摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第1章 文献综述 | 第10-19页 |
1.1 流行性感冒与流感病毒 | 第10-12页 |
1.1.1 流行性感冒 | 第10页 |
1.1.2 流感病毒 | 第10-12页 |
1.2 流感疫苗 | 第12-14页 |
1.2.1 鸡胚工艺生产流感疫苗 | 第13页 |
1.2.2 动物细胞工艺生产流感疫苗 | 第13-14页 |
1.3 MDCK细胞应用于流感疫苗生产 | 第14-17页 |
1.3.1 MDCK细胞大规模培养工艺 | 第14-15页 |
1.3.2 MDCK细胞无血清培养基 | 第15-16页 |
1.3.3 MDCK单细胞悬浮培养 | 第16-17页 |
1.4 本文研究的目的意义与主要研究内容 | 第17-19页 |
第2章 材料和方法 | 第19-22页 |
2.1 实验材料 | 第19-20页 |
2.1.1 细胞株 | 第19页 |
2.1.2 流感病毒株 | 第19页 |
2.1.3 培养基 | 第19页 |
2.1.4 实验材料及仪器 | 第19-20页 |
2.2 实验方法 | 第20页 |
2.2.1 贴壁细胞培养 | 第20页 |
2.2.2 悬浮细胞培养 | 第20页 |
2.2.3 病毒感染 | 第20页 |
2.3 分析方法 | 第20-21页 |
2.3.1 细胞计数 | 第20页 |
2.3.2 病毒血凝值的检测方法 | 第20-21页 |
2.3.3 细胞代谢的检测 | 第21页 |
2.4 数据处理 | 第21-22页 |
2.4.1 细胞活性的计算 | 第21页 |
2.4.2 细胞比生长速率的计算 | 第21页 |
2.4.3 MOI的计算 | 第21页 |
2.4.4 单细胞产毒量(svy)的计算 | 第21页 |
2.4.5 代谢速率的计算 | 第21-22页 |
第3章 MDCK悬浮细胞的基础培养基筛选、优化及驯化 | 第22-35页 |
3.1 引言 | 第22页 |
3.2 实验方案 | 第22-24页 |
3.3 结果与讨论 | 第24-33页 |
3.3.1 混料实验中MDCK细胞的生长情况 | 第24-26页 |
3.3.2 添加物组成及浓度对MDCK细胞生长的影响 | 第26-28页 |
3.3.3 驯化期间细胞的生长 | 第28-29页 |
3.3.4 驯化后MDCK-S2细胞生长及代谢情况 | 第29-33页 |
3.4 本章小结 | 第33-35页 |
第4章 胰酶及MOI等参数对MDCK-S2细胞生长及病毒产量的影响 | 第35-45页 |
4.1 引言 | 第35-36页 |
4.2 实验方案 | 第36页 |
4.3 结果与讨论 | 第36-44页 |
4.3.1 MOI对MDCK-S2细胞生长、代谢及病毒产量的影响 | 第36-40页 |
4.3.2 胰酶浓度与细胞密度对MDCK-S2细胞生长及病毒产量的影响 | 第40-44页 |
4.4 本章小结 | 第44-45页 |
第5章 用于流感疫苗生产的MDCK-S2细胞流加培养工艺的设计 | 第45-62页 |
5.1 引言 | 第45页 |
5.2 实验方案 | 第45-46页 |
5.2.1 批培养与换液培养模式的比较 | 第45页 |
5.2.2 流加策略的优化 | 第45-46页 |
5.3 结果与讨论 | 第46-61页 |
5.3.1 换液对病毒产量的影响 | 第46-49页 |
5.3.2 流加培养基FM流加策略的优化 | 第49-54页 |
5.3.3 基础培养基XP流加策略的优化 | 第54-61页 |
5.4 本章小结 | 第61-62页 |
第6章 全文总结及展望 | 第62-64页 |
6.1 全文总结 | 第62-63页 |
6.2 展望 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-68页 |
致谢 | 第68页 |