中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第13-21页 |
1 柑橘全爪螨为害现状及抗性问题 | 第13页 |
2 昆虫(螨)抗性机理 | 第13-14页 |
3 羧酸酯酶及其介导的昆虫(螨)抗药性 | 第14-16页 |
3.1 羧酸酯酶的分类 | 第14-15页 |
3.2 羧酸酯酶介导昆虫(螨)抗药性产生的作用机制 | 第15-16页 |
4 昆虫杆状病毒表达系统及其在基因功能研究中的应用 | 第16-18页 |
5 RNA干扰技术及其在基因功能研究中的应用 | 第18-21页 |
引言 | 第21-23页 |
第二章 TPP对甲氰菊酯的增效作用研究 | 第23-27页 |
1 材料与方法 | 第23-24页 |
1.1 供试螨源 | 第23页 |
1.2 主要仪器与试剂 | 第23页 |
1.3 试验方法 | 第23-24页 |
2 结果与分析 | 第24-25页 |
3 小结 | 第25-27页 |
第三章 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因时空表达模式解析 | 第27-37页 |
1 材料与方法 | 第27-31页 |
1.1 供试螨源 | 第27页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第27-28页 |
1.3 试螨处理 | 第28页 |
1.4 总RNA提取 | 第28-29页 |
1.5 第一链cDNA合成 | 第29-30页 |
1.6 定量PCR引物设计 | 第30页 |
1.7 定量PCR | 第30-31页 |
1.8 数据分析 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-35页 |
2.1 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因在北碚种群的表达模式 | 第31-32页 |
2.2 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因在奉节种群的表达模式 | 第32-33页 |
2.3 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因在万州种群的表达模式 | 第33页 |
2.4 甲氰菊酯胁迫后柑橘全爪螨羧酸酯酶基因的表达模式解析 | 第33-35页 |
3 小结 | 第35-37页 |
第四章 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因的真核表达研究 | 第37-51页 |
1 材料与方法 | 第37-46页 |
1.1 主要试剂及仪器 | 第37-38页 |
1.2 细胞培养 | 第38页 |
1.3 PCR扩增及pMD-19T Simple载体构建 | 第38-40页 |
1.4 杆状病毒表达载体构建 | 第40-42页 |
1.5 细胞转染及病毒株获取 | 第42-43页 |
1.6 PcE1、PcE7和PcE9重组蛋白表达 | 第43页 |
1.7 PcE1、PcE7和PcE9表达产物酶活性测定 | 第43-44页 |
1.8 羧酸酯酶活性测定 | 第44-45页 |
1.9 细胞毒性测定 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-49页 |
2.1 PCR扩增及pMD-19T Simple载体构建 | 第46页 |
2.2 pFastBac- PcEs重组质粒的构建 | 第46-47页 |
2.3 Bacmid- PcEs重组杆粒的构建 | 第47-48页 |
2.4 重组杆粒对昆虫细胞的转染 | 第48页 |
2.5 PcE1、PcE7和PcE9重组蛋白的酶活性测定 | 第48-49页 |
2.6 细胞毒性测定 | 第49页 |
3 小结 | 第49-51页 |
第五章 基于RNAi的柑橘全爪螨羧酸酯酶基因功能分析 | 第51-59页 |
1 材料与方法 | 第51-55页 |
1.1 供试虫源 | 第51页 |
1.2 主要试剂及仪器 | 第51页 |
1.3 dsRNA引物设计 | 第51-52页 |
1.4 dsRNA合成 | 第52-55页 |
1.5 dsRNA检测 | 第55页 |
1.6 RNAi处理 | 第55页 |
1.7 沉默效率的检测 | 第55页 |
1.8 生物测定 | 第55页 |
2 结果与分析 | 第55-57页 |
2.1 dsRNA合成 | 第55页 |
2.2 沉默效率检测 | 第55-56页 |
2.3 甲氰菊酯生物测定 | 第56-57页 |
3 小结 | 第57-59页 |
第六章 主要结果及研究展望 | 第59-61页 |
1 主要结果 | 第59-60页 |
2 研究展望 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-71页 |
在读期间发表论文情况 | 第71-73页 |
致谢 | 第73-74页 |