摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-20页 |
1.1 植物病原卵菌效应蛋白 | 第10-14页 |
1.1.1 卵菌中效应蛋白的鉴定 | 第10-11页 |
1.1.2 卵菌胞外效应蛋白的种类及简介 | 第11-13页 |
1.1.3 卵菌胞质效应蛋白的种类及简介 | 第13-14页 |
1.2 坏死和乙烯诱导蛋白类似蛋白(NLP) | 第14-16页 |
1.2.1 NLP 的发现与存在 | 第14页 |
1.2.2 NLP 的结构特点 | 第14-15页 |
1.2.3 NLP 蛋白的活性 | 第15页 |
1.2.4 致病疫霉 NPP1-like 家族 | 第15-16页 |
1.3 PcF 毒性蛋白家族 | 第16-17页 |
1.3.1 PcF 的初次发现 | 第16页 |
1.3.2 致病疫霉 PcF/SCR-like 家族 | 第16-17页 |
1.4 农杆菌介导的瞬时表达体系 | 第17-18页 |
1.5 大肠杆菌表达系统 | 第18-19页 |
1.5.1 外源基因本身特性对表达的影响 | 第18页 |
1.5.2 表达载体对表达的影响 | 第18-19页 |
1.5.3 培养条件对表达的影响 | 第19页 |
1.6 本研究的目的意义 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-33页 |
2.1 材料 | 第20-21页 |
2.1.1 致病疫霉菌株 | 第20页 |
2.1.2 菌株与质粒 | 第20页 |
2.1.3 工具酶及主要试剂 | 第20页 |
2.1.4 主要仪器 | 第20页 |
2.1.5 培养基 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-33页 |
2.2.1 真核表达载体构建及瞬时表达 | 第21-26页 |
2.2.2 PiNLP30 基因体外突变 | 第26-28页 |
2.2.3 PiNLP30 表达模式分析 | 第28-29页 |
2.2.4 基因原核表达载体构建及表达 | 第29-33页 |
3 结果与分析 | 第33-48页 |
3.1 真核表达载体的构建及瞬时表达 | 第33-41页 |
3.1.1 基因克隆及序列分析 | 第33-38页 |
3.1.2 农杆菌瞬时表达 | 第38-41页 |
3.2 PiNLP30 基因体外突变及瞬时表达 | 第41-44页 |
3.2.1 PiNLP30 基因活性位点突变 | 第41页 |
3.2.2 突变基因真核表达载体构建及农杆菌转化 | 第41-42页 |
3.2.3 突变基因农杆菌瞬时表达 | 第42-44页 |
3.3 PiNLP30 基因表达模式分析 | 第44-45页 |
3.4 原核表达载体构建及诱导表达 | 第45-48页 |
3.4.1 PiNLP9、PiNLP30 基因原核表达载体构建 | 第45-46页 |
3.4.2 重组质粒诱导表达分析 | 第46-47页 |
3.4.3 PiNLP30 融合蛋白的纯化 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
4.1 NLP 基因功能分析 | 第48-49页 |
4.2 PiNLP30 基因在寄主病原互作中的表达模式 | 第49页 |
4.3 PcF/SCR-like 基因功能比较分析 | 第49页 |
4.4 PiNLP9、PiNLP30 基因原核诱导表达 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-59页 |
附录 | 第59-61页 |
在读期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62-63页 |
致谢 | 第63-64页 |