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柑橘全爪羧酸酯酶对甲氰菊酯解毒代谢功能的研究

中文摘要第8-10页
Abstract第10-12页
第一章 文献综述第13-21页
    1 柑橘全爪螨为害现状及抗性问题第13页
    2 昆虫(螨)抗性机理第13-14页
    3 羧酸酯酶及其介导的昆虫(螨)抗药性第14-16页
        3.1 羧酸酯酶的分类第14-15页
        3.2 羧酸酯酶介导昆虫(螨)抗药性产生的作用机制第15-16页
    4 昆虫杆状病毒表达系统及其在基因功能研究中的应用第16-18页
    5 RNA干扰技术及其在基因功能研究中的应用第18-21页
引言第21-23页
第二章 TPP对甲氰菊酯的增效作用研究第23-27页
    1 材料与方法第23-24页
        1.1 供试螨源第23页
        1.2 主要仪器与试剂第23页
        1.3 试验方法第23-24页
    2 结果与分析第24-25页
    3 小结第25-27页
第三章 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因时空表达模式解析第27-37页
    1 材料与方法第27-31页
        1.1 供试螨源第27页
        1.2 主要试剂及仪器第27-28页
        1.3 试螨处理第28页
        1.4 总RNA提取第28-29页
        1.5 第一链cDNA合成第29-30页
        1.6 定量PCR引物设计第30页
        1.7 定量PCR第30-31页
        1.8 数据分析第31页
    2 结果与分析第31-35页
        2.1 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因在北碚种群的表达模式第31-32页
        2.2 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因在奉节种群的表达模式第32-33页
        2.3 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因在万州种群的表达模式第33页
        2.4 甲氰菊酯胁迫后柑橘全爪螨羧酸酯酶基因的表达模式解析第33-35页
    3 小结第35-37页
第四章 柑橘全爪螨羧酸酯酶基因的真核表达研究第37-51页
    1 材料与方法第37-46页
        1.1 主要试剂及仪器第37-38页
        1.2 细胞培养第38页
        1.3 PCR扩增及pMD-19T Simple载体构建第38-40页
        1.4 杆状病毒表达载体构建第40-42页
        1.5 细胞转染及病毒株获取第42-43页
        1.6 PcE1、PcE7和PcE9重组蛋白表达第43页
        1.7 PcE1、PcE7和PcE9表达产物酶活性测定第43-44页
        1.8 羧酸酯酶活性测定第44-45页
        1.9 细胞毒性测定第45-46页
    2 结果与分析第46-49页
        2.1 PCR扩增及pMD-19T Simple载体构建第46页
        2.2 pFastBac- PcEs重组质粒的构建第46-47页
        2.3 Bacmid- PcEs重组杆粒的构建第47-48页
        2.4 重组杆粒对昆虫细胞的转染第48页
        2.5 PcE1、PcE7和PcE9重组蛋白的酶活性测定第48-49页
        2.6 细胞毒性测定第49页
    3 小结第49-51页
第五章 基于RNAi的柑橘全爪螨羧酸酯酶基因功能分析第51-59页
    1 材料与方法第51-55页
        1.1 供试虫源第51页
        1.2 主要试剂及仪器第51页
        1.3 dsRNA引物设计第51-52页
        1.4 dsRNA合成第52-55页
        1.5 dsRNA检测第55页
        1.6 RNAi处理第55页
        1.7 沉默效率的检测第55页
        1.8 生物测定第55页
    2 结果与分析第55-57页
        2.1 dsRNA合成第55页
        2.2 沉默效率检测第55-56页
        2.3 甲氰菊酯生物测定第56-57页
    3 小结第57-59页
第六章 主要结果及研究展望第59-61页
    1 主要结果第59-60页
    2 研究展望第60-61页
参考文献第61-71页
在读期间发表论文情况第71-73页
致谢第73-74页

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