摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 副溶血弧菌的生物学特性 | 第12页 |
1.1.1 形态染色 | 第12页 |
1.1.2 培养特性 | 第12页 |
1.1.3 生化反应 | 第12页 |
1.2 副溶血弧菌毒力研究概述 | 第12-17页 |
1.2.1 耐热直接溶血素(TDH)和相关溶血素(TRH) | 第13-14页 |
1.2.2 III型分泌系统 | 第14-15页 |
1.2.3 VI型分泌系统 | 第15-16页 |
1.2.4 多种酶类 | 第16页 |
1.2.5 粘附因子 | 第16-17页 |
1.2.6 不耐热的溶血素 | 第17页 |
1.3 弧菌生物膜形成 | 第17-20页 |
1.3.1 鞭毛 | 第17-19页 |
1.3.2 IV型菌毛(type IV pilus) | 第19-20页 |
1.3.3 多糖 | 第20页 |
1.4 细菌密度感应系统(Quorum sensing,QS) | 第20-21页 |
1.5 转录调控蛋白Cal R的研究进展 | 第21-22页 |
1.6 本文研究目的和路线 | 第22-24页 |
第二章 材料方法 | 第24-43页 |
2.1 实验材料 | 第24-30页 |
2.1.1 菌株和质粒 | 第24页 |
2.1.2 主要试剂 | 第24页 |
2.1.3 主要溶液 | 第24-28页 |
2.1.4 主要仪器 | 第28-29页 |
2.1.5 本文引物汇总 | 第29-30页 |
2.2 实验方法 | 第30-43页 |
2.2.1 cal R基因的敲除 | 第30-32页 |
2.2.2 cal R回补株的构建 | 第32-33页 |
2.2.3 表型实验 | 第33-36页 |
2.2.4 Lac Z报告基因融合实验 | 第36-39页 |
2.2.5 重组蛋白Cal R(Cal Rhis6)的克隆表达 | 第39-43页 |
第三章 实验结果与讨论 | 第43-58页 |
3.1 cal R突变株和回补株的构建与验证 | 第43-47页 |
3.1.1 cal R突变株的构建 | 第43-44页 |
3.1.2 回补株构建 | 第44-46页 |
3.1.3 非极性突变株的验证 | 第46-47页 |
3.2 表型实验和相关基因Lac Z实验 | 第47-53页 |
3.2.1 菌株对应激条件的适应性 | 第47-48页 |
3.2.2 菌落透明度 | 第48-49页 |
3.2.3 菌株动力实验(Swimming和Swarming) | 第49页 |
3.2.4 菌株生物膜形成实验 | 第49-51页 |
3.2.5 Cal R对菌株溶血活性调控 | 第51-52页 |
3.2.6 Cal R对菌株细胞毒调控 | 第52-53页 |
3.3 Cal Rhis6蛋白的表达 | 第53-55页 |
3.3.1 目的基因片段的扩增 | 第53页 |
3.3.2 Cal Rhis6蛋白表达载体重组克隆的鉴定 | 第53-54页 |
3.3.3 Cal Rhis6蛋白预表达与纯化 | 第54-55页 |
3.4 讨论 | 第55-58页 |
3.4.1 cal R突变株和回补株的构建 | 第55-56页 |
3.4.2 Cal R对菌株表型的调控 | 第56-58页 |
第四章 主要结论及展望 | 第58-59页 |
4.1 主要结论 | 第58页 |
4.2 下一步的研究方向 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-69页 |
致谢 | 第69-71页 |
攻读硕士学位期间发表的文章 | 第71页 |