| 中文摘要 | 第12-13页 |
| ABSTRACT | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第15-24页 |
| 1.1 半夏的生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.1.1 半夏的形态特征 | 第15页 |
| 1.1.2 半夏的生态习性 | 第15页 |
| 1.1.3 半夏繁殖方式 | 第15页 |
| 1.1.4 半夏的化学成分 | 第15-16页 |
| 1.1.5 半夏药用价值 | 第16页 |
| 1.1.6 半夏面临的资源危机 | 第16页 |
| 1.2 国内外半夏组织培养及快繁技术研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2.1 半夏外植体的选择 | 第16-17页 |
| 1.2.2 半夏培养条件的研究 | 第17页 |
| 1.2.3 半夏再生方式的研究 | 第17-18页 |
| 1.3 半夏脱毒研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 半夏病毒研究进展 | 第18-19页 |
| 1.3.2 半夏脱毒方法研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 植物遗传转化研究进展 | 第20页 |
| 1.4.1 农杆菌介导单子叶植物遗传转化研究进展 | 第20页 |
| 1.4.2 半夏遗传转化研究进展 | 第20页 |
| 1.5 抗草甘磷半夏的获得及其草甘膦筛选体系的建立 | 第20-21页 |
| 1.5.1 草甘膦除草剂理化性质及作用机理 | 第20-21页 |
| 1.5.2 抗除草剂基因来源及抗性机理 | 第21页 |
| 1.6 研究目的、意义和技术路线 | 第21-24页 |
| 第二章 半夏再生体系的建立 | 第24-35页 |
| 2.1 实验材料与试剂 | 第24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第24页 |
| 2.1.2 实验试剂的配制 | 第24页 |
| 2.2 实验过程与方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 半夏无菌组培苗的获得 | 第24页 |
| 2.2.2 半夏叶柄的脱分化 | 第24-25页 |
| 2.2.3 半夏愈伤组织增殖 | 第25页 |
| 2.2.4 半夏愈伤组织分化 | 第25-26页 |
| 2.2.5 半夏愈伤组织的生根 | 第26页 |
| 2.2.6 半夏一步成苗的研究 | 第26页 |
| 2.2.7 炼苗和移栽 | 第26-27页 |
| 2.3 结果与分析 | 第27-34页 |
| 2.3.1 灭菌时间对半夏珠芽和种子的影响 | 第27-28页 |
| 2.3.2 半夏叶柄的脱分化 | 第28-29页 |
| 2.3.3 半夏愈伤组织的增殖 | 第29-30页 |
| 2.3.4 半夏愈伤组织的分化 | 第30-32页 |
| 2.3.5 半夏愈伤组织的生根 | 第32页 |
| 2.3.6 半夏一步成苗的研究 | 第32-33页 |
| 2.3.7 半夏组织培养总体生长过程 | 第33-34页 |
| 2.3.8 炼苗与移栽 | 第34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 半夏脱毒研究 | 第35-41页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第35页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂的配制 | 第35页 |
| 3.1.3 PCR所用引物 | 第35页 |
| 3.2 实验过程与方法 | 第35-39页 |
| 3.2.1 半夏脱毒组织扩繁的技术路线 | 第35-36页 |
| 3.2.2 病毒RNA模板的制备 | 第36-37页 |
| 3.2.3 cDNA的合成和PCR的扩增 | 第37页 |
| 3.2.4 18srRNA为内参照的RT-PCR方法检测半夏SMV和CMV病毒 | 第37-39页 |
| 3.3 结果与分析 | 第39-40页 |
| 3.3.1 半夏脱毒过程 | 第39页 |
| 3.3.2 RNA的提取和cDNA的合成 | 第39-40页 |
| 3.3.3 半夏脱毒苗SMV和CMV病毒检测 | 第40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 第四章 半夏遗传转化体系的建立 | 第41-48页 |
| 4.1 材料与试剂 | 第41-42页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第41页 |
| 4.1.2 菌株及质粒载体 | 第41页 |
| 4.1.3 主要工具酶及试剂 | 第41页 |
| 4.1.4 试剂盒 | 第41页 |
| 4.1.5 引物 | 第41-42页 |
| 4.1.6 农杆菌培养基YP培养基配制 | 第42页 |
| 4.1.7 半夏遗传转化所用溶液 | 第42页 |
| 4.1.8 CTAB法提取半夏DNA | 第42页 |
| 4.1.9 琼脂糖凝胶电泳 | 第42页 |
| 4.2 实验过程与方法 | 第42-45页 |
| 4.2.1 受体材料预培养 | 第42页 |
| 4.2.2 农杆菌的培养 | 第42-43页 |
| 4.2.3 菌种的保存 | 第43页 |
| 4.2.4 农杆菌质粒DNA提取及检测 | 第43页 |
| 4.2.5 质粒DNA浓度及纯度测量 | 第43-44页 |
| 4.2.6 酶切反应 | 第44页 |
| 4.2.7 草甘膦筛选压选择 | 第44页 |
| 4.2.8 叶盘法转化 | 第44页 |
| 4.2.9 CTAB法提取半夏基因组DNA | 第44-45页 |
| 4.2.10 PCR检测CP4目的基因 | 第45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-47页 |
| 4.3.1 农杆菌质粒载体鉴定 | 第45-46页 |
| 4.3.2 抗除草剂草甘膦的选择 | 第46页 |
| 4.3.3 叶盘法转化 | 第46-47页 |
| 4.3.4 转基因植株的PCR检测 | 第47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 讨论 | 第48-50页 |
| 5.1 半夏组织培养体系的建立 | 第48-49页 |
| 5.2 半夏脱毒快繁体系的建立 | 第49页 |
| 5.3 半夏遗传转化体系的建立 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简况及联系方式 | 第59-60页 |