应参数 | 第41-42页 |
| 3.4.5 CCH-HMDA-HPL 的稳定性研究 | 第42-44页 |
| 3.4.5.1 CCH-HMDA-HPL 的热稳定性 | 第42-43页 |
| 3.4.5.2 CCH-HMDA-HPL 的操作稳定性 | 第43页 |
| 3.4.5.3 CCH-HMDA-HPL 的储藏稳定性 | 第43页 |
| 3.4.5.4 反应底物和产物对 HPL 的抑制作用 | 第43-44页 |
| 3.4.6 CCH-HMDA-HPL 间歇式反应用于 C6 醛的制备 | 第44-47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 仿叶绿体尺寸的纳米磁性微球固定化 HPL | 第48-62页 |
| 4.1 前言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料和设备 | 第48-49页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第48-49页 |
| 4.2.2 实验仪器与设备 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 纳米磁性微球（Fe_3O_4/GMA-HEMA-MMA）的制备 | 第49-50页 |
| 4.3.2 Fe_3O_4/GMA-HEMA-MMA 的表面结构及性质的表征 | 第50页 |
| 4.3.3 HPL 的固定化 | 第50-51页 |
| 4.3.3.1 HPL 和 NMP 比例对 HPL 固定化的影响 | 第51页 |
| 4.3.3.2 溶液离子强度对 HPL 固定化的影响 | 第51页 |
| 4.3.4 NMP-HPL 蛋白载量及酶活力的测定 | 第51页 |
| 4.3.5 NMP-HPL 最适反应条件、酶学性质及其稳定性的研究 | 第51页 |
| 4.3.6 NMP-HPL 的间歇式反应用于 C6 醛的制备 | 第51页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第51-61页 |
| 4.4.1 Fe_3O_4/GMA-HEMA-MMA 的表征 | 第51-53页 |
| 4.4.1.1 TEM 表征 | 第51-52页 |
| 4.4.1.2 FT-IR 表征 | 第52页 |
| 4.4.1.3 TGA 表征 | 第52-53页 |
| 4.4.2 聚合单体组成对 NMP 表面疏水性及固定化 HPL 活力的影响 | 第53-55页 |
| 4.4.3 HPL 固定化条件 | 第55-57页 |
| 4.4.3.1 HPL 和 HNMP 比例对其固定化的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.3.2 溶液离子强度对 HPL 固定化的影响 | 第56-57页 |
| 4.4.4 游离 HPL 和 HNMP-HPL 的酶学性质研究 | 第57-59页 |
| 4.4.4.1 反应 pH 和温度对 HPL 活力的影响 | 第57-58页 |
| 4.4.4.2 游离 HPL 和 HNMP-HPL 的底物特异性及反应动力学参数 | 第58页 |
| 4.4.4.3 游离 HPL 和 HNMP-HPL 的稳定性 | 第58-59页 |
| 4.4.5 HNMP-HPL 间歇式反应用于 C6 醛的制备 | 第59-61页 |
| 4.5 本章小结 | 第61-62页 |
| 第五章 固定化 HPL 连续化制备 C6 醛 | 第62-72页 |
| 5.1 前言 | 第62页 |
| 5.2 实验材料与设备 | 第62-63页 |
| 5.2.1 材料与试剂 | 第62页 |
| 5.2.2 实验仪器与设备 | 第62-63页 |
| 5.3 实验方法 | 第63-64页 |
| 5.3.1 填充床柱反应器的设计 | 第63页 |
| 5.3.2 13-HPOD/13-HPOT 浓度以及反应器内底物停留时间对 C6 醛产量的影响 | 第63-64页 |
| 5.3.3 C6 醛的连续化合成 | 第64页 |
| 5.3.4 产物的鉴定和产量测定 | 第64页 |
| 5.4 结果和讨论 | 第64-71页 |
| 5.4.1 CCH-HMDA-HPL 的制备 | 第64页 |
| 5.4.2 13-HPOD 浓度以及停留时间对己醛单位体积产量的影响 | 第64-66页 |
| 5.4.3 13-HPOT 浓度以及反应器内底物停留时间对己醛产量的影响 | 第66-67页 |
| 5.4.4 CCH-HMDA-HPL 用量对 C6 醛单位体积产量的影响 | 第67-69页 |
| 5.4.5 CCH-HMDA-HPL 用于 C6 醛的连续化合成 | 第69-71页 |
| 5.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 第六章 载体性质对固定化 HPL 活力及反应动力学参数的影响机制 | 第72-83页 |
| 6.1 前言 | 第72页 |
| 6.2 实验材料与设备 | 第72页 |
| 6.2.1 材料与试剂 | 第72页 |
| 6.2.2 实验仪器与设备 | 第72页 |
| 6.3 实验方法 | 第72-73页 |
| 6.3.1 不同蛋白载量的固定化 HPL 活力测定 | 第72-73页 |
| 6.3.2 不同蛋白载量的固定化 HPL 反应动力学参数的测定 | 第73页 |
| 6.3.3 固定化 HPL 二级结构的测定 | 第73页 |
| 6.3.4 CHT-HPL 反应过程中的底物扩散限制 | 第73页 |
| 6.3.5 CCH-HMDA-HPL 以及 HNMP-HPL 的多层固定化效应 | 第73页 |
| 6.4 结果和讨论 | 第73-82页 |
| 6.4.1 载体类型及其不同蛋白载量对固定化 HPL 活力及其反应动力学参数的影响 | 第73-76页 |
| 6.4.2 游离 HPL 和固定化 HPL 二级结构的测定 | 第76-78页 |
| 6.4.3 CHT-HPL 反应过程中的质量传递限制 | 第78-80页 |
| 6.4.4 CHT-HPL 反应体系中质量传递限制的进一步确认 | 第80-81页 |
| 6.4.5 CCH-HMDA-HPL 以及 NMP-HPL 的多层固定化效应 | 第81-82页 |
| 6.5 结论 | 第82-83页 |
| 主要结论与展望 | 第83-85页 |
| 一、主要结论 | 第83-84页 |
| 二、展望 | 第84-85页 |
| 论文创新点 | 第85-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-96页 |
| 附录 | 第96-100页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第100页 |
