| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-24页 |
| 1.1 手性环氧氯丙烷 | 第12-16页 |
| 1.1.1 手性环氧氯丙烷简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 手性环氧氯丙烷的制备方法 | 第13-16页 |
| 1.1.2.1 化学法 | 第13页 |
| 1.1.2.2 生物法 | 第13-16页 |
| 1.2 环氧化物水解酶 | 第16-22页 |
| 1.2.1 环氧化物水解酶的简介 | 第16页 |
| 1.2.2 环氧化物水解酶的来源 | 第16-17页 |
| 1.2.3 环氧化物水解酶的酶学性质 | 第17-19页 |
| 1.2.4 环氧化物水解酶的结构特征和催化机理 | 第19-20页 |
| 1.2.5 环氧化物水解酶的应用 | 第20-22页 |
| 1.2.5.1 动力学拆分 | 第20-21页 |
| 1.2.5.2 单酶对映汇聚 | 第21页 |
| 1.2.5.3 双酶选择性互补 | 第21-22页 |
| 1.3 本论文研究意义和内容 | 第22-24页 |
| 1.3.1 本论文的研究意义 | 第22页 |
| 1.3.2 本论文的研究内容 | 第22-24页 |
| 第二章 离子液体/缓冲液两相体系中全细胞催化拆分环氧氯丙烷 | 第24-48页 |
| 2.1 引言 | 第24-26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.2.1 菌株 | 第26-27页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.3 仪器设备 | 第28-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.3.1 培养基配制 | 第29页 |
| 2.3.2 微生物培养 | 第29页 |
| 2.3.3 分析方法 | 第29-31页 |
| 2.3.4 细胞生长曲线的绘制 | 第31页 |
| 2.3.5 分配系数的测定 | 第31-32页 |
| 2.3.6 深共熔试剂的合成 | 第32页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第32-45页 |
| 2.4.1 最佳离子液体的选择 | 第32-35页 |
| 2.4.2 两相体积比对两相体系中细胞催化ECH反应的影响 | 第35-36页 |
| 2.4.3 温度对两相体系中细胞催化ECH反应的影响 | 第36-37页 |
| 2.4.4 缓冲液pH对两相体系中细胞催化ECH反应的影响 | 第37-38页 |
| 2.4.5 两相体系中底物自发水解率 | 第38-40页 |
| 2.4.6 底物浓度对两相体系中细胞催化ECH反应的影响 | 第40-41页 |
| 2.4.7 产物浓度对两相体系中细胞催化ECH反应的影响 | 第41-42页 |
| 2.4.8 [BMIM][PF_6]/[ChCl][U]/缓冲液体系中细胞催化ECH反应 | 第42-45页 |
| 2.4.8.1 深共熔试剂的筛选 | 第42-43页 |
| 2.4.8.2 [ChCl][U]浓度对催化反应的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.8.3 [BMIM][PF_6]/[ChCl][U]/缓冲液体系中细胞催化ECH反应 | 第44-45页 |
| 2.4.9 [BMIM][PF_6]/[ChCl][U]/缓冲液体系中细胞催化ECH反应进程曲线 | 第45页 |
| 2.5 本章小结 | 第45-48页 |
| 第三章 环氧化物水解酶的化学糖基化修饰 | 第48-62页 |
| 3.1 引言 | 第48-49页 |
| 3.2 实验材料 | 第49-50页 |
| 3.2.1 菌株 | 第49页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第49-50页 |
| 3.2.3 仪器设备 | 第50页 |
| 3.3 实验方法 | 第50-54页 |
| 3.3.1 培养基配制 | 第50页 |
| 3.3.2 微生物培养 | 第50页 |
| 3.3.3 分析方法 | 第50页 |
| 3.3.4 环氧化物水解酶的分离纯化 | 第50-51页 |
| 3.3.5 蛋白含量的测定 | 第51-52页 |
| 3.3.6 化学糖基化修饰方法 | 第52-53页 |
| 3.3.6.1 还原烷基化法 | 第52-53页 |
| 3.3.6.2 碳二亚胺偶合法 | 第53页 |
| 3.3.6.3 非共价结合法 | 第53页 |
| 3.3.7 酶的半衰期测定 | 第53-54页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第54-60页 |
| 3.4.1 环氧化物水解酶的分离纯化 | 第54-55页 |
| 3.4.2 环氧化物水解酶的糖基化修饰 | 第55页 |
| 3.4.3 糖基化环氧化物水解酶的热稳定性 | 第55-57页 |
| 3.4.4 糖基化环氧化物水解酶的pH稳定性 | 第57-58页 |
| 3.4.5 SDS对糖基化环氧化物水解酶活力的影响 | 第58-59页 |
| 3.4.6 [BMIM][PF_6]/缓冲液两相体系中糖基化环氧化物水解酶拆分ECH的研究 | 第59-60页 |
| 3.5 本章小节 | 第60-62页 |
| 第四章 环氧化物水解酶的细胞固定化研究 | 第62-78页 |
| 4.1 引言 | 第62-63页 |
| 4.2 实验材料 | 第63页 |
| 4.2.1 菌株 | 第63页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第63页 |
| 4.2.3 仪器设备 | 第63页 |
| 4.3 实验方法 | 第63-65页 |
| 4.3.1 培养基配制 | 第63页 |
| 4.3.2 微生物培养 | 第63页 |
| 4.3.3 分析方法 | 第63-64页 |
| 4.3.4 固定化细胞方法 | 第64-65页 |
| 4.3.4.1 海藻酸钠包埋法 | 第64页 |
| 4.3.4.2 聚乙烯醇包埋法 | 第64页 |
| 4.3.4.3 卡拉胶包埋法 | 第64-65页 |
| 4.3.4.4 聚乙烯亚胺-戊二醛复合交联法 | 第65页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第65-75页 |
| 4.4.1 固定化细胞载体的选择 | 第65-66页 |
| 4.4.2 聚乙烯亚胺-戊二醛复合交联法制备固定化细胞的研究 | 第66-69页 |
| 4.4.2.1 聚乙烯亚胺浓度对固定化细胞制备的影响 | 第66-67页 |
| 4.4.2.2 戊二醛浓度对固定化细胞制备的影响 | 第67-68页 |
| 4.4.2.3 硅藻土浓度对固定化细胞制备的影响 | 第68-69页 |
| 4.4.3 固定化细胞催化反应的最适温度 | 第69-70页 |
| 4.4.4 固定化细胞催化反应的最适pH | 第70-71页 |
| 4.4.5 固定化细胞的热稳定性 | 第71-72页 |
| 4.4.6 固定化细胞的pH稳定性 | 第72-73页 |
| 4.4.7 固定化细胞的操作稳定性 | 第73-74页 |
| 4.4.8 水相中固定化细胞拆分ECH的研究 | 第74-75页 |
| 4.4.9 [BMIM][PF_6]/缓冲液两相体系中固定化细胞拆分ECH的研究 | 第75页 |
| 4.5 本章小结 | 第75-78页 |
| 第五章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 5.1 结论 | 第78-79页 |
| 5.2 展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第88-90页 |
| 致谢 | 第90页 |
