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粘蛋白型O-聚糖对人结直肠癌细胞的生物学行为的影响

中文摘要第7-11页
英文摘要第11-14页
前言第15-17页
第一部分 制备稳定无Tn抗原暴露的人结直肠癌细胞株第17-34页
    一.材料和方法第17-29页
        1. 材料第17-20页
            1.1 细胞第17页
            1.2 主要试剂第17-19页
            1.3 主要器材、仪器第19-20页
        2. 细胞培养第20-21页
            2.1 细胞复苏第20页
            2.2 细胞传代第20-21页
            2.3 细胞计数第21页
            2.4 细胞冻存第21页
        3. 慢病毒感染异常O-型糖基化的人结肠癌细胞株LS174T(Tn+)第21-22页
            3.1 瞬时感染Cosmc/control第21-22页
            3.2 筛选稳定感染细胞株第22页
        4. Real-time PCR检测感染细胞的Cosmc转录水平第22-24页
            4.1 Trizol法常规提取总RNA第22-23页
            4.2 cDNA第一链合成第23-24页
            4.3 Real-time PCR第24页
        5. Western blot检测感染细胞的Cosmc蛋白水平第24-28页
            5.1 提取细胞内蛋白第24-25页
            5.2 BCA法测定蛋白总浓度第25-26页
            5.3 分离胶与浓缩胶的配置第26-27页
            5.4 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳第27页
            5.5 Western印迹法印迹第27页
            5.6 封闭和杂交第27-28页
            5.7 扫膜显影及记录第28页
        6. 流式细胞仪检测稳转细胞株表面Tn抗原表达变化第28-29页
        7. 统计方法第29页
    五.结果第29-31页
    六.讨论第31-33页
    七.小结第33-34页
第二部分 粘蛋白型O-聚糖对结直肠癌细胞生物学特性的影响第34-44页
    一.材料和方法第34-37页
        1. 材料第34页
            1.1 细胞第34页
            1.2 主要试剂第34页
            1.3 主要器材、仪器第34页
        2. CCK8细胞增殖实验第34-35页
        3. PE Annexin V/7-AAD细胞凋亡实验第35页
        4. 细胞划痕实验第35-36页
        5. Transwell细胞迁移实验第36页
        6. Transwell细胞侵袭实验第36-37页
        7. 统计方法第37页
    二.结果第37-42页
    三.讨论第42-43页
    四.小结第43-44页
全文讨论第44-45页
全文小结第45-46页
参考文献第46-49页
文献综述第49-58页
    参考文献第52-58页
附录第58-60页
攻读学位期间发表论文情况第60-61页
致谢第61-62页
个人简历第62页

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