| 摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 1 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 问题的提出及研究意义 | 第12-17页 |
| 1.1.1 问题的提出 | 第12-17页 |
| 1.1.2 研究意义 | 第17页 |
| 1.2 本文研究目的和研究内容 | 第17-20页 |
| 1.2.1 本文研究目的 | 第17-18页 |
| 1.2.2 本文研究的主要内容 | 第18页 |
| 1.2.3 本文研究的主要创新点 | 第18-20页 |
| 2 MSCS分离、培养和多向分化潜能的鉴定 | 第20-30页 |
| 2.1 引言 | 第20-22页 |
| 2.2 材料与试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.1 实验动物 | 第22页 |
| 2.2.2 实验仪器及耗材 | 第22页 |
| 2.2.3 实验试剂 | 第22-23页 |
| 2.2.4 主要试剂的配制 | 第23页 |
| 2.3 实验方法 | 第23-25页 |
| 2.3.1 全骨髓贴壁法分离提取原代大鼠骨髓MSCs | 第23-24页 |
| 2.3.2 MSCs的培养、纯化和传代 | 第24页 |
| 2.3.3 MSCs多向分化潜能的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.4 实验结果 | 第25-27页 |
| 2.4.1 MSCs分离和培养 | 第25-26页 |
| 2.4.2 MSCs多向分化潜能的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.5 讨论与分析 | 第27-28页 |
| 2.6 本章小结 | 第28-30页 |
| 3 制备和表征HMGB 1 修饰PLLA/PCL纳米纤维骨组织工程支架 | 第30-42页 |
| 3.1 引言 | 第30-32页 |
| 3.2 材料与试剂 | 第32-33页 |
| 3.2.1 实验仪器与耗材 | 第32-33页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第33页 |
| 3.2.3 主要试剂的配制 | 第33页 |
| 3.3 实验方法 | 第33-35页 |
| 3.3.1 静电纺丝纳米纤维薄膜的制备 | 第33-34页 |
| 3.3.2 扫描电子显微镜(Scanning electron microscopy, SEM)表征 | 第34页 |
| 3.3.3 纳米纤维薄膜的力学性能测试 | 第34页 |
| 3.3.4 HMGB 1 修饰纳米纤维支架的制备 | 第34-35页 |
| 3.3.5 HMGB 1 修饰纳米纤维支架的表征 | 第35页 |
| 3.4 实验结果 | 第35-39页 |
| 3.4.1 静电纺丝纳米纤维薄膜的制备 | 第35页 |
| 3.4.2 SEM表征结果 | 第35-36页 |
| 3.4.3 纳米纤维薄膜的力学性能测试 | 第36-37页 |
| 3.4.4 HMGB 1 修饰纳米纤维支架的制备和表征 | 第37-39页 |
| 3.5 讨论与分析 | 第39页 |
| 3.6 本章小结 | 第39-42页 |
| 4 体外研究HMGB 1 修饰骨组织工程支架对MSCS的影响 | 第42-60页 |
| 4.1 引言 | 第42页 |
| 4.2 材料与试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.1 实验仪器及耗材 | 第42页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第42-43页 |
| 4.2.3 主要试剂的配制 | 第43页 |
| 4.3 实验方法 | 第43-47页 |
| 4.3.1 实验分组 | 第43页 |
| 4.3.2 MTS测量细胞增殖 | 第43页 |
| 4.3.3 Calcein AM/PI检测细胞存活 | 第43-44页 |
| 4.3.4 MSCs粘附和细胞形态 | 第44-45页 |
| 4.3.5 实时定量PCR (qRT-PCR)检测不同支架对MSCs分化的影响 | 第45-46页 |
| 4.3.6 不同支架对MSCs的碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)表达的影响 | 第46页 |
| 4.3.7 茜素红S染色检测不同支架对MSCs钙结节的影响 | 第46-47页 |
| 4.4 实验结果 | 第47-58页 |
| 4.4.1 MTS测量细胞增殖 | 第47-48页 |
| 4.4.2 Calcein AM/PI检测细胞存活 | 第48-50页 |
| 4.4.3 MSCs粘附和细胞形态 | 第50页 |
| 4.4.4 实时定量PCR (qRT-PCR)检测不同支架对MSCs分化的影响 | 第50-51页 |
| 4.4.5 不同支架对MSCs的ALP表达的影响 | 第51-54页 |
| 4.4.6 不同支架对MSCs钙结节的影响 | 第54-58页 |
| 4.5 讨讨论与分析 | 第58-59页 |
| 4.6 本章小结 | 第59-60页 |
| 5 HMGB 1 修饰骨组织工程支架对成骨分化和血管新生的影响 | 第60-78页 |
| 5.1 引言 | 第60页 |
| 5.2 材料与试剂 | 第60-61页 |
| 5.2.1 实验动物 | 第60页 |
| 5.2.2 实验仪器及耗材 | 第60页 |
| 5.2.3 实验试剂 | 第60-61页 |
| 5.2.4 主要试剂的配制 | 第61页 |
| 5.3 实验方法 | 第61-63页 |
| 5.3.1 皮下埋植实验材料 | 第61页 |
| 5.3.2 皮下埋植实验 | 第61页 |
| 5.3.3 石蜡切片 | 第61-62页 |
| 5.3.4 冰冻切片 | 第62页 |
| 5.3.5 免疫荧光染色 | 第62页 |
| 5.3.6 HE染色 | 第62页 |
| 5.3.7 免疫组织化学染色 | 第62-63页 |
| 5.4 实验结果 | 第63-75页 |
| 5.4.1 一般观察 | 第63页 |
| 5.4.2 HE染色结果 | 第63-64页 |
| 5.4.3 不同支架材料在体促成骨分化能力研究 | 第64-66页 |
| 5.4.4 在体研究不同支架材料对微血管血管新生的影响研究 | 第66-69页 |
| 5.4.5 在体研究不同支架材料对MSCs的招募作用 | 第69-72页 |
| 5.4.6 在体研究不同支架材料对MSCs的招募作用的原理 | 第72-74页 |
| 5.4.7 不同支架材料在皮下的炎症响应情况 | 第74-75页 |
| 5.5 讨论与分析 | 第75-76页 |
| 5.6 本章小结 | 第76-78页 |
| 6 HMGB 1 修饰骨组织工程支架在大鼠颅骨缺损模型中的修复效果 | 第78-88页 |
| 6.1 引言 | 第78页 |
| 6.2 材料与试剂 | 第78-79页 |
| 6.2.1 实验动物 | 第78页 |
| 6.2.2 实验仪器及耗材 | 第78页 |
| 6.2.3 实验试剂 | 第78-79页 |
| 6.2.4 主要试剂的配制 | 第79页 |
| 6.3 实验方法 | 第79页 |
| 6.3.1 颅骨缺损修复实验材料 | 第79页 |
| 6.3.2 大鼠颅骨缺损修复实验 | 第79页 |
| 6.3.3 切片、HE染色、免疫荧光以及免疫组织化学 | 第79页 |
| 6.4 实验结果 | 第79-85页 |
| 6.4.1 HE染色 | 第79-81页 |
| 6.4.2 OCN免疫组织化学染色 | 第81-82页 |
| 6.4.3 CD34免疫荧光染色 | 第82-85页 |
| 6.5 讨论与分析 | 第85页 |
| 6.6 本章小结 | 第85-88页 |
| 7 结论与展望 | 第88-90页 |
| 7.1 本文主要结论 | 第88-89页 |
| 7.2 后续研究工作展望 | 第89-90页 |
| 致谢 | 第90-92页 |
| 参考文献 | 第92-100页 |
| 附录 | 第100页 |
| A. 作者在攻读学位期间发表的论文目录 | 第100页 |
| B. 作者在攻读学位期间取得的科研成果目录 | 第100页 |
