| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第10-15页 |
| 1.1 研究背景与意义 | 第10页 |
| 1.2 昆虫病原真菌研究现状 | 第10页 |
| 1.3 绿僵菌研究现状 | 第10页 |
| 1.4 昆虫病原真菌致病机理的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.5 钙离子通道蛋白Mid1的相关研究进展 | 第12-14页 |
| 1.5.1 钙离子 | 第12页 |
| 1.5.2 钙离子通道 | 第12-13页 |
| 1.5.3 Mid1钙离子通道蛋白 | 第13-14页 |
| 1.6 立题依据及研究目的 | 第14页 |
| 1.7 本研究创新之处 | 第14-15页 |
| 2 绿僵菌Mid1基因的功能研究 | 第15-50页 |
| 2.1 主要材料 | 第15-18页 |
| 2.1.1 供试菌株和昆虫 | 第15页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要培养基 | 第16页 |
| 2.1.4 主要实验配置溶液 | 第16-17页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第17-18页 |
| 2.1.6 主要应用软件 | 第18页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第18-32页 |
| 2.2.1 Mid1基因生物信息学分析 | 第18-19页 |
| 2.2.2 构建Mid1敲除回复菌株 | 第19-22页 |
| 2.2.3 农杆菌感受态细胞的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.4 转化农杆菌 | 第23页 |
| 2.2.5 农杆菌转化绿僵菌 | 第23页 |
| 2.2.6 初步筛选验证敲除菌株和回复菌株 | 第23-26页 |
| 2.2.7 微量提取真菌基因组 | 第26-27页 |
| 2.2.8 大量提取真菌基因组 | 第27页 |
| 2.2.9 RNA的提取方法 | 第27-28页 |
| 2.2.10 qRT-PCR检测Mid1的表达模式 | 第28-29页 |
| 2.2.11 绿僵菌毒力分析 | 第29-30页 |
| 2.2.12 绿僵菌Mid1生长特性分析 | 第30-31页 |
| 2.2.13 Mid1对金属离子的影响 | 第31-32页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第32-45页 |
| 2.3.1 Mid1生物信息学分析 | 第32-33页 |
| 2.3.2 Mid1敲除和回复载体的构建及验证 | 第33-34页 |
| 2.3.3 Mid1表达模式 | 第34-35页 |
| 2.3.4 Mid1对绿僵菌毒力的影响 | 第35-40页 |
| 2.3.5 Mid1对生长特性及抗逆性的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.6 金属离子对Mid1的影响 | 第41-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-50页 |
| 2.4.1 Mid1影响绿僵菌毒力 | 第46-47页 |
| 2.4.2 ΔMid1对生长特性的影响 | 第47-48页 |
| 2.4.3 Mid1调控钙离子运输 | 第48-49页 |
| 2.4.4 Mid1具有金属敏感性 | 第49-50页 |
| 3 主要结论和后续工作建议 | 第50-51页 |
| 3.1 主要研究结论 | 第50页 |
| 3.2 后续实验建议 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-59页 |