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副溶血弧菌调控蛋白CalR功能的初步研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 绪论第12-24页
    1.1 副溶血弧菌的生物学特性第12页
        1.1.1 形态染色第12页
        1.1.2 培养特性第12页
        1.1.3 生化反应第12页
    1.2 副溶血弧菌毒力研究概述第12-17页
        1.2.1 耐热直接溶血素(TDH)和相关溶血素(TRH)第13-14页
        1.2.2 III型分泌系统第14-15页
        1.2.3 VI型分泌系统第15-16页
        1.2.4 多种酶类第16页
        1.2.5 粘附因子第16-17页
        1.2.6 不耐热的溶血素第17页
    1.3 弧菌生物膜形成第17-20页
        1.3.1 鞭毛第17-19页
        1.3.2 IV型菌毛(type IV pilus)第19-20页
        1.3.3 多糖第20页
    1.4 细菌密度感应系统(Quorum sensing,QS)第20-21页
    1.5 转录调控蛋白Cal R的研究进展第21-22页
    1.6 本文研究目的和路线第22-24页
第二章 材料方法第24-43页
    2.1 实验材料第24-30页
        2.1.1 菌株和质粒第24页
        2.1.2 主要试剂第24页
        2.1.3 主要溶液第24-28页
        2.1.4 主要仪器第28-29页
        2.1.5 本文引物汇总第29-30页
    2.2 实验方法第30-43页
        2.2.1 cal R基因的敲除第30-32页
        2.2.2 cal R回补株的构建第32-33页
        2.2.3 表型实验第33-36页
        2.2.4 Lac Z报告基因融合实验第36-39页
        2.2.5 重组蛋白Cal R(Cal Rhis6)的克隆表达第39-43页
第三章 实验结果与讨论第43-58页
    3.1 cal R突变株和回补株的构建与验证第43-47页
        3.1.1 cal R突变株的构建第43-44页
        3.1.2 回补株构建第44-46页
        3.1.3 非极性突变株的验证第46-47页
    3.2 表型实验和相关基因Lac Z实验第47-53页
        3.2.1 菌株对应激条件的适应性第47-48页
        3.2.2 菌落透明度第48-49页
        3.2.3 菌株动力实验(Swimming和Swarming)第49页
        3.2.4 菌株生物膜形成实验第49-51页
        3.2.5 Cal R对菌株溶血活性调控第51-52页
        3.2.6 Cal R对菌株细胞毒调控第52-53页
    3.3 Cal Rhis6蛋白的表达第53-55页
        3.3.1 目的基因片段的扩增第53页
        3.3.2 Cal Rhis6蛋白表达载体重组克隆的鉴定第53-54页
        3.3.3 Cal Rhis6蛋白预表达与纯化第54-55页
    3.4 讨论第55-58页
        3.4.1 cal R突变株和回补株的构建第55-56页
        3.4.2 Cal R对菌株表型的调控第56-58页
第四章 主要结论及展望第58-59页
    4.1 主要结论第58页
    4.2 下一步的研究方向第58-59页
参考文献第59-69页
致谢第69-71页
攻读硕士学位期间发表的文章第71页

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